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文档简介

微生物的菌种选育-霉菌的分离筛选霉菌菌落的特征：A、形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，呈现或松或紧的形状。B、菌落和培养基间的连接紧密，不易挑取，菌落正面与反面的颜色、构造，以及边缘与中心的颜色、构造常不一致。C、霉菌的菌丝有营养菌丝和气生菌丝的分化，而气生菌丝没有毛细管水，故它们的菌落必然与细菌或酵母菌的不同，较接近放线菌。

根霉菌孢子形态：

显微镜下根霉孢子形态：

根霉菌落形态：分离霉菌需要的材料

酒曲、马铃薯、葡萄糖、琼脂、蒸馏水、1mol/LNaOH、1mol/LHCl分离霉菌需要的设备高压蒸汽灭菌锅、电炉、天平、铁架台、灭菌培养皿、锥形瓶、漏斗、试管、烧杯、胶头滴管、石蕊试纸、接种环、酒精灯、量筒、玻璃棒、纱布、滤纸、试管塞、报纸、扎绳、标签、温箱、冰箱、盖玻片、载玻片、显微镜、杜氏管马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）的制备

将新鲜的马铃薯洗净、去皮，（注意：发霉、变绿的不要使用。）切成薄片或蚕豆大小的方块，称取所需的重量，倒入锅内，加水1000mL煮沸半小时左右，至马铃薯酥而不烂为止，用四层纱布过滤，然后将事先称好的琼脂加到上述滤液中，用小火加热，使之慢慢融化，并用玻棒不断搅拌，以免烧焦锅底。再加入事先用温水溶化的糖溶液，用二层纱布过滤。测定pH值，用1mol/L的NaOH或HCl调至pH为5.5～6.5之间，最后加水补足至1000mL。（1）水琼脂制备：将琼脂粉直接加入无菌水中在微波炉中加热至融化：如果将琼脂粉加入自来水中，则需要进行高温蒸汽灭菌，单孢分离常用2%水琼脂。（2）琼脂片制备：用1ml灭菌移液枪吸取2%的无菌水琼脂涂布在无菌载玻片上，厚度均匀。毛细管单胞打孔法获取霉菌单孢子毛细管单胞打孔法获取霉菌单孢子（3）孢子涂布：用灭菌挑针挑取一小块酒曲，一般会足以沾有霉菌的孢子，将其沾复到水琼脂片上，用灭菌波棒或毛细管沾取无菌水，稀释涂布孢子。或者用直径1mm的毛细管，在酒精灯下烧软后拉丝，折断后制作成细针（简称“毛细管针”）用毛细管针挑取孢子，直接涂布到水琼脂片上。（4）孢子选取：显微镜检（常用十倍物镜）涂有孢子的水琼脂片，找到典型孢子后，移入视野中央（要求视野内仅此一个孢子），然后下移载物台。毛细管单胞打孔法获取霉菌单孢子（5）琼脂打孔：取内径为1mm的毛细管，在酒精灯上烧软后弯成直角，短臂长约1cm。短臂端部在酒精灯上加热灭菌后，对准显微镜物镜下的光斑中央下压，在水琼脂上打一个直径1cm的圆饼，提升载物台到原来位置，观察目标孢子是否在琼脂并上，如果不在重新选取孢子（6）单胞转移：用无菌针或毛细管针，挑去带有目标孢子的琼脂饼转入马铃薯葡萄糖琼脂培养基中，有孢子的一面紧贴培养基，每皿可放3-5个单孢。室温下过夜培养12-20小时。（或放入设置好的培养箱中23-25℃），观察长出菌落的形态。1、光学显微

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