工程项目管理-PRP项目计划书

项目编号：T050PRP25038项目支配书项目名称：介孔二氧化硅材料药物载体制备及药物载入探讨策划人：章志铖学号：5110519095班级：F1105104策划时间：2014-03-01至2014-07-31

项目简介1.1项目名称介孔二氧化硅材料药物载体制备及药物载入探讨1.2项目简介介孔二氧化硅因为其具有高比表面积、高孔容积、孔道的纳米尺度在2~50nm范围内匀称可调、良好的热稳定性和孔道内含有丰富的硅羟基、对于人体无毒无害等特点，在生物医药领域得到了长足的发展。同时，聚乙二醇是常用于生物大分子表面共价修饰的一种聚合物，在生物医药领域得到了广泛探讨。在介孔二氧化硅材料孔径中加入聚乙二醇修饰的固定蛋白、卟啉、吡啶等其他的生物性药物，实现药物缓释、靶向投放等功能，提高药物疗效的长久性和有效性。项目参加者信息2.1项目负责人姓名工号院系宋雪峰10881材料科学与工程学院2.2项目指导老师姓名工号院系张鹏10740材料科学与工程学院2.3参加学生学号姓名性别院系联系方式5110519095章志铖男材料科学与工程学院51105*****林**男材料科学与工程学院***51105*****胡**男材料科学与工程学院***项目预算预算类型名称预算金额预算依据办公费200办公费用、打印费用邮电费100科研活动中涉及到的邮寄费用交通费100科研活动中涉及到的市内交通专用材料费1600试验所需的试剂耗材等试验测试费1500样品测试费用总计3500项目内容

4.1立项依据药物剂型的发展一般分为四代：第一代为丸、丹、散、膏剂等，其次代为机械化生产的一般制剂，第三代为缓释制剂、控释制剂，第四代为靶向给药系统。进入20世纪90年头以来，药物制剂探讨已进入药物传递系统（DrugDeliverySystem，DDS）时代（主要包括第三、四代制剂）。新型制剂主要指缓控释制剂与靶向制剂。

新型药物传递系统已成为药学领域的重要发展方向，主要包括：①缓控释制剂；②靶向给药系统；③透皮给药系统；④粘膜给药系统；⑤智能型给药系统等。介孔二氧化硅因为其具有高比表面积、高孔容积、孔道的纳米尺度在2~50nm范围内匀称可调、良好的热稳定性和孔道内含有丰富的硅羟基、对于人体无毒无害等特点，在生物医药领域得到了长足的发展。同时，聚乙二醇是常用于生物大分子表面共价修饰的一种聚合物，在生物医药领域得到了广泛探讨。在介孔二氧化硅材料孔径中加入聚乙二醇修饰的固定蛋白、卟啉、吡啶等其他的生物性药物，实现药物控释、靶向投放等功能，提高药物疗效的长久性和有效性。我们希望通过探讨介孔二氧化硅材料与聚乙二醇试剂，利用其特性实现药物缓释与靶向投放两种功能。4.2项目内容

利用介孔二氧化硅材料制备药物载体，并进行药物载入，实现药物缓释与靶向投放。4.3项目目标1）通过在介孔二氧化硅材料孔径内覆盖磷酸钙涂层实现药物缓释。2）利用介孔材料的多孔特性进行药物载入。3）通过在介孔二氧化硅材料表面进行修饰实现药物的靶向投放。4.4项目意义实现药物缓释与靶向投放将使得药物的疗效释放的更加彻底。一方面，药物将在人体循环中存在更长时间；另一方面，药物靶向投放将使得药物对指定病毒发挥作用，避开损害正常细胞。这将对癌症等绝症供应更平安高效的治疗方式，有着广袤的市场前景。项目可行性5.1介孔二氧化硅材料具有很多确定大小的孔隙以及比表面积高的结构材料被称为多孔材料，其中孔径介于2-50nm的一类多孔材料被称为介孔材料。介孔材料具有极高的比表面积、规则有序的孔道结构、狭窄的孔径分布、孔径大小连续可调等特点。这些特点使得它可以在很多微孔沸石分子筛难以完成的大分子的吸附、分别，尤其是催化反应中发挥作用。而且，这种材料的有序孔道可作为“微型反应器”，在其中组装具有纳米尺度的匀称稳定的“客体”材料后而成为“主客体材料”，由于其主、客体间的主客体效应以及客体材料可能具有的小尺寸效应、量子尺寸效应等将使之有望在电极材料、光电器件、微电子技术、化学传感器、非线性光学材料等领域得到广泛的应用。因此介孔材料从它诞生一起先就吸引了国际上物理、化学、生物、材料及信息等多学科探讨领域的广泛爱好，目前已成为国际上跨多学科的热点前沿领域之一。随后，介孔二氧化硅因为其具有高比表面积、高孔容积、孔道的纳米尺度在2~50nm范围内匀称可调、良好的热稳定性和孔道内含有丰富的硅羟基等特点，成为催化、催化剂负载、吸附分别和其它新材料等方面关注的焦点，得到了长足的发展。生物大分子，如酶、蛋白质、核酸等，它们的相对分子质量在1~1*106之间时，分子的尺寸小于10nm，病毒的相对分子质量约为1*107，尺寸的大小在30nm旁边，孔径在2~50nm之间的介孔二氧化硅材料因为其没有毒性，使得该材料在酶、蛋白质等物质的分解、固定上发挥了相当重要的作用，从而在生物医药领域发挥着独特的作用。其中一种实际应用包括了干脆包埋以及药物控释过程：在介孔二氧化硅材料孔径中加入固定蛋白、卟啉、吡啶等其他的生物性药物，实现药物控释、精确定位等功能，提高药物疗效的长久性和有效性。5.2聚乙二醇聚乙二醇(PEG)系一种常用药用辅料，世界各国的均收载有PEG条目。聚乙醇的制备非常简洁。将环氧乙烷与单乙二醇(或双乙二醇)在碱性催化剂催化之下经聚合而形成聚乙二醇。只要适当变更聚合条件即可使PEG的分子量发生变更。目前生产的PEG的分子量通常在200~35000之间。

PEG的性质随分子量而变更。分子量在400以下的PEG在室温中为非挥发性液体。而PEG600的熔点为17~22℃，当温度低于这一界限时PEG600呈油膏状。分子量在800~2000的PEG通常为膏状体；分子量超过3000的PEG则为固体(片状或粉末状物质)。分子量大于35000的PEG目前在工业上短暂还无法合成。随着分子量的增加，PEG的硬度也随之增加，但无论PEG分子量有多大，其熔点最多只有60℃左右。全部PEG(不论呈液体、膏状体或固体)均有良好水溶性，即使大分子量PEG其水溶性亦能达50％左右，故PEG在各行各业(尤其医药工业)中有着广泛的用途。例如一些常用药剂如滴眼药水和栓剂均运用PEG作为药物赋形剂，使主药能更顺畅地进入眼内(或体内)。

PEG对人体无毒无害，亦无致癌、致畸(胎)和基因突变等不良副作用，故PEG近几年来在医药工业中用途不断扩大。在过去10年里PEG主要用作液体制剂(如眼药水)中的稠化剂以便增加其与眼粘膜的接触时间。其次，PEG还可用作软膏剂的基质。大分子量固体PEG与小分子量液体PEG按比例混合后可作犯难溶药物的助溶剂以此提高后者的溶解度从而可增加药物的体内生物利用度。

药片等固体药物制剂配方中如加入适量大分子PEG可增加打片时药物的流淌性，并提高主药的胃内溶解性最终有助于增加生物利用度。

90年头中，欧美医药探讨人员发觉：PEG分子末端的2个羟基可与醇类物质或蛋白质／多肽物质耦合成为一种新型混合物。此外，探讨人员还发觉：PEG在药物制剂中的功能之一是延长药物在体内的释放时间。这是因为主药与PEG组成的耦合体进入体内会因酶的作用而渐渐降解，主药从PEG的羟基上脱落进入血液循环从而可“延时释放”主药发挥缓释作用，故PEG也可视为一种缓释助剂。上述新发觉大大拓展了PEG在医药工业中的新用途。迄今为止西方药物探讨机构已研制出数以百计的“PEG-药物”的新型耦合体类制剂。现将其中主要产品介绍如下：

1）“水蛭素”。这是一种优异的溶栓剂，可用于防止动脉血栓形成或用于冠心病人动脉“搭桥”手术后预防新血管中生成血栓。缺憾的是，水蛭素在运用过程中血清半衰期太短，难以发挥抗栓效果。美国一探讨机构将水蛭素与PEG一起加工成为耦合体制剂后可大大延长水蛭素的血清半衰期从而提高其在体内的抗血栓生成效果。

2）“反义药物”寡核苷这是一种新开发的抗病毒药物。但它同样存在血清半衰期太短的缺点。如按常规加工方法加工成制剂病人需每天服5~6次药，不仅麻烦还会增加医疗成本。国外已将“反义寡核苷”(antisense

oligonu-cleotide)与PEG一起加工成为耦合体药物。该新型药物具有较长的血清半衰期，可用于治疗疱疹等常见病毒性疾病。

3）高效低毒的PEG-肿瘤药物耦合体制剂

众所周知，不少抗肿瘤药物(如阿霉素、丝裂霉素，博来霉素、喜树碱、长春新碱等等)对人体有剧烈毒性。但这些药物在临床上又大多为常用药。西方探讨人员发觉：如将PEG与阿霉素之类毒性很大的抗肿瘤药一起加工成耦合体制剂不仅可削减抗肿瘤药的临床用量，还能提高其生物利用度，降低体内毒性。这一新发觉具有重要意义，因为PEG的“减毒作用”可使大量有毒抗肿瘤药成为常用化疗用药。可以确定，今后将会有更多有毒的其它药物被加工成PEG耦合体新制剂以减轻其对人体的损害。

4）PEG与生物工程药品的耦合体新制剂

包括α干扰素、白间素、人胰岛素、第八因子(凝血因子)和单克隆抗体等在内的生物工程药品大多为价格昂贵的蛋白质／多肽类药物。如将它们与PEG-起加工成为耦合体类制剂不仅能提高药物的水溶性，增加其生物利用度，还可相应降低药物剂量，最终可削减病人的医药费用。美国一些公司已开发上市了α干扰素-PEG耦合体新制剂。今后几年内还将有若干只单克隆抗体PEG耦合体新型制剂上市。据药理探讨，蛋白质类生物工程药品的PEG耦合体新制剂可大大延长其体内作用时间并同样有助于削减药物的副作用。PEG在医药行业的其它新用途包括：

1）PEG作为新型高效乳化剂辅料

很多难溶性药物如加工成常规口服制剂(片剂或胶囊)由于其体内溶解度小而影响药物的生物利用度。如若将难溶药物与PEG一起加工成乳化剂可大大增加药物的生物利用度，最终可提高药效并相应削减用药剂量。

2）PEG水凝胶剂

水凝胶剂(hydrogel)是90年头初新开发的一种药物新制剂。以PEG为基质加入主药及其它一些药物赋形剂可加工成为“水凝胶剂”。尤其一些常用消炎止痛药物(如吲哚美辛、萘普生与布洛芬等等)均可加工成为水凝胶剂。将其擦在皮肤痛处或关节肿胀处可促使药物加速透过皮肤(关节)从而发挥止痛效果。国外研制中的另一新型PEG水凝胶为“氯硝西泮”(抗惊厥药物)水凝胶。当病人因癫痫大发作不省人事(通常牙关紧咬)无法服药之时，医护人员将“氯硝西泮水凝胶”擦在其身体上可使药物快速透过皮内进入血液循环从而发挥抗惊厥作用。据药理探讨，由PEG为基质加工成的水凝胶剂事实上是一种良好的“药物渗透泵”，可将难溶或低溶药物顺当送进体内从而发挥其药效。

综上所述，聚乙二醇是一种用途极其广泛的药用辅料。其令人感爱好的新用途是：如将一些沿用已久的老药与PEG加工成耦合体制剂不仅能提高其药效，还可减轻药物的毒性、增加生物利用度，降低药物剂量。可以信任，今后将会有更多的PEG耦合体新型制剂问世，其市场前景无限广袤。5.3试验方案利用浸渍法在介孔材料微孔内表面覆盖磷酸钙层运用前驱体为五氧化二磷（P2O5）和硝酸钙（Ca(NO3)2），溶剂为无水乙醇。前驱体制备主要采纳了浸渍法。浸渍法是制造固体催化剂的方法之一，即将一种或几种活性组分通过浸渍载体负载在载体上的方法。通常是用载体与金属盐类的水溶液接触，使金属盐类溶液吸附或贮存在载体毛细管中，除去过剩的溶液，再经干燥、煅烧和活化制得催化剂。浸渍方式有过量溶液浸泡与等体积吸附等。有时加入竞争吸附剂使活性组分匀称吸附在整个载体上。常用的溶剂有：（根据溶剂极性从小到大排列）石油醚<苯<氯仿<乙醚<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<水<含盐水（本次主要采纳乙醇溶液）浸渍法的原理：一般原理是通过毛细管压力使液体（活性组分）渗透到载体空隙内部；但假如有运用真空的话，那么内外压力差也是活性组分进入的一个因素。真空的好处可以清除孔里面的杂质和水分，因而相对能使更多的活性相进入，增加负载量。图浸渍法制备前驱体示意图在乙醇溶液中，介孔材料发生内部水解。P2O5可以很简洁地溶解在乙醇中，并发生酯化反应，通过P-O-P键的断裂形成磷酸酯，即PO(OR)3，PO(OR)2OH和PO(OR)(OH)2，而在有水存在时，P2O5进行水解形成H3PO4（含有P-OH键）。前驱体在毛细作用下，在缺水的状况下，缓慢进入介孔材料孔径中。在40℃，通过溶胶凝胶过程在介孔材料内孔径表面形成Ca-O-P键。最终，通过在500℃下于空气中煅烧样品获得试样。此事发生成核现象，磷酸钙趋向于在Si-OH官能团上锚定形成涂层。前驱体mPEG-SS-pyridine制备为实现药物的靶向投放，提高药物运用效果，查阅文献后，确定须要在吡啶类药物上通过二硫键与聚乙二醇（mPEG）连接。聚乙二醇（mPEG）是常用于生物大分子表面共价修饰的一种聚合物，在生物医药领域得到了广泛探讨。在生物大分子表面修饰方面，肽和蛋白质是极为重要的因素。缘由在于聚乙二醇可以连接的肽和蛋白质种类很多，它们的选择干脆影响到能否有效屏蔽抗原和可能产生免疫反应的基因，受体介导能否被网状内皮系统（RES）摄取，能否防止被蛋白水解酶识别而发生降解。利用聚乙二醇修饰也增加了多肽的表观大小，从而降低肾滤并变更生物分布。预料制备方法：①将mPEG（5g，1mmol）溶于26mL吡啶中，加入对甲苯磺酰氯PTSC（9g，50mmol），在65℃下水浴搅拌3小时，静置一夜后真空蒸发至干，凝胶过滤获得PEG-Tosyl。②将上者溶于6mL吡啶中，与硫代乙酸钾（1.2g，10.5mmol），三乙胺（500μL）混合，敞口反应一夜后真空蒸发至干，凝胶过滤获得PEG-Thioacetate。③将上者溶于16mL甲醇中，与羟胺、甲醇钠/甲醇混合，在60℃下水浴搅拌1小时，静置一夜。④加入醋酸中和，加入DTT（155mg），在65℃下反应40分钟，凝胶过滤获得mPEG-SH。⑤将上者溶于水中，与二吡啶基二硫化物（245mg，1.1mmol）的甲醇溶液混合，加入三羟甲基氨基甲烷/氯化钠缓释剂，在65℃下间歇搅拌30分钟，冷却，凝胶过滤获得前驱体。药物载体MSNs-SS-mPEG制备基于如下反应，将药物载体完成：①将介孔二氧化硅材料MSNs（90mg）加入甲醇（20mL）、巯丙基三氧乙基硅烷MPTES（1.8mL），在50℃下搅拌24小时。将所得溶液离心分别（10krpa，20min），用甲醇洗涤3次，获得MSNs-SH。（制备多组，作为参照组）②将上者与无水二甲基甲酰胺DMF（20mL），前驱体mPEG-SS-pyridine（40mg）混合，在50℃下搅拌24小时。将所得溶液离心分别（10krpa，20min），用甲醇洗涤3次，获得载体。药理分析将无药物载入的药物载体与载入药物的药物载体比照分析。5.4结论可以通过在介孔二氧化硅材料上覆盖磷酸钙涂层，使得药物能够适应人体的酸碱度环境，起到药物缓释作用。同时，介孔二氧化硅材料作为一种多孔材料，其有序的介孔孔道有利于小分子的进入，从而使得材料能快速高效的吸附药物。而通过在介孔二氧化硅材料的表面进行聚乙二醇修饰也可以实现药物的靶向投放。因此，该试验具有较高的可行性。项目进度支配6.1支配进度表序号进度标题进度内容起先时间结束时间1选题确定详细探讨方向2014-03-012014-03-152方案制定确定详细探讨方案2014-03-152014-03-313载体制备载体制备2014-04-012014-06-154药物载入药物载入与药理分析2014-05-012014-06-155数据处理并撰写总结报告处理试验数据并撰写总结报告，为发表论文做打算2014-06-152014-06-30