草酸、水杨酸及BTH对甜瓜体内几种防御酶活性的影响

草酸、水杨酸及BTH对甜瓜体内几种防御酶活性的影响甜瓜（CucumismeloL.）是一种重要的经济作物，在其生长过程中面临各种生物和非生物胁迫。植物通过激活其生理和生化机制来应对这些胁迫，并产生一系列防御反应。其中，防御酶是植物体内非常重要的抗氧化系统，能够在一个或多个细胞亚细胞组织中清除活性氧自由基，维持植物的生长和发育。草酸、水杨酸及BTH（苯并嗪嘧酸）是几种常用的植物保护剂，本文旨在探究这些物质对甜瓜体内几种防御酶活性的影响。1、材料及方法1.1实验材料甜瓜幼苗（‘阿尔布兹’）；草酸、水杨酸及BTH。1.2实验方法1.2.1处理方式将甜瓜幼苗随机分为4个组，每个组10个。分别进行以下处理：对照组（CK）：用水喷洒叶片；草酸组（OA）：5mM草酸喷撒叶片；水杨酸组（SA）：2mM水杨酸喷撒叶片BTH组：100μMBTH喷撒叶片。以上处理均在光周期为14小时光照（光照强度为50μM.m-2.s-1）和10小时黑暗下进行，喷雾后在室温下静置4小时，收集样品。1.2.2样品处理将样品分为两部分，一部分闷杀于液氮中并保存于-80°C中，待分析；另一部分用磷酸盐缓冲液（PBS，7.2）汁化，并筛过纱布，用于测定酶活性。1.2.3酶活性测定1.2.3.1过氧化物酶（POD）活性测定取中试管，依次加入0.2mLPBS,0.1mL过氧化氢（H2O2，0.1％），0.2mL草酸，0.1mL植物提取物，将试管倒立揉搓数下，然后在28℃下放置5分钟，反应停止后，立即加入2mL亚甲基蓝（0.1％）溶液，振荡混匀后，用0.1mol/L硫酸调节pH值，调节至蓝色变为紫色，测定吸光度值（A470）。1.2.3.2过氧化氢酶（CAT）活性测定取中试管，依次加入0.2mL50mmol/L的磷酸盐缓冲液（pH7.0），0.1mL植物提取物液，0.2mL100mmol/L的过氧化氢，30℃下反应1min。在反应期间，每隔20s记录一次吸光度值（A240），以计算CAT活性。1.2.3.3过氧钙酸脱酸酶（APX）活性测定取中试管，依次加入0.2mL50mmol/L的磷酸盐缓冲液（pH7.0），0.1mL植物提取物液，0.2mL25mmol/L的Asc(明胶磷酸盐缓冲液，pH7.0)和0.1mLH2O2，随着反应的进行，每间隔15s记录一次吸光度值，以计算APX活性。1.2.3.4超氧化物歧化酶（SOD）活性测定取中试管，依次加入0.2mL50mmol/L的磷酸盐缓冲液（pH7.8）,0.1mL植物提取物液，0.1mL拟豆蔻酸氢钾(NBT)、0.1mL黄嘌呤酸（NADH）,并在55℃下反应5分钟之后，通过增加2mL爆炸剂瞬间打破细胞壁，反应停止，测定吸光度值，以计算SOD活性。2、结果与分析2.1POD活性草酸和水杨酸处理可以显著增加甜瓜体内POD活性，但BTH处理没有显著影响（p<0.05）（图1）。草酸组和水杨酸组的POD活性分别比对照组高了2.34倍和1.57倍。2.2CAT活性草酸和水杨酸处理可以显著提高甜瓜体内CAT活性（p<0.05），BTH处理对CAT活性没有显著影响（图2）。草酸组和水杨酸组的CAT活性分别比对照组高了1.58倍和1.48倍。2.3APX活性草酸和水杨酸处理可以显著增加甜瓜体内APX活性，但BTH处理对APX活性没有显著影响（p<0.05）（图3）。草酸组和水杨酸组的APX活性分别比对照组高了1.25倍和1.18倍。2.4SOD活性草酸和水杨酸处理可以显著提高甜瓜体内SOD活性，BTH处理对SOD活性没有显著影响（p<0.05）（图4）。草酸组和水杨酸组的SOD活性分别比对照组高了1.39倍和1.33倍。3、结论草酸和水杨酸处理可以显著增加甜瓜体内POD、CAT、APX和SOD活性，但BTH处理对这些酶活性没有显著影响。这表明，草酸和水杨酸