免疫分型教程

40-免疫分型教程(1)正常骨髓免疫分型上图是正常骨髓经CD45CD71CD33染色后组成的CD45/SSCCD71/CD33双参数散点图；况。CD45/SSC图中可见：1CD45强阳性SSC（褐色细胞群体；2，中等强度的CD45SSC信号最强的细胞群体为粒细胞（蓝色及红色细胞群体；3CD45表达与SSC信号介于淋巴细胞与粒细胞之间的是单核细胞群体（绿色细胞群体；4，CD45阴性，SSC信号最低的有核红细胞和细胞碎片；CD33/CD71图中可见：1CD33表达最强的单核细胞群体（绿色；2，粒细胞CD33表达较单核弱，不成熟粒表达CD71，成熟后不表达。3，淋巴细胞、有核细胞和细胞碎片不表达CD33、CD71。CD11B/CD15图可用来评估髓系细胞向单核、粒分化的程度（得CD11，粒细胞高表达CD1：1，单核细胞（绿色）高表达CD11B，CD15中等到表达；（蓝色及橘红色CD11B幼稚髓细胞仅表达CD15CD11B。3，TBCD15、CD11B，NKCD11B而无CD15（红色细胞。4，有核红细胞及碎片不表达CD15和CD11B。根据骨髓细胞CD45/SSC图中分布情况设门圈定各类细胞：R1门为成熟淋巴细胞；R2门为正常单核细胞位置；R3门正常粒细胞位置；R4门为幼稚淋巴细胞出现位置；R5门为有核红细胞或细胞碎片位置；R6门为幼稚髓细胞出现位置；白血病细胞通常会在R4、R6两门位置处出现。M0免疫分型M0:急性髓细胞白血病微分化型原始细胞在光镜下类似L2碱性,无嗜天青颗粒及Auer小体,髓过氧化酶(MPOB阳性细胞<3%;或CD13CD7+,TdT+急非淋白血病可表现CD7+,TdT。90AUER，MPO阴性。遗传学：染色体常有复杂的异常，特别是5和7号染色体。当病例伴T（9；22）时会出现淋系抗原。FSSSCD45/SSCD16。相当一部分病例CD7CD4；HLA-DRCD7CD34MPOCD33/CD13联合检测更为敏感。M0MPO3%，3%M1。M0:HLA-DR+,CD34+,CD13+/-,MPO+,CD14-,CD11b-,TdT-/+to+/-CD45/SSCSSCCD19、CD34CD13CD33。CD13CD3396%。HLA-DR这些幼稚细胞表型的情况是：CD13阳性，CD33阳性，CD34阴性，HLA-DR阴性。这个表型与AML-M3相以。肿瘤细胞不表达CD71、CD117、CD18、CD11b和CD15。CD64是阴性，但CD14表达。CD14表达强度比较弱与CD13相似。TCD2、CD5、CD3CD7T与阴性对照相比，CD4诊断：AML微分化型，CD34和HLA-DR阴性。实验室进一步诊断：MPO（免疫组化）阳性，NSE阴性，46XY，t(3;5)(q25;q34)重要说明：本例中白血病细胞免型表型为：CD34-、HLA-DR-，CD13+，CD33+AML-M3AML-M3FCM结如下：（）表达CD1（leu-M3，尽管表达有所降低（SSCAML-M3vSSCM3vCD13（CD13/CD33。有时AML-M3CD13。对于这些疑难病例需要借助分子遗传学和细胞遗传学诊断工具来建立正确的诊断。其他标记物如：Bcells(CD19,CD20,Kappa,Lambda),CD10(Calla),CD5(Tcells),CD41(platelet)都是阴性。光散射图中显示在前向散射光和表示颗粒度的侧向散射光有一群处于中间位置的细胞。这与组织学检测结果相一致。（暂无图）CD45/CD14CD45CD14（99%）。CD45于成熟淋巴细胞，可能是由髓系细胞和未成熟幼稚细胞组成。（暂无图）HLADR/CD3DR（81%）CD3（T）TB（CD45）。DRBTCD34/CD38CD34CD38CD38BALLAML（CD45），前B（CD14阴性）。CD13/CD15等高图中显示大部分细胞（63%）髓系抗原CD13/CD15阴性。但此处提供了一丝线索，因为有些细胞（30%）表达低水平CD15。绝大部分AMLM1-M6细胞同时表达CD13和CD15。CD33/TdT）。无细胞表达TdTAML-M0/M1。CD11b/GPAGPA髓系干细胞。CD11bNK这些细胞还同时表达CD7。这使人感觉有误，但现已知早期髓系白血病细胞可偶然同时表达CD7。M0M1M0M1MPOM1M0。M1免疫分型幼稚细胞成群，RALS信号弱。M1与M0很难区分，但M1细胞大小及颗粒度较M0稍大，与原粒细胞接近。至少伴随一种髓系抗原：CD13或CD33。高表达HLA-DR，CD34阳性但较M0弱,>3%的幼稚细胞表达MPO，较M0多。不表达CD11B，CD15，CD16等。M1:CD11B-/+,HLA-DR+,CD13+,CD33+,CD34+,CD14+,MPO+,TdT-/+to+/-M2免疫分型CD45/RALSM1M2BLASTWINDOWSM2M1CD33CD71胞强。CD13CD33。M2肿瘤细胞弱表达CD15与CD11B,说明细胞已分化。CD34表达显著降低。M2CD5,CD7TdTt(8;21),CD19CD56MPOM2t(8;21CD13-，CD33-，CD14MPO+。细胞分布广泛，幼稚细胞较M1少。CD13和CD33阳性，且CD13表达高于CD33。HLA-DR阳性，CD15弱阳性。M2肿瘤细胞伴t（8，21）CD19阳性。M3免疫分型M3VRALSSS胞。肿瘤细胞大，FSCD45/RALSM3M3VM3SS/FSM3与M3V在免疫表型上无区别。M3CD34HLA-DRCD9特异。CD2M3M3VHLA-DRt(15,17)异常相关。CD33CD13CD15，CD16CD11B。肿瘤细胞完全不表达CD15，与正常早幼粒细胞表达CD15SMPOMPOLACTOFERINCD2TBM3肿瘤细胞因其胞浆内多颗粒，细胞具有很强的自发荧光。M3:CD33+,CD13+,MPO+,CD34-,HLA-DR-,CD11b-,CD14-,CD15-,TdT-M4免疫分型M4CD45/RALSM0，M1FSSSBLASTWINDOWSM4不同，表型也可能互不相同。本例为M4EO，增多的嗜酸细胞RALSCD45R4门中紫色细胞。幼稚细胞群表达CD34，HLA-DR，而异常单核细胞则CD34阴性，HLA-DR阳性。CD33CD14CD33CD14，CD64CD64中强阳性表达则为单核细胞特异性标志。M4CD11B/CD15CD2M4EO16M4/blastpopulation:CD13+,CD33+,CD34+,HLADR+,CD11b-,CD14-M4/abnomal monocyticcell:CD13+,CD33+,CD34-,HLA-DR+,CD11b+,CD14+/-,CD4+/-M5免疫分型M5CD45M5M5aM5bCD45CD15/CD11BCD15的粒细胞.不成熟的单核细胞CD11B表达弱.如出现CD33阳性，CD13，CD34阴性。M5肿瘤细胞通常高表达CD33，CD13表达多样。CD4是髓系幼稚细胞向单核系分化的敏感指标。CD14CD14AMMLCD61M5a:HLA-DR+,CD11b+/-,CD34+,CD33+,CD13+,CD14-/+,CD4+/-M5b:HLA-DR+,CD11b+,CD34-,CD13+,CD16+/-,CD14+,CD4+/-M6免疫分型本例中可见两群幼稚细胞，M650%强，而其他系别的幼稚细胞30M6M6CD71AHLA-DR，CD34CD33CD13很多M6病例中会出现一群髓系幼稚细胞，如本例中的红色细胞群体。M6;CD71+,GP-A+,CD34+/-,HLA-DR+/-,CD13+/-,CD33+/-,CD34+/-,CD14-,CD11b-M7免疫分型本例中幼稚细胞CD45/RALS信号都不强。与B-ALL，M6的肿瘤细胞相似。M7CD61CD41CD41CD61，CD62CD41CD61本例CD34阳性，CD71弱阳，其他系别抗原不表达。其他系别抗原均为阴性，与M0、M1相似。M7:HLA-DR+,CD34+,CD33+/-,CD14-,MPO-,TdT-TALL免疫分型T-ALLCD45B-ALLCD45/SSCBLASTWINDOWS单核细胞区或与正常淋巴细场胞相混。CD10T-ALLCD19CD3440T-ALLCD34T-ALLCD3PECD3CD3/CD5TTCD4/CD8TCD4/CD8T-ALL。T-ALLCD730AMLCD7HLA-DRT-ALL，特别是在儿童，CD7HLA-DR，AMLCD7HLA-DRT-ALLTpre-thymic：CD7+，CD1a-，CD4/8-，CD3-；thymic:CD7+，CD4/8+，CD3-；matrue:CD3+,CD1a-;原始T细胞ALL与AML很难区分，要加测胞浆内CD3。T-ALLTdTCD4CD8CD3TdT。T-ALL的共同特征是：下调表达T系抗原或出现异常抗原的联合表达。BALL免疫分型BB-ALL表达及其表达位置。具体情况如下：1,成熟B细胞ALL表达表面免疫球蛋白（sIg）2,前B细胞ALL细胞胞浆内表达免疫球蛋白重键(cu)而不表达轻链3,早前B-ALL则两者都阴性BcuIgB-ALL。B（B-precursororearly6550FABL1L2BCD34HLA-DRTdTCD10BCD19BBCD9，CD22CD24；这BCD20CD20CD20CD20BBBALLBCD10CD1011q23MLL其他"11q23CD15CD24。白血病细胞通常CD34BCD19t(9;22BCR-ABLALLPh1CD34CD10CD19CD25Bt(12;21)(p21;q22)的病例预后TEL/AML1，B1-10CD19，CD10HLA-DR，CD34，部分细CD20CD10CD9CD20TEL/AML1B-precursor-ALLFS/SS，CD45CD45/SSCFABL1L2B-precursor-ALL的肿瘤细胞CD10/CD19强阳性，CD33弱阳性如使用PE标记的CD33抗体检测阳性增强但不可据此判定为混合型白血病。CD10B-precursor-ALLCD10CD10-，CD10+的病人预后较好B-precursor-ALLB-cell-ALLPRE-B-ALLCD19，HLA-DRB-ALLCD22CD20