胶体层析法及酶联免疫吸附试验应用于HIV抗体检测中的价值比较

胶体层析法及酶联免疫吸附试验应用于HIV抗体检测中的价值比较

Summary目的对比胶体层析法及酶联免疫吸附试验应用于HIV抗体检测中的价值指标，分析优劣。方法从2020年3月至2022年3月,到我中心开展艾滋病自愿咨询检测者中筛选234位，分别采用胶体层析法及酶联免疫吸附试验，检测HIV抗体，比较其结果、灵敏度、特异性和准确率。结果两种检测方式检测所得结果相比，差异无统计学意义（P＞0.05），酶联免疫吸附试验应用于HIV抗体检测中灵敏度、特异性、准确率均显著高于胶体层析法（P＜0.05），差异有统计学意义。结论运用酶联免疫吸附试验检测人类免疫缺陷病毒抗体，可以提高检测的灵敏度、特异性和准确率，具有较高的临床应用价值。Keys艾滋病；胶体层析法；酶联免疫吸附试验；HIV抗体检测；人类免疫缺陷病毒Comparisonofcolloidalchromatographyandenzyme-linkedimmunosorbentassayinHIVantibodydetectionDalianShahekouDistrictCenterforDiseaseControlandPreventionDalian,LiaoningSunHai116021【Abstract】objective：ComparethevalueindexesofcolloidalchromatographyandELISAinHIVantibodydetection,andanalyzetheadvantagesanddisadvantages.Method：FromMarch2020toMarch2022,234peoplewhowenttoourcenterforvoluntaryHIVcounselingandtestingwerescreened,andcolloidalchromatographyandenzyme-linkedimmunosorbentassaywereusedtodetectHIVantibodies,andcomparetheirresults,sensitivity,specificityandaccuracy.Result：Therewasnosignificantdifferenceintheresultsobtainedbythetwodetectionmethods(P>0.05).Thesensitivity,specificityandaccuracyofenzyme-linkedimmunosorbentassayinHIVantibodydetectionweresignificantlyhigherthanthoseofcolloidchromatography(P<0.05).0.05),thedifferencewasstatisticallysignificant.Conclusion：Enzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)canimprovethesensitivity,specificityandaccuracyofdetectionofhumanimmunodeficiencyvirusantibody,andhashighclinicalapplicationvalue.【Keywords】AIDS；colloidalchromatography；Enzyme-linkedimmunosorbentassay；HIVantibodytest；humanimmunodeficiencyvirus艾滋病（acquiredimmunodeficiencysyndrome,AIDS）是由人类免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus,HIV)感染，以性传播为主要传播方式的免疫缺陷综合征。人类免疫缺陷病毒在人体内的潜伏期平均为8-9年，感染后会入侵人体免疫系统，主要通过攻击CD4+T淋巴细胞，导致人体免疫力低下，进而继发感染，患者多因严重并发症致死[1]。艾滋病传染率、致死率高，临床无有效治疗方案，已严重危及公共卫生安全。因此早期诊断，从源头预防疫情传播是控制AIDS流行趋势的关键[2]。HIV抗体检测是艾滋病诊断的重要依据，临床主要应用血清学试验，如胶体层析法、酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)等方法来进行HIV抗体初筛[3]。本研究分析了胶体层析法及酶联免疫吸附试验应用于开展艾滋病自愿咨询检测的应用价值，现将结果报告如下。1资料与方法1.1一般资料回顾性分析2020年3月至2022年3月我中心开展艾滋病自愿咨询检测234份检测者的信息资料。纳入标准：①与已知的HIV携带者发生性关系；②临床资料完整。排除标准：①经临床诊断确诊为HIV阳性患者；②伴肝、肾、心脑血管疾病及其他传染性疾病；③已在接受正规抗HIV免疫治疗；④伴严重精神方面问题；⑤伴血液及免疫系统缺陷。所有纳入研究的病患性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。1.2方法所有纳入研究的病患于空腹状态下静脉取血3ml，室温静置两小时后离心，离心条件为3000rpm/min，30min，后取上清，得待测血清，短期内使用可于-20℃存放，长期应贮存于-80℃。1.2.1仪器本研究所用仪器主要有多功能酶标仪(RT－2100C型，厦门市康鸿生物科技有限公司)；洗板机(RT－2600C型，深圳市雷杜电子有限公司)；蛋白印迹仪（AutoBlotSystem-20型，新加坡健利检验诊断有限公司）等。1.2.2胶体层析法HIV抗体胶体金免疫层析检测试剂盒（北京万泰生物药业有限公司）采用双抗夹心法，在硝酸纤维膜上的检测区域包被HIV-1和HIV1-2区段抗原，用胶体金标记同样含有的HIV-1和HIV1-2区段的标记抗原，用抗HIV抗体作为对照线原料包被到硝酸纤维膜上形成对照线。若待测样品为阳性，则形成“胶体金-抗原”免疫复合物，在检测区出现一条红线，若检测区无红线出现，则为阴性[4]。1.2.3酶联免疫吸附试验按照HIV抗体酶联免疫法检测试剂盒（北京万泰生物药业有限公司）说明书，将酶标板等所需实验材料提前恢复室温，根据实验设计设置标准孔、空白对照孔、样品孔，依说明书步骤准备洗涤缓冲液、标记抗体、标准样、待测样品，于酶标仪测450nm处吸光度。若最终计算结果中样品A值≥Cut-off，则该测试样品为阳性，反之为阴性[5]。1.3观察指标通过灵敏度、特异性、准确率来评价胶体层析法及酶联免疫吸附试验各自的HIV抗体检测效能。①灵敏度：检测样本中真阳性的例数值除以真阳性加上假阴性例数值的总和；②特异性：检测样本中真阴性的例数值与假阳性加上真阴性例数值总和的比；③准确率：检测样本中真阳性加上真阴性例数值的总和与所有例数值相加的比。1.4统计方法采用统计软件SPSS21.0进行分析。计量资料以（x±s）表示，采用ｔ检验。计数资料以％表示，采用x2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。2结果2.1对比两种检测方法应用于HIV抗体检测中的结果234份疑似AIDS检测者中，采用HIV抗体胶体金免疫层析检测，结果为阳性的有203例，阴性31例，阳性检出率为86.75%（203/234）；采用HIV抗体酶联免疫法检测，结果为阳性的有195例，阴性39例，阳性检出率为83.33%（195/234）。两种检测方式检测所得结果相比，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。表1.两种检测方法的艾滋病抗体阳性率比较(n)检测方法检测结果胶体层析法合计阳性阴性酶联免疫吸附试验阳性1914195阴性122739合计203312342.2两种检测方法灵敏度、特异性和准确率的对比酶联免疫吸附试验应用于HIV抗体检测中灵敏度、特异性、准确率均显著高于胶体层析法（P＜0.05），差异有统计学意义，见表2。表2.两种检测方法灵敏度、特异性和准确率的对比(%)组别灵敏度特异性准确率胶体层析法90.64(184/203)70.96(22/31)92.73(217/234)酶联免疫吸附试验97.94(191/195)89.74(35/39)95.29(223/234)x27.5213.845.357P2＜0.05＜0.05＜0.053讨论艾滋病的流行，是公共卫生当局需要高度重视的问题，中国在艾滋病防治方面同样面临许多挑战。经济制度的转变以及城市化进程的加速都塑造了中国艾滋病的流行病学特征，主要表现为存在区域和年龄显著差异,都市的同性性传播明显高于农村地区，其中于青年群体中，男男同性性传播更是逐渐成为人类免疫缺陷病毒传播的主要方式[6]。目前对于艾滋病，临床并未给出一个能使患者完全康复的治疗方案，只能尽量帮助患者提升免疫力、改善生活质量、尽可能延长生命进程。因此，早期诊断、早期预防疫情传播，对于控制AIDS流行趋势极为重要。HIV抗体检测是最常见也是最有效的针对人类免疫缺陷病毒的检测试验。本研究中所探讨的胶体层析法及酶联免疫吸附试验因其成本低、操作相对简单，常被用于可能携带人类免疫缺陷病毒的高危人群的大范围初筛。除了对于成本及操作的考量，更重要的是检测方法的灵敏度、特异性以及检测结果准确率。灵敏度是评价检测方案检测阳性能力的指标，灵敏度不够会导致对阳性病例的遗漏，假阴性结果增多，加重疫情的传播风险。特异性是评价检测方案检测阴性能力的指标，特异性缺失会导致对阴性病例的误诊，假阳性结果虚高，不仅浪费公共卫生资源，而且对检测者本身也会带来巨大的心理冲击[7]。准确率是对检测方案整体检测能力的概括，准确率越高，灵敏度及特异性也就越高，效能就越好。本研究中，我们回顾性分析了于2020年3月至2022年3月我中心开展艾滋病自愿咨询检测的234份疑似AIDS检测者的病历资料，均采用胶体层析法及酶联免疫吸附试验检测血清中的HIV抗体。通过对检测结果的分析，以及对两种检测方案灵敏度、特异性以及准确率的对比显示，胶体层析法的阳性检出率为86.75%，酶联免疫法阳性检出率为83.33%，二者之间差异无统计学意义（P＞0.05）。胶体层析法的灵敏度、特异性以及检测结果准确率分别为90.64%、70.96%、92.73%，均显著低于酶联免疫法97.94%、89.74%、95.29%，（P＜0.05），差异有统计学意义。体现出在应用于人类免疫缺陷病毒抗体检测时，酶联免疫吸附试验有更高的临床价值。但，酶联免疫法并不能完全排除假阳性或假阴性病例，此方法仍存在一定的错误率，这可能是由于检测过程中步骤繁杂，提示检测员应更加谨慎，注意各步骤操作的要求，尽量降低相关因素的干扰[8]。总之，采用酶联免疫吸附试验检测人类免疫缺陷病毒抗体的灵敏度、特异性和准确率较高，具有突出的临床应用价值。Reference[1]王全慧.酶联免疫法检测艾滋病毒抗体的效果进展分析[J].继续医学教育,2018,32(3):142-144.[2]胡建辉,袁磊,杜茂林,等.Verhulst模型在中国艾滋病预测研究中的应用[J].中国艾滋病性病,2019,25(10):1026-1029.[3]李鹏宇,采云,郗科.新兵HIV抗体筛查酶联免疫法和金标法的比较[J].武警医学,2018,29(9):905-906.[4]夏燕,郭志宏,罗明宇,等.四种HIV抗体确证试剂盒用于HIV感染检测性能的比较研究[J].中华实验和临床病毒学杂志,2021,35(2):218-223．[5]陈才会.胶体金法及酶联免疫法应用于