实验影响酶促反应的因素

实验影响酶促反应的因素第1页，共10页，2023年，2月20日，星期六实验原理

酶促反应在低温时，反应速度较慢甚至停止。随着温度升高，反应速度逐渐加快。当达到最适温度时，酶促反应速度达最大值。人体内大多数酶的最适温度在37℃左右。如温度过高，反应速度反而下降，甚至停止。这主要由于酶蛋白因高温变性失活之故。

酶活性与溶液pH有关，pH既影响酶蛋白本身构象，也影响底物解离程度，从而改变酶与底物结合和催化作用。故每种酶都有其最适pH的作用环境。过酸过碱均可引起酶蛋白变性而降低或失去活性。唾液淀粉酶的最适pH为6.8。氯离子对该酶活性有激动作用，铜离子则有抑制作用。第2页，共10页，2023年，2月20日，星期六

本实验利用碘与淀粉及其水解产物(大分子糊精、麦芽糖)的颜色反应，来比较唾液淀粉酶在不同条件下催化淀粉水解的速度，从而判断温度、pH、激动剂和抑制剂对酶活性的影响。

淀粉………………→糊精……………→麦芽糖与碘呈蓝色与碘呈紫色至红色与碘不呈色第3页，共10页，2023年，2月20日，星期六试剂1．1％淀粉溶液2．新鲜配制的稀释唾液3．不同pH缓冲液(1)pH6.8缓冲液(2)pH5.0缓冲液(3)pH8.0缓冲液4．0.9％NaCI溶液(即生理盐水)5．1％CuSO4溶液6．碘液第4页，共10页，2023年，2月20日，星期六操作1．温度对酶活性的影响(1)取试管三支，编号，按下表加入试剂(2)混匀后，三支试管分别置于冰浴、沸水浴、恒温水浴(37℃)中预温5分钟。再向各管加入稀唾液5滴，继续在原水浴中放置10分钟。(3)取出各管，各滴加碘液1滴(切忌摇动)，观察颜色并记录。

管号试剂（滴）123pH6.8缓冲液1515151％淀粉溶液555第5页，共10页，2023年，2月20日，星期六2．pH对酶活性的影响(1)取试管三支，编号，按下表加入试剂(2)将各管摇匀，同时置37℃水浴中恒温10分钟(3)取出各管，各滴加碘液1滴(切忌摇动)，观察颜色并记录。

管号试剂(滴)123pH5.0缓冲液15pH6.8缓冲液15pH8.0缓冲液151％淀粉溶液555稀唾液555第6页，共10页，2023年，2月20日，星期六3．激动剂、抑制剂对酶活性的影响(1)取试管三支，编号，按下表加入试剂(2)将各管摇匀，同时置37℃水浴中恒温10分钟(3)取出各管，各滴加碘液l滴(切忌摇动)，观察颜色并记录。

管号试剂(滴)123蒸馏水100.9％NaCl溶液101％CuSO4溶液10pH6.8缓冲液1515151％淀粉溶液

555稀唾液

555第7页，共10页，2023年，2月20日，星期六实验报告1．结合本次实验，说说影响酶作用的几个因素2．根据实验结果，正确填写下列各表，并作简单分析(1)温度影响试管号实验条件加碘液后

颜色结果分析1冰

浴2沸水浴3恒温水浴第8页，共10页，2023年，2月20日，星期六(2)pH影响(3)激动剂与抑制剂影响试管号实验条件

加碘液后

颜色结果分析1pH5.02pH6.83pH8.0试管号实验条件加碘液后

颜色结果分析1蒸馏水

20.9％NaCL溶液3l％CuS04溶液第9页，共10页，2023年，2月20日，星期六思考題