微生物疱疹病毒专家讲座

第32章人疱疹病毒

Humanherpesviruses,HHV微生物疱疹病毒第1页学习要求1熟悉疱疹病毒种类、共同特点。2掌握单纯疱疹病毒种类、致病性；水痘-带状疱疹病毒潜伏感染特征；巨细胞病毒感染特点；EB病毒特异性抗原、引发疾病。3熟悉疱疹病毒与肿瘤关系；EB病毒致病机理；疱疹病毒防治标准。4了解疱疹病毒微生物学检验方法。微生物疱疹病毒第2页概述疱疹病毒(HPV)是一群中等大小双链DNA病毒,现有114个组员，其中8个对人致病：人类疱疹病毒1型:单纯疱疹病毒I型（HSV–1）人类疱疹病毒2型:单纯疱疹病毒II型（HSV–2）人类疱疹病毒3型:水痘–带状疱疹病毒（VZV）人类疱疹病毒4型:EB病毒（EBV）人类疱疹病毒5型:巨细胞病毒（CMV）人类疱疹病毒6型（HHV–6）人类疱疹病毒7型（HHV–7）人类疱疹病毒8型（HHV–8）微生物疱疹病毒第3页疱疹病毒分为三个亚群：

亚群（HSV–1，HSV–2，VZV）：病毒增殖快，复制周期短；快速破坏宿主细胞，宿主细胞范围广。

亚群（CMV，HHV–6）：病毒增殖慢，复制周期长；宿主细胞范围局限。亚群（EBV）：宿主细胞范围极受局限。微生物疱疹病毒第4页人类疱疹病毒种类及其所致疾病病毒所致疾病单纯疱疹病毒I型

单纯疱疹病毒II型

水痘-带状疱疹病毒

EB病毒

巨细胞病毒

人疱疹病毒6型

人疱疹病毒7型

人疱疹病毒8型

猿猴B病毒龈口炎、唇疱疹、角膜结膜炎、脑炎、甲沟炎

生殖器疱疹、新生儿疱疹

水痘、带状疱疹、肺炎、脑炎

传染性单核细胞增多症、多克隆B淋巴细胞淋巴瘤、X染色体相关性淋巴细胞综合征、Burkitt淋巴瘤、鼻咽癌

巨细胞包涵体病、输血后传染性单核细胞增多症、先天性畸形、肝炎、间质性肺炎、视网膜炎

婴儿急疹、幼儿急性发烧病、间质性肺炎

末确定

Kaposi肉瘤

脑炎微生物疱疹病毒第5页1.形态结构：球形，直径为120~300nm。核衣壳结构包含双股线形DNA和呈20面体对称排列蛋白衣壳；核衣壳外有双层脂类糖蛋白包膜，包膜上有小刺突。

疱疹病毒共同特点：微生物疱疹病毒第6页2.除EBV，HHV–6外,均能在人二倍体细胞核内复制，经过核膜出芽，由胞吐或细胞溶解方式释放病毒。核内有嗜酸性包涵体。病毒可经过细胞间桥直接扩散。感染细胞与邻近未感染细胞融合，形成多核巨细胞。微生物疱疹病毒第7页3.感染特点病毒感染宿主细胞，主要表现为：显性感染：病毒增殖，细胞破坏，出现临床症状。潜伏感染：病毒不增殖，也不破坏细胞，病毒与宿主细胞处于暂时平衡状态。整合感染：病毒基因组一部分可整合于宿主细胞DNA中，造成细胞转化。先天性感染：病毒经胎盘感染胎儿，造成胎儿畸形。微生物疱疹病毒第8页疱疹病毒潜伏感染部位：HSV–1三叉神经节，颈上和迷走神经节HSV–2骶神经节VZV

脊髓后跟神经节或颅神经感觉神经节CMV唾液腺、乳腺、肾脏等EBVB淋巴细胞HHV–6B和T淋巴细胞微生物疱疹病毒第9页

HSV1HSV2VZVEBVCMV微生物疱疹病毒第10页Herpessimplexvirus,HSVHHV-1第一节单纯疱疹病毒微生物疱疹病毒第11页一、生物学性状微生物疱疹病毒第12页单纯疱疹病毒，因为在感染急性期发生水疱性皮疹即所谓单纯疱疹而得名有两种血清型：HSV-1和HSV-2，两型病毒DNA有50％同源性，两型感染部位不一样。HSV-1：

引发腰以上皮肤、粘膜、器官感染HSV-2：主要引发生殖器及腰以下皮肤疱疹微生物疱疹病毒第13页一、生物学性状HSV含有经典疱疹科病毒形态。微生物疱疹病毒第14页基因组：150kb,编码70各种蛋白与病毒复制相关：核糖核苷酸还原酶、胸苷激酶等与细胞相互作用相关：

糖蛋白：位于病毒体表面，是诱导机体产生免疫反应主要抗原。当前已发觉并正式命名有11种，分别是gB、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gJ、gK、gL、gM。微生物疱疹病毒第15页糖蛋白主要功效gB、gC、gD、gH与病毒吸附和穿入相关，gB含有黏附和融合两种功效，gD诱导产生中和抗体作用最强gCgE/gI补体C3b受体IgGFc受体gG型特异性抗原gC、gE/gI与HSV免疫逃避机制相关HSV主要包膜糖蛋白功效微生物疱疹病毒第16页生物学性状HSV培养特征

HSV可在各种细胞中增殖，惯用原代新生兔肾、人胚肺、人胚肾、人羊膜等细胞培养。病毒感染细胞后，CPE发展快速，表现为细胞肿胀、变圆和产生嗜酸性核内包涵体。

HSV对动物感染范围较广。惯用试验动物有家兔、豚鼠、小鼠等。因为接种路径不一样，感染类型也不一样。如脑内接种引发疱疹性脑炎；角膜接种引发疱疹性角膜炎。

微生物疱疹病毒第17页CPE微生物疱疹病毒第18页二、致病性与免疫性微生物疱疹病毒第19页人群感染率高，广泛存在潜伏感染传染源

病人和健康带毒者传输路径亲密接触、性接触、飞沫

HSV-1普通经过口腔或污染手及飞沫感染HSV-2普通经过性接触传输微生物疱疹病毒第20页HSV感染较普遍

亲密接触和性接触经粘膜和破损皮肤上皮细胞内复制，水疱浆液充满病毒颗粒，细胞碎片，基底部多核巨细胞；神经细胞则为潜伏感染。皮肤损伤性水疱微生物疱疹病毒第21页原发感染潜伏感染和复发HSV-1：三叉神经节和颈上神经节HSV-2：骶神经节先天性感染感染类型微生物疱疹病毒第22页HSV-1直接密切接触婴幼儿等易感人群龈口炎、疱疹性角膜结膜炎、皮肤疱疹性湿疹、疱疹性甲沟炎或疱疹性脑炎等HSV-2性接触原发性生殖器疱疹感染类型：1、原发感染：首次显性感染极少见，约90%为隐性感染，少数出现临床症状微生物疱疹病毒第23页原发感染唇疱疹齿龈炎脓性指头炎生殖器疱疹微生物疱疹病毒第24页HSV原发感染后，大部分病毒被消除，少数病毒潜伏在神经节中而不引发症状，与机体处于相对平衡状态。当机体受到一定刺激时，潜伏病毒被激活重新增殖，沿神经轴突下行到神经末梢支配粘膜上皮细胞内增殖，引发复发性局部疱疹。复发出现在同一部位。HSV-1潜伏于三叉神经节、颈上神经节HSV-2潜伏于骶神经节感染类型：2、潜伏感染与复发：微生物疱疹病毒第25页

潜伏感染

原发感染后,HSV由感觉神经

HSV-1:三叉神经节和颈上神经节HSV-2:骶神经节

潜伏HSV不复制，反抗病毒药品不敏感微生物疱疹病毒第26页复发性感染

非特异性刺激：发烧、月经、感染等

激活潜伏病毒沿感觉神经纤维下行到末梢（原发部位）

感染粘膜或皮肤上皮细胞

免疫记忆反应

病程短,组织损伤轻,感染更局限

微生物疱疹病毒第27页微生物疱疹病毒第28页微生物疱疹病毒第29页微生物疱疹病毒第30页微生物疱疹病毒第31页流产早产死胎先天性畸形新生儿疱疹胎盘产道母体感染类型：3、先天性及初生儿感染：微生物疱疹病毒第32页先天性感染及新生儿感染

因原发感染或潜伏感染HSV-1被激活，HSV经过胎盘，引发先天畸形、智力低下、流产等。生殖器疱疹：新生儿经产道感染，发生新生儿疱疹。微生物疱疹病毒第33页经产道感染新生儿疱疹微生物疱疹病毒第34页患生殖器疱疹，宫颈癌高发宫颈癌患者抗HSV-2（+）脱落细胞涂片HSV-2抗原（+）两种病好发部位相同癌细胞中有HSV-2基因片段动物试验可诱发肿瘤HSV-2与宫颈癌（相关）微生物疱疹病毒第35页

免疫性IFN和NK细胞：限制原发感染发展中和抗体：阻断病毒扩散，但不能有效组织病毒向神经组织移行细胞免疫：起更主要作用，控制和消除HSV感染对潜伏在神经节细胞内病毒均无作用微生物疱疹病毒第36页三、微生物学检验法微生物疱疹病毒第37页检测抗原

刮取疱疹基底部组织荧光素或酶标识抗体染色检验疱疹病毒抗原，亦可寻找核内包涵体和多核巨细胞检测核酸

PCR或原位杂交检测HSVDNA分离病毒

标本：水疱液、唾液或CSF细胞：BHK-21，VeroCPE：细胞肿胀；融合细胞；包涵体微生物疱疹病毒第38页四、防治标准微生物疱疹病毒第39页防治标准预防防止同患者接触预防医院内感染剖腹产预防新生儿感染

HSV有致癌可能性，减毒活疫苗和死疫苗不宜用于人体包膜蛋白（提纯gG、gD）亚单位疫苗

微生物疱疹病毒第40页治疗ACV（无环鸟苷）用于治疗口唇疱疹，疱疹性脑炎、生殖器疱疹、新生儿疱疹等，能缓解症状、缩短病程，但不能预防潜伏感染再发。微生物疱疹病毒第41页Varicellazostervirus（VZV）第二节水痘-带状疱疹病毒微生物疱疹病毒第42页水痘-带状疱疹病毒（VZV）人是VZV唯一自然宿主皮肤是病毒主要靶细胞可由同一个病毒引发两种不一样病症儿童首次感染引发水痘潜伏体内病毒受到一些刺激后复发引发带状疱疹，多见于成年人和老年人微生物疱疹病毒第43页与HSV相同：①潜伏神经细胞，引发复发感染②细胞免疫限制和预防重症水痘③皮肤损伤以水疱为特征④编码TK等,反抗病毒药品敏感与HSV不一样：

①呼吸道感染②经过病毒血症播散至皮肤一、生物学性状微生物疱疹病毒第44页VZV基本性状基本性状与HSV相同只有一个血清型对普通试验动物不敏感，在人胚成纤维细胞中增殖，并迟缓产生细胞病变微生物疱疹病毒第45页水痘和带状疱疹二、致病性与免疫性微生物疱疹病毒第46页致病性传染源主要是患者，病毒借飞沫经呼吸道或接触传输感染类型原发感染和潜伏感染微生物疱疹病毒第47页1、原发感染（多见儿童）儿童：好发年纪为3～9岁，多在冬春季流行。皮疹分布呈向心性，躯干比面部和四肢多。病情较轻。但在细胞免疫缺点、白血病或长久使用免疫抑制剂儿童可表现为重症，甚至危及生命。成人：20%～30%并发肺炎。普通病情重，病死率亦高。孕妇：表现亦较严重，并可引发胎儿畸形、流产或死产。微生物疱疹病毒第48页病毒经呼吸道、结膜、皮肤等处侵入人体先在局部淋巴结增殖进入血液散布到各个内脏继续大量增殖2～3周潜伏期皮肤广泛发生丘疹，水疱疹和脓疱疹VZV致病过程原发感染和潜伏感染微生物疱疹病毒第49页水痘水痘(ChickenPox)微生物疱疹病毒第50页2、潜伏与再发感染（多见于成年人和老年人）微生物疱疹病毒第51页带状疱疹潜伏于脊髓后根神经节或颅神经感觉神经节中少许病毒，在机体免疫力下降时，在冷、热、药品等原因刺激下，潜伏病毒被激活，病毒沿神经轴突抵达所支配皮肤细胞内增殖，发生疱疹，排列呈带状，故称带状疱疹。2、潜伏与再发感染（多见于成年人和老年人）微生物疱疹病毒第52页（1）潜伏场所脊髓后根神经节或颅神经感觉神经节（2）再发感染形成沿感觉神经支配皮肤分布，串联成带状带状疱疹微生物疱疹病毒第53页复发性感染微生物疱疹病毒第54页形形色色带状疱疹微生物疱疹病毒第55页免疫性儿童患水痘后，机体产生持久特异性细胞免疫和体液免疫，极少再患水痘。病毒中和抗体和细胞免疫不能有效地去除潜伏于神经节中病毒，故不能阻止病毒被激活而发生带状疱疹。微生物疱疹病毒第56页临床表现都较经典，无需做微生物学诊疗脱落细胞检验嗜酸性核内包涵体和多核巨细胞，或IFA查病毒抗原三、微生物学检验法微生物疱疹病毒第57页四、防治标准可预防接种VZV减毒活疫苗。带状疱疹免疫球蛋白（VZVIg）被动免疫。正常儿童患水痘不需治疗，抗病毒药品用于治疗免疫低下患儿水痘、成人水痘及带状疱疹。治疗：①无环鸟苷

②IFN：限制疾病、缓解局部症状微生物疱疹病毒第58页

第三节EB病毒Epstein-Barrvirus，EBV微生物疱疹病毒第59页EB病毒（Epstein-Barrvirus，EBV）Epstein和Barr于1964年首次成功地将Burkitt非洲儿童淋巴瘤细胞时发觉，故名主要侵犯B细胞微生物疱疹病毒第60页形态结构类似HSV一、生物学性状微生物疱疹病毒第61页一、生物学性状微生物疱疹病毒第62页在病毒不一样存在状态，表示不一样抗原增殖性感染——EBV早期抗原（EA）——EBV衣壳抗原（VCA）——EBV膜抗原（membraneantigen，MA）

潜伏感染

——EBV核抗原（EBNA）——潜伏感染膜蛋白（LMP）抗原性微生物疱疹病毒第63页

潜伏感染

EBV感染B细胞或上皮细胞

潜伏感染细胞含EBV基因组(游离或整合)选择性表示潜伏期抗原，刺激B细胞增生或永生化微生物疱疹病毒第64页致病性EB病毒在人群中广泛感染我国3～5岁儿童感染率达90%以上主要经过唾液传输，也可经输血传染传染源：EBV抗体阳性而仍排毒健康人、隐性感染者和病人。传输路径：主要经过唾液感染。输血也偶可传输，但未发觉有垂直感染。宿主：在体内感染主要感染人和其它灵长类动物B淋巴细胞和口咽上皮细胞。EBV受体为CD21（CR2）。二、致病性与免疫性微生物疱疹病毒第65页EBV感染咽喉部上皮细胞B淋巴细胞血液中EBV感染B细胞多克隆激活B细胞特异性免疫球蛋白异嗜性抗体刺激T细胞增殖非经典淋巴细胞咽喉部上皮细胞EBV复制唾液传输gp350/gp220gp85微生物疱疹病毒第66页所致疾病传染性单核细胞增多症非洲儿童淋巴瘤（即Burkitt淋巴瘤）鼻咽癌淋巴组织增生性疾病微生物疱疹病毒第67页传染性单核细胞增多症一个急性淋巴组织增生性疾病，多见于青春期首次感染EBV后发病三个经典症状为发烧、咽炎和颈淋巴结肿大随病情发展可出现肝脾肿大、肝功效异常，外周血单核细胞增多，并出现异型淋巴细胞（可杀伤表面有EBV抗原表示B细胞）微生物疱疹病毒第68页肝脾脏大、肝功效异常，外周血单核细胞增多，并出现异型淋巴细胞。异形单核细胞微生物疱疹病毒第69页非洲儿童淋巴瘤（即Burkitt淋巴瘤）于中非、新几内亚和美洲温热带地域呈地方性流行多见于5～12岁儿童好发部位为颜面、腭部全部BL病人血清均含EBV抗体，其中80%以上滴度高于正常人在肿瘤组织中发觉EBV基因组微生物疱疹病毒第70页鼻咽癌我国南方（广东、广西）及东南亚是鼻咽癌高发区多发生于40岁以上中老年人EBV与鼻咽癌

在全部病例癌组织中有EBV基因组存在和表示病人血清中有高效价EBV抗原（主要VCA和EA）lgG和lgA抗体病情好转后，这些抗体滴度也随之下降微生物疱疹病毒第71页EBV与鼻咽癌(1)鼻咽癌活检组织均可检出EBVDNA和EBNA(2)病人血清中有高效价EBV特异VCA-IgA或EA-IgA抗体(3)鼻咽癌细胞在裸鼠传代中有完整EBV形式(4)鼻咽粘膜还未发生恶变前已经查出这些抗体，治疗后好转者，抗体效价下降微生物疱疹病毒第72页免疫性EBV在人群中广泛存在，成人抗体阳性率达90%以上出现中和抗体，能阻止外源性病毒再感染细胞和体液免疫不能去除体内已经潜伏EBV微生物疱疹病毒第73页异嗜性抗体检测

辅助诊疗：传染性单核细胞增多症交叉抗体：IgM型抗体，非特异凝集牛、绵羊RBC；出现早，发病3-4周内达高峰；消失快，恢复期逐步下降至消失，有诊疗价值（早期诊断、近期感染）；效价>1:224缺点：假阳性正常人,血清病等三、微生物学检验法微生物疱疹病毒第74页

EBV特异性抗体检测

EBV感染：

检测病毒VCA－IgA或EA－IgA抗体，滴度≥1：5～1：10有诊疗意义。微生物疱疹病毒第75页我国用基因工程方法构建同时表示EBVgp320和HBsAg疫苗，重点使用在鼻咽癌高发区。gp320膜蛋白疫苗，正在英国大学生患者中作小规模接种，以期观察该疫苗是否能降低传染性单核细胞增多症发病率。四、防治标准微生物疱疹病毒第76页Humancytomegalovirus（HCMV）第四节人巨细胞病毒微生物疱疹病毒第77页是巨细胞包涵体病病原体1956年Smith等首先用组织培养方法从患者腺体组织培养中分离出病毒因为感染细胞肿大，并含有巨大核内包涵体，故名CMV多为潜伏感染，常可由怀孕等原因被激活微生物疱疹病毒第78页

CMV微生物疱疹病毒第79页HCMV只能感染人复制周期为36～48h其特点是细胞变圆、膨胀、核变大形成巨大细胞，核内出现鹰眼状（Owl’seyeinclusionbody）大型嗜酸性包涵体一、生物学性状微生物疱疹病毒第80页owl'seyeinclusionbody微生物疱疹病毒第81页一、生物学性状微生物疱疹病毒第82页培养特征感染宿主范围狭窄，即不能感染其它动物；人体内感染各种细胞，但体外仅在人成纤维细胞中增殖。在培养细胞中复制慢，经7～12d才能出现经典CPE。微生物疱疹病毒第83页细胞变圆、膨胀、核变大，形成巨大细胞；核内出现周围有一轮“晕”大型嗜酸性包涵体，称“鹰眼”细胞。微生物疱疹病毒第84页CMV在人群中感染极为普遍，首次感染大多在2岁以下，通常呈隐性感染，少数人有临床症状。60%～90%成人有CMV抗体，多数都可长久带病毒。二、致病性与免疫性微生物疱疹病毒第85页患者和无症状隐性感染者病毒潜伏感染唾液腺乳腺肾脏白细胞其它腺体经常/间歇性排出病毒唾液、乳汁、尿、血液、精液、宫颈及阴道分泌物存在病毒传染源微生物疱疹病毒第86页1、母婴传输：2、接触传输：口－口，手－口3、性传输：4、医源性传输：输血及器官移植传输路径微生物疱疹病毒第87页感染类型

先天性感染：围生期感染：儿童和成人原发感染：免疫功效低下者感染感染：细胞转化与致癌潜能：癌组织中检出病毒核酸微生物疱疹病毒第88页先天性感染（宫内感染）经过胎盘感染胎儿。发生率为0.5%~2.5%，CMV是能引发先天性感染主要病毒之一只有少部分（<10%）感染者表现症状，主要临床表现是巨细胞包涵体病（黄疸、肝脾肿大、溶血性贫血、紫癜等），极少数患儿表现为先天性畸形（小头智力低下、神经肌肉运动障碍、耳聋、脉络膜视网膜炎等）微生物疱疹病毒第89页先天性疾病：微生物疱疹病毒第90页经产道感染，或出生后数周由母体病毒（尿或乳汁中病毒），或护理人员排出病毒所引发感染多数无症状或症状轻微，表现为轻声度或显著呼吸障碍、肝功损害通常不表现神经损伤，预后良好围生期感染微生物疱疹病毒第91页儿童和成人原发感染

通常呈隐性感染，感染后多数可长久带毒，表现为潜伏感染。少数感染者出现临床症状，表现为巨细胞病毒单核细胞增多症。单核细胞增多异嗜性抗体阴性微生物疱疹病毒第92页免疫功效低下者感染发生于长久免疫抑制剂治疗、器官移植、AIDS、白血病、淋巴瘤等患者除原发感染外，体内原有潜伏HCMV可被激活症状主要是肺炎、视网膜炎、脑炎、脑膜炎等，预后不好微生物疱疹病毒第93页与肿瘤关系（宫颈癌、前列腺癌、结肠癌、Kaposi肉瘤）癌组织中检出病毒核酸微生物疱疹病毒第94页免疫性病毒机体特异Ab可维持终生，保护作用不强病毒血症与中和抗体可同时存在母体Ab不能降低宫内/围生期病毒感染，但减轻感染程度细胞免疫限制HCMV播散和潜伏病毒激活微生物疱疹病毒第95页细胞学检验：取组织或尿液标本，离心后涂片染色镜检，观察巨大细胞及包涵体。病毒分离培养：临床普通不用。血清学检验：特异性IgM与IgA可帮助诊疗活动性HCMV感染。新生儿血清有IgM说明有宫内感染。三、微生物学检验法微生物疱疹病毒第96页婴儿室发觉HCMV感染应隔离以防交叉感染。感染产妇防止母乳喂养。无有效疫苗。可用丙氧鸟苷（更昔洛韦）治疗。四、防治标准微生物疱疹病毒第97页

TORCHTORCH是在1971年由美国学者Nahmias首次提出，他将能引发胎儿先天性感染造成胚胎发育异常或畸形主要病原体英文名称第一个字母组成TORCH一词。T：Toxoplasma,TOX（弓形虫）O：Others（梅毒螺旋体、B19细小病毒等）R：Rubellavirus,RV（风疹病毒）C：Cytomegalovirus,CMV（巨细胞病毒）H：Herpessimplexvirus,HSV(单纯疱疹病毒)

微生物疱疹病毒第98页

复习思索题：1.简述人类疱疹病毒种类、潜伏部位。2.带状疱疹与什么病毒感染相关？3.HSV-1