黑龙江茴鱼人工繁殖韩英

黑龙江茴鱼ThymallusarcticusgrubeiDybowski的人工繁殖东北农业大学韩英研究背景黑龙江茴鱼（ThymallusarcticusgrubeiDybowski）属鲑形目、茴鱼科、茴鱼属，俗称斑鳟子，为一种典型的山涧溪流栖居冷水性鱼类。其肉味鲜美，体色艳丽，具有较高的经济价值，目前售价已达160～200元／kg。在我国自然分布于黑龙江流域的黑龙江、嫩江、牡丹江、乌苏里江、绥芬河等支流和溪流中，国外仅分布于俄罗斯境内。近年来由于捕捞强度过大、繁殖场所及生活环境恶化，黑龙江茴鱼自然资源量显著下降，被列为我国易危鱼类，开展其人工繁殖的研究十分必要。黑龙江省科技厅已将黑龙江茴鱼的人工繁殖列为“十一五”重点科技攻关课题。研究现状与研究目的黑龙江茴鱼的人工繁殖国外尚无报道。欧洲对北极茴鱼的研究较为广泛，如北极茴鱼产卵种群的统计、产卵场的迁移、人工催产和精液冷冻方法等。2006年徐革锋等首次进行了黑龙江茴鱼人工繁殖的研究。本研究的目的旨在充分掌握黑龙江茴鱼繁殖习性的前提下，进一步探索人工繁殖技术，为其自然资源的保护和人工养殖提供理论基础与成熟的技术。材料与方法试验用鱼

亲鱼为2006年秋季在牡丹江支流海浪河捕获，驯养于黑龙江水产研究所渤海冷水性鱼类试验站。2007年4月，选择体质健壮、体表无伤、成熟较好的雌亲鱼60尾，平均体重110.7（50.2～302.7）g，雄亲鱼88尾，平均体重为165.1（89.8～298.5）g，性比为1︰1.47。试验药品

BSS：即生理盐水缓冲液，pH为7.1。

催产剂：HCG（绒毛膜促性腺激素）、DOM+LRH－A2（马来酸地欧酮）、S－GnRH－A（鲑鱼促性腺激素释放激素类似物）。水源

地下涌泉：流量1.1m3/s，水温7～8℃，溶氧为11mg/L。

井水：水温为6～7℃，溶氧为8mg/L。孵化设备

泉水孵化：采用平列槽，孵化槽体积为0.048m3，四壁与底部装有300目筛绢。

井水孵化：采用不锈钢孵化桶（0.014m3），底部塑料板装有300目筛绢。试验方法怀卵量测定

取出卵巢称重后，取不同部位卵巢混合样品约1/3并称重，计数成熟卵粒数。绝对怀卵量=（样品卵粒数／样品重）×卵巢重；

相对怀卵量=绝对怀卵量/去内脏体重（g）。卵径测定随机取卵100粒，测定其长径的平均值；充分吸水膨胀1h后，测定其吸水后卵径。人工催产

雌鱼每kg体重DOM+LRH－A22mg、HCG1000IU、S－GnRH－A10ug，雄鱼剂量减半。采用胸腔一次注射。采卵、采精

0.5ml/L苯氧乙醇麻醉2～3min后，采用挤腹法采卵、采精。授精前检查精子活力，达到A级的精液方可使用。

人工授精

人工授精在避光处进行，采用干法与湿法授精。每组卵用3尾以上的雄鱼精液混精授精。

干法授精：将卵子挤入擦干的容器内，然后将精液直接滴于卵上，用羽毛轻轻搅动使精卵充分混合，然后加入清水，使卵受精。

湿法授精：将卵子先挤入少量等渗液（BSS）中，然后将精液滴于其中，迅速搅动，使精卵充分混合受精。人工孵化

受精卵静置1.0h后，抽样测量卵径以计算产卵量和确定孵化密度。捡出死卵，将受精卵轻轻放入孵化槽和孵化桶内，分别采用井水和泉水进行孵化。水流控制在0.001m3/s左右，每3d用0.06%的甲醛消毒20min。发眼后停止消毒，捡出死卵。出水口溶氧保持在5.5mg/L以上。发眼后均采用泉水孵化。试验结果雌雄区别

黑龙江茴鱼成熟期雌雄区别较为显著。雄鱼具有明显的婚姻色，背鳍高大，其基部到边缘有3～4行粉色斑点纵向排列而成的条纹，边缘有一棕色的条纹；胸鳍淡黄色；体侧有不规则的小黑斑，集中于侧线鳞之上及体前部；腹鳍上有3～5条淡蓝或粉红色的纵行条纹；胸鳍至腹鳍之间的腹部两侧各有一条黄色条纹；成熟雄鱼生殖孔略显长形，不红肿外突，挤压时会有乳白色精液流出。成熟雌鱼婚姻色不甚明显，其腹部略隆起，柔软并有弹性，生殖孔接近圆形，红肿外突，用手轻轻按压有摸到卵粒的感觉。怀卵量

测量成熟雌亲鱼20尾，其绝对怀卵量平均为2435（1024～3721）粒／尾，相对怀卵量平均为17（12～38）粒／g。

催产效果

水温7.5℃条件下，效应时间平均为144（96～192）h。催产率为95％。获卵11.1万粒，平均产卵量为1948（884～3504）粒／尾。

卵径

成熟卵为淡黄色，微粘性，平均卵径为2.15（1.97～2.53）mm。吸水充分膨胀后粘性消失，平均卵径为3.19（2.86～3.93）mm。

孵化效果

孵化期平均水温为7.5（6.5～10.2）℃。

发眼：90～95℃·d出现眼点，100～110℃·d时眼点明显。破膜：120～130℃·d时开始破膜，190～200℃·d破膜结束。上浮：240℃·d开始上浮；

260℃·d开口。黑龙江茴鱼人工孵化效果授精方法孵化方式发眼率％破膜率％上浮率％上浮仔鱼（尾）干法授精井水43.88±2.50a59.92±6.21a65.32±5.50a839，1040泉水60.38±1.22b70.92±0.72b69.80±2.05a1491，1607湿法授精井水57.18±2.92b66.54±3.30b69.62±0.50a1337，1470泉水70.59±1.48c89.97±2.33c86.66±2.51b2780，3022各项指标平均值干法52.1365.4267.56-湿法63.8978.2678.14-井水50.5363.2367.47-泉水65.4980.1378.23-总均值-58.0071.8472.85-注：肩标字母不同表示差异显著（P＜0.05）。孵化效果泉水孵化效果好于井水孵化，平均发眼率为65.49％，平均破膜率为80.13％，平均上浮率为78.23％。湿法授精效果好于干法授精，平均发眼率为63.89％，平均破膜率为78.26％，平均上浮率为78.14％。讨论催产效果

催产率：采用DOM+LRH－A2、HCG、S－GnRH－A组合催产，催产后第6d，大多数亲鱼卵游离，催产率高达95％，说明这种催产激素组合对黑龙江茴鱼有效。

效应时间与效应期长：7.5℃水温条件下，催产效应时间为6d左右。原因：（1）黑龙江茴鱼为冷水性鱼类，其效应时间比温水性鱼类长；（2）亲鱼均为野生，个体大小差异较大，大部分为初次催产，成熟程度不一，使效应期持续时间较长。措施：（1）尽量选择成熟度一致的亲鱼；（2）根据成熟情况采用两次注射法可能会有更好的效果。产卵量

黑龙江茴鱼的怀卵量平均为2435（1024～3721）粒／尾，与董崇智报道的2500～10000粒／尾差距较大，这可能与大多数雌鱼是初产，怀卵量小有关。不同授精方法及孵化方式的比较

不同的授精方式黑龙江茴鱼的发眼率、破膜率和上浮率存在显著差异。湿法授精效果显著好于干法授精的原因：在BSS等渗液中，精、卵能更好的混合，精子在BSS中也具有更好的活力，能够有效提高受精率。干法授精时，由于卵有一定黏性，搅拌或多或少会损伤一些卵的卵膜，导致水霉发病率增高，从而影响孵化效果。不同的孵化方式也使受精卵的孵化效果存在显著差异。泉水孵化效果显著好于井水孵化的原因：泉水的水质好，含有丰富的溶氧和无机盐，有利于胚胎发育；井水温度低，受精卵发育速度慢，也增加了水霉菌的感染几率。存在的问题由