皂苷类化合物的理化检识

天然药物化学课程皂苷类化合物的提取分离理化检识项目七任务四皂苷化合物的理化检识1.单元导学2.泡沫试验3.溶血试验4.显色反应单元导学

学生通过这个任务的学习，能理解皂苷类化合物理化检识的方法，能对天然药物提取分离得到的皂苷类化合物进行理化检识。概述概述

从天然药物中提取分离得到的皂苷类单体化合物，需要经过物理和化学方法鉴定。

物理方法检识主要依据皂苷类化合物的形态、颜色等物理性质，以及熔点、比旋度等物理常数进行鉴别。

化学方法检识主要通过显色反应，利用皂苷在无水条件下，与强酸（硫酸、磷酸、高氯酸）、中等强酸（三氯醋酸）或某些Lewis酸（氯化锌、三氯化锑、五氯化锑）作用，会呈现颜色变化或显荧光的性质进行鉴别。

还可以用泡沫试验、溶血试验对皂苷类化合物进行检识。泡沫试验泡沫试验

取试样粉末1g，加水10mL，煮沸10min后过滤，取滤液1～2mL于带塞试管中，强烈振摇1min后，如产生持久性泡沫（维持15min以上），且泡沫量不少于液体体积的1/3，再把溶液加热至沸或加入乙醇，再振摇，如仍能产生大量持久性泡沫，表明可能含有皂苷。

需要注意，常用的增溶剂吐温、司盘的水溶液，振摇时也会产生持久性泡沫，出现假阳性反应；另外甘草皂苷等的水溶液泡沫量较少，出现假阴性反应。泡沫试验

本试验还可用来区分三萜皂苷和甾体皂苷。取两支试管分别加入5ml

0.1mol/L

HCl及0.1

mol/L

NaOH，各加天然药物水提液3滴，振摇1min后，如果两支试管的泡沫持久性和高度一样，表明水提液中含有三萜皂苷；如果碱液试管的泡沫比酸液试管的泡沫高数倍，且持续时间长，表明水提液中含有甾体皂苷。溶血试验

溶血试验1.滤纸试验

将1滴1%试样水溶液滴于滤纸上，干燥后，用2%红细胞试液喷雾，数分钟后，在红色背景下出现白色或淡黄色斑点，表明可能含有皂苷。2.试管试验

往试管中加入供试液1mL，加1.8%氯化钠溶液1mL及2%红细胞试液1mL，摇匀后放置，数分钟后，溶液变透明红色，表明可能含有皂苷。溶血试验

需要注意，某些皂苷没有溶血作用，天然药物提取物中某些萜类、胺类具有溶血作用，一般应先除去干扰成分，再做溶血试验。同时可以和胆甾醇沉淀法配合使用，如果胆甾醇沉淀后的滤液没有溶血作用，而沉淀溶解后有溶血作用，则表明含有皂苷。显色反应

显色反应

此类鉴别反应灵敏度较高，但专属性较差。1.醋酐-浓硫酸反应

将试样溶于醋酐中，加入冰冷的醋酐-浓硫酸（20：1）数滴，皂苷会呈现一系列颜色变化。其中，甾体皂苷呈现：黄色→红色→紫色→蓝色→绿色→褪色（反应较快）；三萜皂苷呈现：黄色→红色→紫色→褪色，不会呈现蓝绿色。

用此法可初步区别甾体皂苷和三萜皂苷。显色反应

2.三氯甲烷-浓硫酸反应

将试样溶于三氯甲烷，加入浓硫酸，三氯甲烷层呈现红色或蓝色，硫酸层呈现绿色荧光。由于三萜皂苷环上甲基取代较多，颜色反应比甾体皂苷慢。显色反应

3.三氯醋酸反应

将试样的三氯甲烷溶液点在滤纸上，喷25％三氯醋酸乙醇溶液，甾体皂苷反应较快，加热至

60℃时，呈现红色渐变为紫色；三萜皂苷反应较慢，加热到100℃时，呈现红色渐变为紫色。显色反应

4.五氯化锑反应

将试样的三氯甲烷或醇溶液点在滤纸上，喷20％五氯化锑三氯甲烷溶液（不含乙醇和水），干燥后，加热至60℃～70℃，显蓝色、灰蓝色或灰紫色斑点。显色反应