胺类药物的分析

胺类药物的分析第1页/共41页苯佐卡因（一）对氨基苯甲酸酯类基本结构盐酸普鲁卡因盐酸丁卡因第一节芳胺类药物第2页/共41页1．芳伯氨基特性：分子结构中的芳伯氨基，显重氮化耦合反应；与芳醛缩合成schiff碱的反应；易氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。2．水解持性：因分子结构中有酯键(或酰胺键)，易水解。受光线、热、碱的影响；盐酸丁卡因→BABA，其余药物→PABA3．弱碱性：除苯佐卡因外，因其脂烃胺侧链为叔胺氮原子、故具有弱碱性。因此能与生物碱沉淀剂发生沉淀反应；但在水溶液中不能用标准酸直接滴定．在非水溶剂中能滴4.溶解性：游离碱，油状液体或低熔点固体难溶于水，易溶于有机溶剂；盐酸盐白色结晶粉末，具一点的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。化学性质第3页/共41页(二)酰胺类药物对乙酰氨基酚(扑热息痛)醋氨苯砜盐酸利多卡因盐酸布比卡因第4页/共41页中世纪时期仅有的退热药物是一种存在于柳树树皮中的物质（一类叫作水杨酸的物质，后来导致了阿司匹林的发展）和一种存在于金鸡纳树树皮里的物质。金鸡纳树皮也是用来制造抗疟疾药物奎宁的主要原料，奎宁本身也有退热的功效。随着金鸡纳树日益减少，人们开始寻找其替代品。1873年，首先通过对-硝基酚和冰醋酸的在锡催化下反应合成了对乙酰氨基酚，但是在二十年之内对乙酰氨基酚并没有用于医学用途。1946年美国止痛与镇静剂研究所拨款给纽约市卫生局研究止痛剂的问题。1948年伯纳德和阿克塞尔罗德发现对乙酰氨基酚的解热镇痛作用。1955年，对乙酰氨基酚在美国境内上市销售，商品名Tylenol。扑热息痛第5页/共41页1．水解后显芳伯氨基特性本类药物的分子结构中均具有芳酰氨基，在酸性溶液中易水解为具芳伯氨基的化合物，并显芳伯氨基特性反应。其水解反应的速度，对乙酰氨基酚相对比较快。利多卡因和布比卡因在酰氨基邻位存在两个甲基，由子空间位阻影响，较难水解，所以其盐的水溶液比较稳定。化学性质第6页/共41页2．水解产物易酯化对乙酰氨基酚和醋氨苯砜，水解后产生醋酸，可在硫酸介质中与乙醇反应，发出醋酸乙酯的香味。对乙酰氨基酚醋氨苯砜3．酚羟基的持性对乙酰氨基酚具有酚羟基，与三氯化铁发生呈色反应，可与利多卡因和醋氨苯砜区别第7页/共41页

4．弱碱性利多卡因和布比卡因的脂烃胺侧链有叔胺氮原子，显碱性，可以成盐，与生物碱沉淀剂发生沉淀反应。其中与三硝基苯酚试液反应生成的沉淀具有一定的熔点。对乙酰氨基酚和醋氨苯砜不具有此侧链，亦无此类反应，可以区别。第8页/共41页5．与重金属离子发生沉淀反应盐酸利多卡因和盐酸布比卡因酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合，生成有色的配位化合物沉淀。此沉淀可溶于氯仿等有机溶剂后呈色。第9页/共41页（三）、芳胺类药物的鉴别1、重氮化—偶合反应分子结构中具有芳伯氨基的药物．可发生重氮化—偶合反应。（橙黄到猩红色）第10页/共41页对乙酰氨基酚和醋氨苯砜在盐酸或硫酸中加热水解后，也可与亚硝酸钠进行重氮化反应。红色第11页/共41页盐酸丁卡因分子结构中不具有芳伯氨基，无此反应，但其分子结构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成N—亚硝基化合物的乳白色沉淀，可与具有芳伯氨基的同类药物区别。乳白色第12页/共41页2、与三氯化铁反应对乙酰氨基酚分子结构中具有酚羟基，可直接与三氯化铁试液反应显蓝紫色第13页/共41页3、与重金属离子反应（1）与铜和钻离子反应

分子结构中具有芳酰胺的盐酸利多卡因，在碳酸钠试液中，与硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物．此有色物转溶入氯仿中显黄色。盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因和苯佐卡因等，在同样条件下不发生此反应。黄色盐酸利多卡因在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀亮绿色第14页/共41页盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因和苯佐卡因等，在同样条件下不发生此反应。第15页/共41页(2)．羟肟酸铁盐反应盐酸普鲁卡因胺分子中具有芳酰胺结构，加入浓过氧化氢溶液，缓缓加热至沸后，先被氧化成羟肟酸，再与三氯化铁作用形成配位化合物羟肟酸铁，其溶液显紫红色，随即变为暗棕色至棕黑色。第16页/共41页(3)．与汞离子反应

盐酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化后．加硝酸汞试液煮沸，显黄色；对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色，可与之区别。芳酰胺类，如盐酸利多卡因对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因黄色红色或橙黄色硝酸汞/硝酸煮沸第17页/共41页4、水解产物反应(1)、盐酸普鲁卡因的鉴别方法取本品约o.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧化钠溶液lml，即生成白色沉淀；加热变为油状物(普鲁卡因)；继续加热，产生的蒸气(二乙氨基乙醇)能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后(生成可溶于水的对氨基苯甲酸钠)，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。此沉淀能溶于过量的盐酸。第18页/共41页(2)．苯佐卡因的鉴别方法取本品约0.1g加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成，加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。第19页/共41页5、制备衍生物测熔点（1）

盐酸利多卡因

盐酸布比卡因（2）

盐酸丁卡因丁卡因硫氰酸盐（mp.131℃）三硝基苯酚三硝基苯酚利多卡因（mp.228~232℃）三硝基苯酚布比卡因（mp.194℃）25％硫氰酸铵溶液5％醋酸溶液盐酸丁卡因第20页/共41页6、紫外特征吸收光谱本类药物分子结构中均具有苯环，因此具有紫外吸收光谱待征。第21页/共41页7、红外吸收光谱盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因胺第22页/共41页（四）、芳胺类药物的杂质检查(一)对乙酰氨基酚的杂质检查（ChP2010）工艺之一酸度乙醇溶液澄清度与颜色氯化物硫酸盐对氨基酚及有关物质对氯苯乙酰胺干燥失重炽灼残渣工艺中除引入一般杂质外，还会引入特殊杂质第23页/共41页酸度（1）来源：①生产过程引进酸性杂质

②贮存过程水解产物醋酸（2）适宜pH为5.5-6.5(本品1％的水溶液），偏酸或偏碱易发生水解，从而影响质量。方法：本品0.10g，加水10ml溶解，依法测定，

pH应为5.5-6.5第24页/共41页

对乙酰氨基酚的合成工艺是以对硝基苯酚为原料，用铁粉还原得对氨基酚后制得的。生产工艺中使用的还原剂，可能带入成品中，致使乙醇溶液产生浑浊。中间体对氨基酚的有色氧化产物在乙醇中显橙红色或棕色。。本品在乙醇中易溶，且有色杂质在乙醇中溶解度亦大，故采用乙醇为溶剂。乙醇溶液澄清度方法：取本品1.0g，加乙醇10ml溶解后，溶液应该澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液比较不得更深；如显色，与棕红色2号或橙红色2号标准比色液比较不得更深。第25页/共41页本品的生产工艺路线较多，不同生产的工艺路线所带入的杂质也有所不同，这些有机杂质主要包括中间体、副产物及分解产物。例如：对氨基酚、对氯苯乙酰胺、o-乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等。对氨基酚及有关物质/对氯苯乙酰胺在合成过程中，由于乙酰化不完全或贮藏不当发生水解，均可引入对氨基酚。其毒性较大并使本品产生色泽，因此要严格控制其限量。利用对氨基酚在碱性条件下可与亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化合物，而对乙酰氨基酚无此反应的持点，与对照品比较，进行限量检查。ChP2010高效液相色谱法对氨基酚及有关物质：含对氨基酚不得超过0.005%，其他杂质峰面积均不得大于对照品溶液中对乙酰氨基酚的峰面积（0.1%），杂质总量不超过0.5%。对氯苯乙酰胺：对氯苯乙酰胺不得超过0.005%第26页/共41页（五）、芳胺类药物的含量测定亚硝酸钠滴定法非水溶液滴定法分光光度法色谱法亚硝酸钠滴定法原理:芳伯氨基药物在酸性溶液中与亚硝酸纳定量反应，生成重氮盐，用永停法或外指示剂法指示反应终点。ChP2010：盐酸普鲁卡因/注射用盐酸普鲁卡因/盐酸普鲁卡因胺第27页/共41页条件：加入适量溴化钾加快反应:HBr生成NO+的速度≫HCl生成NO+的速度

加入过量盐酸1:2.5~6：防止副反应和提高反应速度，重氮盐在酸性溶液中稳定一般可在室温10℃～30℃下进行

滴定管尖端插入液面下滴定：分子反应速度较慢，一次加入理论两的95%慢快快终点指示方法：外指示剂法（碘化钾－淀粉）永停法亚硝酰氯第28页/共41页非水溶液滴定法盐酸丁卡因和盐酸利多卡因侧链烃胺的叔胺氮具有弱碱性，而盐酸布比卡因侧链哌啶环上的叔胺氮也具有弱碱性，均可采用高氯酸非水溶液滴定法测定。注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氢卤酸的干扰.盐酸丁卡因:加醋酐以突出终点盐酸丁卡因盐酸利多卡因侧链烃胺的叔胺氮侧链哌啶环的叔胺氮盐酸布比卡因指示剂：结晶紫指示剂：萘酚苯甲醇盐酸利多卡因盐酸丁卡因第29页/共41页本类药物可利用芳伯氨基的重氮化—偶合反应，生成的有色偶氮染料，在可见光范围内测定吸收度进行比色测定。但专属性较低，凡能重氮化的有机化合物如磺胺类、对氨基酚、对氨基苯甲酸等有干扰分光光度法/比色法本类药物均含有苯环，具有特征紫外吸收。ChP2010：注射用盐酸丁卡因色谱法ChP2010：盐酸普鲁卡因注射液、对乙酰氨基酚第30页/共41页一、苯乙胺类药物的基本结构具有苯乙胺的基本结构除盐酸克仑特罗外，其余各药物的苯环上都有酚羟基。第二节苯乙胺类药物的分析盐酸克仑特罗硫酸沙丁胺醇1997年，中华人民共和国农业部下文严禁β-肾上腺素类激素在饲料和畜牧生产中使用，盐酸克伦特罗列为第一位。（培林）第31页/共41页二、主要化学性质

1．弱碱性本类药物分子结构中具有烃氨基侧链．其氮为仲胺氮，故显弱碱性。其游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。2．酚羟基特性本类药物分子结构中具有邻苯二酚(或苯酚)结构，可与重金属离子络合呈色，露置空气中或遇光、热易氧化，色渐变深，在碱性溶液中更易变色。3．光学活性多数药物分子结构中具有手性碳原子，具有旋光性，可供分析用。第32页/共41页三、鉴别试验(一)与三氯化铁反应肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素等药物的分子结构中具有酚羟基．与铁离子络合显色，加入碱性溶液，随即被高铁离子氧化而显紫色或紫红色。(二)与甲醛—硫酸反应肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素等药物可与甲醛在硫酸中反应，形成具有醌式结构的有色化合物。药物三氯化铁甲醛－硫酸肾上腺素0.1mol/L盐酸液显翠绿色，加氨试液显紫色，紫红色红色重酒石酸去甲肾上腺素翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝色，红色淡红色盐酸去氧肾上腺素紫色玫瑰红，橙红，深棕红盐酸异丙肾上腺素深绿色，滴加新制5%碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色棕色，暗紫色盐酸多巴胺墨绿色，滴加1%氨溶液，显紫红色第33页/共41页(三)氧化反应本类药物分子结构中多数具有酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾等氧化剂氧化而呈现不同的颜色。肾上腺素在中性或酸性条件下，被碘或过氧化氢氧化后，生成肾上腺素红，放置可变为棕色多聚体。盐酸异丙肾上腺素在偏酸性条件下被碘迅速氧化，生成异丙肾上腺素红，加硫代硫酸钠使碘的棕色消退，溶液显淡红色。肾上腺素红棕色淡红色第34页/共41页(四)紫外（五）红外光谱（六）亚硝基铁氰化钠反应（脂肪族伯胺的专属反应）重酒石酸间羟胺水溶解亚硝基铁氰化钠试液丙酮数滴，碳酸氢钠少量红紫色△第35页/共41页四、杂质检查(一)酮体检查下列型药物：肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、盐酸甲氧明等均检查酮体。这些药物在生产中均由其酮体氢化还原制得，若氢化不完全，易引入酮体杂质，所以药典规定检查酮体。降解产物肾上腺素红多聚体肾上腺素肾上腺素第36页/共41页(二)有关物质检查：多用色谱法ChP2010:肾上腺素采用HPLC供试品如有杂质峰，单个峰面积不得大于对照溶