实验 细胞膜的渗透性

实验细胞膜的渗透性第1页，共21页，2023年，2月20日，星期六血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。

将红细胞放置在各种溶液中，渗入红细胞的溶质能提高红细胞渗透压，使水进入红细胞，引起溶血及细胞膜破裂。由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同。因此，可通过溶血现象来测量各种物质通透性的差别。第2页，共21页，2023年，2月20日，星期六三、材料、试剂和仪器

1．材料一龄鸡，将鸡血溶于含有抗凝剂的等渗液中（肝素钠0.2mg/mL,一般范围在0.01-0.2mg/mL；等渗液为0.15mol/LNaCl）

2.试剂0.17mol／L氯化钠，0.17mol／L氯化铵，0.17mol／L硝酸钠，0.32mol／L葡萄糖，0.32mol／L甘油，0.32mol／L乙醇，0.32mol／L丙醇；0.12mol／L硫酸钠，0.10mol／L草酸钠，0.10mol／L醋酸钠，

3.器材试管，5mL量筒，滴管，载玻片，盖玻片，光学显微镜。第3页，共21页，2023年，2月20日，星期六血液的主要成分（一）血浆血浆相当于结缔组织的细胞间质，为浅黄色液体，其中除含有大量水分以外，还有无机盐、纤维蛋白原、白蛋白、球蛋白、酶、激素、各种营养物质、代谢产物等。第4页，共21页，2023年，2月20日，星期六（二）血细胞血细胞分为三类：红细胞、白细胞、血小板。

1、红细胞呈双面凹陷的圆盘状，直径约为7.5微米，没有细胞核，细胞质内没有细胞器而有大量血红蛋白。血液的颜色就是由血红蛋白决定的。血红蛋白具有与氧和二氧化碳结合的能力。第5页，共21页，2023年，2月20日，星期六第6页，共21页，2023年，2月20日，星期六2、白细胞在血液中呈球形，能以变形运动穿过毛细血管壁进入周围组织中。根据细胞质中是否含有特殊颗粒，可把白细胞分为粒细胞和无粒细胞。无粒细胞分为两种，淋巴细胞和单核细胞。粒细胞分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞。第7页，共21页，2023年，2月20日，星期六3、血小板也称血栓细胞，在流动的血液中呈双面凸的圆盘状，侧面看呈梭形，直径2-4微米。血小板的功能是参与止血与凝血。第8页，共21页，2023年，2月20日，星期六第9页，共21页，2023年，2月20日，星期六红细胞压积：又称血细胞比容，指的是血细胞在血液中所占的容积百分比，又称为红细胞压积。正常成年男性为40%～50%，女性37%～48%.它反映了血液中红细胞和血浆的相对数量变化。血清：血液经自然凝固1～2小时，血凝块回缩，析出淡黄色透明液体即血清。两个概念第10页，共21页，2023年，2月20日，星期六抗凝血剂的种类与特点常用抗凝血剂包括：1.非肠道用药抗凝血剂：如肝素；2.香豆素抗凝血剂类：常用的有双香豆素、华法令和新抗凝等，通过拮抗维生素K使肝脏合成凝血酶原及因子Ⅶ、Ⅸ和Ⅹ减少而抗凝；3.抗血小板凝集药物：如阿司匹林，对血小板环氧化酶有抑制作用；4.蛇毒溶栓剂：如去纤酶、抗栓酶和清栓酶，可溶解已形成的血栓使血管再通，从而起到抗凝血作用。第11页，共21页，2023年，2月20日，星期六肝素的作用机理肝素在体内、体外均有强大抗凝作用。与其带大量负电荷有关，可使多种凝血因子灭活。这一作用依赖于抗凝血酶III（antithrombin

III，AT

III）。At

III是凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα、Ⅹα等含丝氨酸的蛋白酶的抑制剂。它与凝血酶通过精氨酸-丝氨酸肽键相结合，形成At

III凝血酶复合物而使酶灭活，肝素可加速这一反应达千倍以上。第12页，共21页，2023年，2月20日，星期六四、实验程序1．血红细胞悬液：用注射器吸入2mL含有肝素的等渗液后从鸡翼下静脉取鸡血5mL，加入50mL烧杯，将鸡血用等渗液进行1：10稀释。第13页，共21页，2023年，2月20日，星期六2．溶血现象观察：取试管一支加入3mL蒸馏水，加入1滴或2滴稀释的鸡血，轻混一下，然后静止注意观察溶液的颜色变化。由于红细胞发生破裂，溶液颜色由浑浊的红色逐渐清亮。此即为溶血现象。第14页，共21页，2023年，2月20日，星期六3、溶血前后的镜检观察在溶血前、后分别取一滴血细胞，滴于载玻片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的形态差异。第15页，共21页，2023年，2月20日，星期六4．鸡红细胞的渗透性记时比较（1）分别取3只试管，各加入3ml的0.17mol／L氯化钠，0.17mol／L氯化铵，0.17mol／L硝酸钠，加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。（2）分别取4只试管，各加入3ml的0.32mol／L葡萄糖，0.32mol／L甘油，0.32mol／L乙醇，0.32mol／L丙醇；加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。第16页，共21页，2023年，2月20日，星期六4．鸡红细胞的渗透性记时比较（3）分别取3只试管，各加入3ml的0.12mol／L硫酸钠，0.10mol／L草酸钠，0.10mol／L醋酸钠，加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。（4）在反应前、后分别取1-2滴血细胞，滴于载玻片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的形态差异。第17页，共21页，2023年，2月20日，星期六五、结果与分析将观察到的现象记录，并进行分析

试管编号溶液种类是否溶血溶血所需时间结果分析1234……10第18页，共21页，2023年，2月20日，星期六六、思考题1.推断下列溶液的溶血反应会如何。

0.17mol/L氯化钾、0.17mol／L硝酸钾0.12mol／L氯化镁、0.12mol／L氯化钙、0.10mol／L硫酸钾、0.10mol／L醋酸钾、0.10mol/L柠檬酸钠、0.32mol／L甘露醇、0.32mol/L蔗糖。2.溶液的渗透压主要与哪些因素有关?对简单盐溶液如何粗略计算出其渗透压?3.抗凝血剂的种类有哪些？肝素抗凝血作用的机理？第19页，共21页，2023年，2月20日，星期六渗透压（osmoticpressure）用符号π表示，单位：atmπ的大小可用渗透计测定，或用渗透平衡时高出水面的溶液对下部产生的静水压力表示（h×s×比重=体积×比重）。也可用VantHoff提出的公式计算：

π=icRT或π=n/VRT

c=溶液的摩尔浓度；i=等渗系数

π是溶液的渗透压（kPa），V是溶液的