6-细胞的能量转换-线粒体和叶绿体1

6-细胞的能量转换-线粒体和叶绿体1第一页，共60页。第一节线粒体与氧化磷酸化●线粒体的形态结构●线粒体的化学组成及酶的定位●氧化磷酸化(线粒体的功能)●线粒体与疾病第二页，共60页。一、线粒体的形态结构

●线粒体的形态、大小、数量与分布●线粒体的超微结构◆外膜(outermembrane）：含孔蛋白(porin)，通透性较高。◆内膜（innermembrane）：高度不通透性，向内折叠形成嵴（cristae）。含有与能量转换相关的蛋白◆膜间隙（intermembranespace）：含许多可溶性酶、底物及辅助因子。◆基质（matrix）或内室：含三羧酸循环酶系、线粒体基因表达酶系等以及线粒体DNA,RNA，核糖体。第三页，共60页。Structuresofthemitochondrion管状嵴线粒体第四页，共60页。第五页，共60页。第六页，共60页。人黑色素瘤细胞线粒体第七页，共60页。二、线粒体的化学组成及酶的定位●线粒体组分分离方法●线粒体的化学组成●线粒体酶的定位第八页，共60页。第九页，共60页。第十页，共60页。线粒体的化学组成◆蛋白质(线粒体干重的65～70％)◆脂类(线粒体干重的25～30％)：·磷脂占3/4以上，外膜主要是卵磷脂，内膜主要是心磷脂。 ·线粒体脂类和蛋白质的比值:0.3:1（内膜）；1:1（外膜）

第十一页，共60页。三、氧化磷酸化

线粒体主要功能是进行氧化磷酸化，合成ATP，为细胞生命活动提供直接能量；与细胞中氧自由基的生成、细胞凋亡、细胞的信号转导、细胞内多种离子的跨膜转运及电解质稳态平衡的调控有关。 ●氧化磷酸化(oxidativephosphorylation)的分子基础 ●氧化磷酸化的偶联机制—化学渗透假说(ChemiosmoticHypothesis,Mithchell,1961) ●质子动力势的其他作用 ●线粒体能量转换过程略图第十二页，共60页。真核细胞线粒体中代谢反应第十三页，共60页。氧化磷酸化的分子基础

◆氧化磷酸化过程实际上是能量转换过程，即有机分子中储藏的能量高能电子质子动力势ATP◆氧化(电子传递、消耗氧,放能)与磷酸化(ADP+Pi，储能)同时进行，密切偶连，分别由两个不同的结构体系执行 ◆电子传递链(electron-transportchain）的四种复合物，组成两种呼吸链：NADH呼吸链(复合物I,III,IV组成)FADH2呼吸链（复合物II,III,IV组成） ◆在电子传递过程中，有几点需要说明 ◆ATP合成酶（ATPsynthase）(磷酸化的分子基础)第十四页，共60页。电子传递链（呼吸链）的四种复合物(哺乳类)

◆复合物Ⅰ：NADH-CoQ还原酶复合物（既是电子传递体又是质子移位体）组成：含42个蛋白亚基，至少6个Fe-S中心和1个黄素蛋白。作用：催化NADH氧化，从中获得2高能电子辅酶Q；泵出4H+◆复合物Ⅱ：琥珀酸脱氢酶复合物（是电子传递体而非质子移位体）组成：含FAD辅基，2Fe-S中心，作用：催化2低能电子FADFe-S辅酶Q(无H+泵出)◆复合物Ⅲ：CoQ-细胞色素c还原酶（既是电子传递体又是质子移位体）组成：包括1cytc1、2cytb、1Fe-S蛋白作用：催化电子从UQH2cytc；泵出4H+（2个来自UQ，2个来自基质）◆复合物Ⅳ：细胞色素C氧化酶（既是电子传递体又是质子移位体）组成：二聚体，每一单体含13个亚基，

三维构象，cyta,cyta3,2Cu

作用：催化电子从cytc分子O2形成水，2H+泵出，2H+参与形成水第十五页，共60页。线粒体内膜呼吸链电子传递示意图第十六页，共60页。第十七页，共60页。在电子传递过程中，有几点需要说明◆四种类型电子载体：黄素蛋白、细胞色素(含血红素辅基)、Fe-S中心、辅酶Q。前三种与蛋白质结合，辅酶Q为脂溶性醌。◆电子传递起始于NADH脱氢酶催化NADH氧化，形成高能电子(能量转化)，终止于O2形成水。

◆电子传递方向按氧化还原电势递增的方向传递(NAD+/NAD最低，H2O/O2最高)◆高能电子释放的能量驱动线粒体内膜三大复合物(H+-泵)将H+从基质侧泵到膜间隙，形成跨线粒体内膜H+梯度(能量转化)◆电子传递链各组分在膜上不对称分布第十八页，共60页。第十九页，共60页。ATP合成酶(磷酸化的分子基础)◆分子结构◆线粒体ATP合成系统的解离与重建实验证明电子传递与ATP合成是由两个不同的结构体系执行,

F1颗粒具有ATP酶活性◆工作特点：可逆性复合酶，即既能利用质子电化学梯度储存的能量合成ATP,又能水解ATP将质子从基质泵到膜间隙◆ATP合成机制—BandingChangeMechanism(Boyer1979)◆亚单位相对于亚单位旋转的直接实验证据第二十页，共60页。第二十一页，共60页。氧化磷酸化的偶联机制—化学渗透假说◆化学渗透假说内容：电子传递链各组分在线粒体内膜中不对称分布，当高能电子沿其传递时，所释放的能量将H+从基质泵到膜间隙，形成H+电化学梯度。在这个梯度驱使下，H+穿过ATP合成酶回到基质，同时合成ATP,电化学梯度中蕴藏的能量储存到ATP高能磷酸键。◆质子动力势(protonmotiveforce)◆支持化学渗透假说的实验证据该实验表明：·质子动力势乃ATP合成的动力·膜应具有完整性·电子传递与ATP合成是两件相关而又不同的事件第二十二页，共60页。“化学渗透假说”(ChemiosmoticTheory)。认为：•电子沿呼吸链传递时，所释放的能量将质子从内膜基质侧（matrix）泵至膜间隙（intrmembranespace），形成质子动力势（△P）。•△P=Ψ-(2.3RT/F)△pH–其中：△pH=pH梯度，Ψ=电位梯度，T=绝对温度，R=气体常数，F为法拉第常数，当温度为25℃时△P的值为220mV左右。第二十三页，共60页。质子动力势的其他作用◆物质转运◆产热：冬眠动物与新生儿的BrownFatCell线粒体产生大量热量第二十四页，共60页。四线粒体与疾病线粒体是细胞内最易受损伤的一个敏感的细胞器与人的疾病、衰老和细胞凋亡有关，线粒体异常会影响整个细胞的正常功能，从而导致病变。例如:克山病是一种心肌线粒体病，因缺乏硒而引起衰老：细胞中线粒体数量随年龄增长而减少，而体积却随年龄增长而增大。第二十五页，共60页。第二节叶绿体与光合作用●叶绿体(Chloroplast)的形态结构●叶绿体的功能—光合作用(photosynthesis)第二十六页，共60页。一、叶绿体(Chloroplast)的形态结构●叶绿体与线粒体形态结构比较 叶绿体内膜并不向内折叠成嵴；内膜不含电 子传递链；除了膜间隙、基质以外还有类囊体； 捕光系统、电子传递链和ATP合成酶都位于类囊体 膜上。

●叶绿体超微结构第二十七页，共60页。（一）叶绿体膜(叶绿体被膜chloroplastmembrane)•双层膜组成，膜间为10~20nm的间隙。•外膜的渗透性大。•内膜对通过物质的选择性很强，CO2、O2、Pi、H2O、等可以透过内膜，ADP、ATP、NADP+、葡萄糖等及焦磷酸不能透过内膜，需要特殊的转运体（translator）才能通过内膜。第二十八页，共60页。（二）类囊体(thylakoid)•是膜围成的扁平囊。主要成分是蛋白质和脂类（60：40），不饱和脂肪酸含量高（约87%），膜流动性高。•基粒（grana）：扁平小囊堆叠而成，每个叶绿体含40~60个。•基质类囊体(stromathylakoid)：连接基粒的没有堆叠的类囊体。•膜的内在蛋白主要有：细胞色素bf、捕光复合体（LHC）、质体醌（PQ）、质体蓝素（PC）、铁氧化还原蛋白（FD）、黄素蛋白、光系统I、II复合物等。第二十九页，共60页。（三）基质•是叶绿体内膜与类囊体之间是流动性的基质，其中悬浮着片层系统。•主要成分包括：•碳同化相关的酶类：如核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶（RuBP羧化酶）占基质可溶性蛋白总量的60%。•叶绿体DNA、蛋白质合成体系：如，ctDNA、各类RNA、核糖体等。•一些颗粒成分：如淀粉粒、质体小球和植物铁蛋白等。第三十页，共60页。Chloroplast基粒类囊体膜基质叶绿体外膜与内膜淀粉颗粒第三十一页，共60页。第三十二页，共60页。第三十三页，共60页。 二、叶绿体的功能—光合作用 (photosynthesis)光合作用:绿色植物叶肉细胞的叶绿体吸收光能，利用水和二氧化碳合成糖类等有机化合物，同时放出氧的过程称为光合作用。(1)光合电子传递反应—光反应(LightReaction)

(2)碳固定反应—暗反应(DarkReaction)●光反应●暗反应(光合碳同化)●光合作用与有氧呼吸的关系图第三十四页，共60页。光反应

在类囊体膜上由光引起的光化学反应，通过叶绿素等光合色素分子吸收、传递光能，并将光能转换为电能（生成高能电子），进而通过电子传递与光合磷酸化将电能转换为活跃化学能，形成ATP和NADPH并放出O2的过程。包括原初反应、电子传递和光合磷酸化。◆原初反应（primaryreaction) ·光能的吸收、传递与转换，形成高能电子 (由光系统复合物完成，光合作用单位的概念)◆电子传递与光合磷酸化第三十五页，共60页。非循环式光合磷酸化PSII接受红光后，激发发态P680*从水光解得到电子，传递给NADP+，电子传递经过两个光系统，在传递过程中产生的H+梯度驱动ATP的形成。这个过程中，电子传递是一个开放的通道，故称为非循环光合磷酸化。第三十六页，共60页。循环式光合磷酸化PSI接受远红光后，产生的电子经过A0、A1、FeS和Fd,又传给Cytbf和PC而流回到PSI。电子循环流动，产生H+梯度，从而驱动ATP的形成。这种电子的传递是一个闭合的回路，故称为循环式光合磷酸化。第三十七页，共60页。两个光系统的协调作用第三十八页，共60页。暗反应(光合碳同化)

利用光反应产生的ATP和NADPH，使CO2还原为糖类等有机物，即将活跃的化学能最后转换为稳定的化学能，积存于有机物中。这一过程不直接需要光(在叶绿体基质中进行)。◆卡尔文循环（Calvincycle）（C3途径）◆C4途径或Hatch-Slack循环◆景天科酸代谢途径第三十九页，共60页。Electrontransportinthethylakoidmembrane第四十页，共60页。第四十一页，共60页。第三节线粒体和叶绿体是半自主性细胞器●半自主性细胞器的概念： 自身含有遗传表达系统(自主性)；但编码 的遗传信息十分有限，其RNA转录、蛋白质翻译、自身构建和功能发挥等必须依赖核基因组编码的遗传信息(自主性有限)。●线粒体和叶绿体的DNA●线粒体和叶绿体的蛋白质合成●线粒体和叶绿体蛋白质的运送与组装第四十二页，共60页。三、叶绿体的半自主性•线粒体与叶绿体的相似性：•①均由两层膜包被，内外膜的性质、结构有显著的差异。•②均为半自主性细胞器，具有自身的DNA及转译体系。因此绿色植物细胞内存在3个遗传系统。•③叶绿体的ctDNA不足以编码叶绿体所需的全部蛋白质，因此必须依靠于核基因来编码其余的蛋白质。通过定向转运进入叶绿体的各部分。第四十三页，共60页。一、线粒体和叶绿体的DNA

(mtDNA/ctDNA)●mtDNA/ctDNA形状、数量、大小

●mtDNA和ctDNA均以半保留方式进行自我复制●mtDNA复制的时间主要在细胞周期的S期及G2期，DNA先复制，随后线粒体分裂。ctDNA复制的时间在G1期。复制仍受核控制第四十四页，共60页。mtDNA/ctDNA形状、数量、大小◆双链环状(除绿藻mtDNA，草履虫mtDNA)◆mtDNA大小在动物中变化不大，但在植物中变化较大高等植物，120kbp~200kbp；◆人mtDNA：16,569bp，37个基因(编码12S,16SrRNA；22种tRNA；13种多肽：NADH脱氢酶7个亚基，cytb-c1复合物中1个cytb，细胞色素C氧化酶3个亚基，ATP合成酶2个Fo亚基)第四十五页，共60页。二、线粒体和叶绿体的蛋白质合成●

线粒体和叶绿体合成蛋白质的种类十分有限●线粒体或叶绿体蛋白质合成体系对核基因组具有依赖性●不同来源的线粒体基因，其表达产物既有共性，也存在差异●参加叶绿体组成的蛋白质来源有３种情况：

◆由ctDNA编码，在叶绿体核糖体上合成；

◆由核DNA编码，在细胞质核糖体上合成；

◆由核DNA编码，在叶绿体核糖体上合成。第四十六页，共60页。酵母线粒体主要酶复合物的生物合成第四十七页，共60页。三、线粒体和叶绿体蛋白质的运送与组装●线粒体蛋白质的运送与组装 ◆定位于线粒体基质的蛋白质的运送 ◆定位于线粒体内膜或膜间隙的蛋白质运送 ●叶绿体蛋白质的运送及组装第四十八页，共60页。第四十九页，共60页。第五十页，共60页。第四节线粒体和叶绿体的增殖与起源●线粒体和叶绿体的增殖●线粒体和叶绿体的起源第五十一页，共60页。一、线粒体和叶绿体的增殖●线粒体的增殖：由原来的线粒体分裂或出芽而来。 ●叶绿体的发育和增殖◆个体发育：由前质体（proplastid）分化而来。 ◆增殖：分裂增殖第五十二页，共60页。附：线粒体的增殖线粒体来源于已有的线粒体的分裂。1.间壁分离：分裂时先由内膜向中心皱褶，将线粒体分为两个，常见于鼠肝和植物分生组织中。2.收缩后分离：通过中部缢缩分裂为两个。3.出芽：见于酵母和藓类植物，线粒体出现小芽，脱落后长大，发育为线粒体。第五十三页，共60页。叶绿体的增殖•在个体发育中叶绿体由前质体发育而来。•在有光条件下前质体的小泡数目增加并融合形成片层，发育为基粒，形成叶绿体。•在黑暗生长时，原质体小泡融合速度减慢，并转变为排列成网格的三维晶格结构，称为原片层，这种质体称为黄色体。在有光下仍可发育为叶绿体。•幼小叶绿体能靠分裂而增殖。•成熟叶绿体一般不再分裂或很少分裂。第五十四页，共60页。二、线粒体和叶绿体的起源●内共生起源学说（en