质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座

质量控制在确保疫苗安全性和有效性中作用

中国药品生物制品检定所质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第1页疫苗适用人群

接种人群:-以健康人为适用人群-儿童质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第2页疫苗分类使用目标，主要分为

预防性疫苗，是当前主要疫苗治疗性疫苗预防性疫苗又可分为活疫苗：麻疹、风疹、腮腺炎、乙脑、OPV等灭活疫苗：狂犬、流感、IPV等重组疫苗：乙肝、HPV等亚单位和组份疫苗：流感亚单位疫苗，多糖类质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第3页疫苗两个要素安全性

适用人群为健康人群，所以，安全性为首要考虑要素本汇报中安全性只包括质量控制确保疫苗安全性，不包括疫苗内在原因产生副反应问题。有效性有效性是指应用该疫苗后，使个体到达预防感染该病原能力

因为疫苗主要由病原体或大分子物质（蛋白、多糖等）组成，存在较多可变原因。在生产过程中进行严格质量控制有利于确保疫苗安全性和有效性，另外，确保疫苗质量连续性。疫苗质量控制包括疫苗生产全过程，恪守GMP标准，符合药典中通则和个论要求。质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第4页第一部分：疫苗质量控制中安全性

考虑关键点第二部分：疫苗质量控制中有效性

考虑关键点

内容质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第5页一，起始原材料，须符合药典中要求，重点考虑：

1.生产用菌毒种：例：减毒活疫苗，毒种安全性考虑关键点包含：神经毒力（猴体试验或其它敏感动物）毒种传代稳定性（突变、返祖），结合有效性制订毒种代次2.生产用基质原代细胞：重点为外源因子、逆转录酶等原因生产活疫苗时，应来自SPF级动物传代细胞：制订细胞库，对外源因子、致瘤性检定（限定代次）人二倍体细胞：判别、核型检验等鸡胚：制备毒种或活疫苗时应为SPF级鸡胚

第一部分：疫苗质量控制中安全性考虑质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第6页起始原材料质量控制3.动物原性材料牛血清、胰酶等，进行必要外源因子检测，不允许从疯牛病疫区进口这类原材料4.其它材料4.1化学试剂（灭活、裂解、纯化、稳定剂等）应使用药用级例：某企业稳定剂成份造成异常毒性不过关4.2生产用水4.3抗生素，禁止使用青霉素或β-内酰胺类抗生素未来要求在细胞维持液中不得添加抗生素

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国产疫苗中庆大霉素检测结果疫苗名称批号结果（ug/ml）麻疹05130146麻疹05060142麻腮05030170MMR05050180风疹05130248麻风05100246麻疹0512－10.037麻疹0609－90.021流感－0.0001质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第8页国产疫苗中卡那霉素检测结果疫苗名称批号结果（ug/ml）水痘07010281水痘07020282水痘080944.4水痘090993.6MMR0702011.6MMR0709015.5质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第9页二、生产过程中控制，必须符合GMP标准1.生产条件严格控制，比如：1.1活疫苗培养温度：OPV疫苗中温度升高时，病毒轻易返祖，造成猴体神经毒力试验不过关。1.2灭活温度及时间：对灭活疫苗至关主要，尤其是采取野毒株生产疫苗时。1955年发生在美国“卡特门”事件，未充分灭活脊灰疫苗造成60名儿童和89名接触者发生脊髓灰质炎。1.3病毒裂解剂浓度、温度及时间：流感裂解不充分，在小年纪儿童中造成副反应增加1.4纯化设备及条件：预防纯化能力下降后增加疫苗副反应

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三、生产材料产生残留物质检测

1.传代细胞外源DNA残留量考虑DNA残留量考虑残留DNA片段大小2.传代细胞宿主蛋白残留量安全性考虑制品纯度考虑正在建立Vero细胞残留蛋白含量检测方法3.原代细胞宿主成份如：鸡胚卵清蛋白4.内毒素起源：生产材料中含有，容器具引入

总来讲，制品纯度越高，上述残留成份越少，疫苗安全性越高质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第11页企业标准结果(Ave±2SD)总蛋白(ug/ml)卵清蛋白(ng/ml)企业结果检定所结果总蛋白卵清蛋白总蛋白卵清蛋白1≤400≤244.2±26.62.5±0.8175.8±2.828.3±61.82≤500≤750361.3±36.1551.0±102.3320.7±11.7583.3±115.73≤440≤1000193.0±26.9200.0±0.0212.0±43.5241.0±21.14≤300≤500238.6±16.3337.7±65.9162.2±7.1452.3±39.85≤300≤250248.5±15.1<125199.5±18.6130.9±57.56≤420≤1000281.5±31.0364.1±215.5258.9±29.8313.2±145.97≤540≤800345.8±34.522.6±32.5263.0±11.984.7±57.98≤500≤1000315.6±40.4507.6±119.6/401.8±77.69≤500≤1000374.6±57.4469.2±173.5282.3432.0±86.810≤240≤1000220.0322.0-370.012≤600≤400192.2±12.116.9±6.9192.4±29.787.5±60.513≤600≤1000277.1±13.524.4±11.6223.3±31.532.8±7.214/≤/200.0±0.0/187.0±37.015100-330≤100145.0±7.1<0.1129.8±0.86.0±0.7流感疫苗总蛋白、卵清蛋白检验结果分析质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第12页

四、生产工艺中引入

残留物质检测

1.培养基中成份:不使用人血清,可用人血白蛋白2.牛血清残留(致敏物质)3.生产工艺中采取化学试剂灭活剂：甲醛等灭活试剂裂解剂：Tween80,TritonX100,乙醚等防腐剂：硫柳汞，苯酚，2-苯氧乙醇佐剂：氢氧化铝

特点：大多数为程度试验一些检测项目为生产过程中控制，或在原液中进行检测，在成品中不含有检测项目，企业应建立可靠检测方法并进行充分验证。如乙醚检测，如采取人工嗅觉法则不可靠，而HPLC或气相法则愈加准确。

质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第13页异常毒性试验与疫苗安全性异常毒性试验主要用于检测疫苗中与制品无关任何毒性，如错误添加、混同等造成显著毒性。限于剂量和动物数量，该试验不能充分反应或代替疫苗安全性。欧美国家要求工艺验证后，普通不再进行该项目常规检测。疫苗中不安全原因在大量人群使用时得以表达只有进行严格生产过程控制，采取可靠、准确检测方法才能确保疫苗安全性我国在异常毒性检测中发觉一些问题，如疫苗稀释液渗透压或冻干保护剂成份造成注射后瞬间反应。质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第14页疫苗有效性研发阶段：主要依赖于临床试验，在双盲、随机对照试验中确定生产阶段：依靠严格生产和质量控制确保疫苗质量（包含有效性）连续性质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第15页

第二部分：疫苗质量控制中

有效性考虑关键点1.生产用菌毒种：关键问题1.1与预防疾病对应关系：不一样血清型1.2菌毒株免疫原性：药典中要求对主种子进行免疫原性检验，多数活疫苗要求在人体中检验。

如：麻疹毒株主种子批，接种健康易感儿童最少30名，抗体阳转率不低于95％。1.3毒种传代次数：尤其是减毒活疫苗，不一样代次免疫原性有差异。比如：OPV疫苗，毒种传代次数有严格限定。1.4毒种保藏条件，普通为冻干或低温保藏。质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第16页2.生产用基质传代细胞和人二倍体细胞应建立细胞库系统，有效确保生产疫苗质量连续性。3.生产中控制培养条件：培养基、血清等细胞增殖能力收获次数：限定收获次数，细胞老化造成繁殖病毒滴度改变中间品保藏条件：预防抗原聚合，病毒滴度下降包装材料：抗原吸附在容器上

质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第17页质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第18页质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第19页疫苗有效性确保判别试验：证实为本疫苗，预防混同，尤其是多价疫苗有效成份含量1.活疫苗滴度：尽可能采取冻干剂型，液体疫苗时需有适当保护剂比如：OPV液体疫苗中添加1mol/LMgCl,-20°C冻存保藏2.灭活疫苗中抗原含量采取可靠方法准确测定：基于抗原抗体含量测定采取平行线法效期末标准：临床试验确定抗原含量放行标准：结合稳定性考评数据在效期末标准上适当增加抗原含量，确保效期末标准比如：流感疫苗中有效成份标示量为15ug/剂,稳定性考评一年下降2ug/剂,则企业放行标准应为17/剂。3.制品装量：附加量确保可抽出体积质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第20页流感疫苗血凝素趋势图质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第21页重组乙型肝炎疫苗质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第22页稳定性：原液和半成品：制订储备条件下效期成品：进行稳定性检验对冻干减毒活疫苗：热稳试验，热稳后滴度到达效期末标准水分含量测定：水分含量影响稳定性，应低于药典中标准效力试验参考品：效力试验是疫苗有效性关键，基于生物活性测定方法高变异性，在效力测定时必须包含有明确含量标示（以及变异范围）参考品，方便：1.证实该次测定有效2.对待测样品进行标定3.监测效力试验方法和参考品改变趋势若企业采取自制参考品，应对国际参考品或国家参考品进行校正，采取屡次测定数值进行统计分析，确定含量及变异范围，并保藏在适当条件下，制订参考品趋势图，监测参考品改变。质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第23页

脊灰国家参考品滴定趋势图质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第24页疫苗有效性总结临床试验确定包含：剂量探索免疫原性：有替换指标时保护效果：最有说服力证据上市后监测：大量人群应用后实际效果生产中进行控制确保疫苗有效性包含：确保生产连续性准确效力试验方法稳定性质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第25页定义生物制品批签发，是指国家对疫苗类制品、血液制品、用于血源筛查体外生物诊疗试剂以及国家药品管理当局要求其它生物制品，每批制品出厂上市或进口时实施强制性资料审查、试验室检验后决定是否签发上市管理制度。生物制品批签发是一项主要科学生物制品管理制度。－国家食品药品监督管理局第11号令：生物制品批签发管理方法生物制品批签发质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第26页我国实施批签发法律基础中华人民共和国药品管理法（第四十一条）中华人民共和国药品管理法实施条例（第三十九条）疫苗流通及预防接种管理条例(第十七条)生物制品批签发管理方法进口药品管理方法生物制品批签发质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第27页生物制品批签发批签发产品销售《疫苗流通和预防接种管理条例》第十七条要求:疫苗生产企业、疫苗批发企业在销售疫苗时，应提供由药品检验机构依法签发生物制品每批检验合格或者审核同意证实复印件，并加盖企业印章。疫苗批发企业经营进口疫苗，还应该提供进口药品通关单复印件，并加盖企业印章。疾病预防控制机构、接种单位在接收或者购进疫苗时，应该向疫苗生产企业、疫苗批发企业索取前款要求证实文件，并保留至超出疫苗使用期2年备查”。质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第28页

我国批签发实施过程准备阶段试行阶段正式实施阶段年12月我国开始试行批签发（EPI5种制品）年12月颁布了《生物制品批签发管理方法（试行）》年1月15日开始正式实施批签发年6月颁布了《生物制品批签发管理方法》年1月1日对全部疫苗实施批签发管理年12月31日对全部血液制品实施批签发管理生物制品批签发质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第29页生物制品批签发执行批签发机构国家食品药品监督管理局主管全国批签发工作。由国家药品监督管理当局指定药品检验机构负担批签发检验和资料审核。质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第30页生物制品批签发批签发制品质量执行标准生物制品批签发检验和/或资料审核标准现行《中国药典》国家食品药品监督管理局同意其它药品标准企业药品注册标准进口药品注册标准

同时需提供制品生产国政府批签发合格证质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第31页

批签发方式资料审查资料审查及试验室检验

样品检验全部项目检验部分项目检验生物制品批签发质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第32页批签发程序（1）生产企业检验向授权省级所申请登记资料审查和现场抽样资料及样品中检所资料审查和检验部分样品留授权省级所部分检验合格证或不合格通知质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第33页进口批签发程序（2）进口报验口岸药品监督管理局通关海关监管资料及样品中检所资料审查和检验口岸药品检验所合格证或不合格通知质量控制在保证疫苗的安全性和有效性中的作用专家讲座第34页生物制品批签发企业申请批签发时应提供资料同意文件（以下其中之一）药品同意文号进口药品注册证或医药产品注册证体外生物诊疗试剂同意注册证实提交资料生物制品批签发申请表批制造及检验统计摘要检验所需同批号样品企业质量确保部门责任人签字质量确保证实件进口预防用疫苗类制品应同时提交生产国国家药品管理当局出具批签发证实文件，并提供汉字译本。质量控制在保证疫苗的安全性和