的抗原抗体反应

的抗原抗体反应第1页/共30页病原生物与免疫学实验第2页/共30页实验室规则一.进入实验室必须穿护士服,不必需的物品不要携带入室，严禁在实验室进食、饮水。二.保持实验室的安静和秩序,实验要严肃认真。三.如有传染性材料的污染,及时报告老师。四.实验过程中有仪器和器材的损坏要报告老师并登记。五.实验后的材料要放到指定的位置。六.离开实验室前,要用肥皂洗手,接触过传染性强的实验材料要用0.1%的新洁尔灭泡手1-2分钟七.值日生要作好值日工作,关好水,电,门窗,作好实验记录本的登记方可离开实验室。第3页/共30页抗原抗体反应Ab-Agreactions第4页/共30页实验目的掌握血型鉴定实验、免疫胶体金技术实验的操作及结果的正确观察、判断；熟悉血型鉴定实验、免疫胶体金技术实验的原理；了解血型鉴定实验、免疫胶体金技术实验的用途。第5页/共30页抗原抗体反应的基础

basisofAb-Agreaction第6页/共30页抗原抗体反应的特点

charactersofAb-Agreaction特异性

Specificity

第7页/共30页抗原抗体反应的特点

charactersofAb-Agreactions可逆性reversibility第8页/共30页凝集反应

Agglutinationreactions在一定浓度的电解质环境中，颗粒性抗原（红细胞、细菌、乳胶颗粒等）和相应抗体反应能够产生肉眼可见的凝集块。直接凝集(directagglutination)间接凝集（indirectagglutination）间接凝集抑制试验(inhibition

of

indirectagglutination)第9页/共30页直接凝集

directagglutination----ABO血型的鉴定

identificationofABObloodtype第10页/共30页概述overview血型系统Bloodgroupsystem

第11页/共30页1901年发现的人类第一个血型系统----ABO血型系统发现者----

奥地利细菌学家KarlLandsteinerABO血型系统的发现DiscoveryofABObloodtype第12页/共30页【实验原理】

Experiment’smechanism

血型是指红细胞的血型，是根据红细胞膜外表面存在的特异性抗原（镶嵌于红细胞膜上的糖蛋白和糖脂）来确定的，这种抗原或凝集原是由遗传决定的YYY+第13页/共30页【实验器材】

Experiment’sequipments

1：载玻片、采血针、牙签2：抗A和抗B单克隆抗体、碘伏、棉签。第14页/共30页【操作步骤】

Experiment’sMethods1.在洁净的玻片两端用记号笔分别标上A、B，然后在A端滴一滴抗A单克隆抗体，B端滴一滴抗B单克隆抗体；2.用碘伏消毒手指；3.取无菌采血针，采血；4.用牙签一端蘸取少量血液，置于抗A单克隆抗体搅匀，换取另一根牙签蘸取少量血液，置于抗B单克隆抗体搅匀；5.轻轻转动玻片，使其充分混匀，静置数分钟后，观察结果。注意：两次取血的牙签一定不能混用。第15页/共30页（单克隆抗体+被检者红细胞）被检者血型抗A抗B

＋－－＋＋＋－－A【实验结果】Experiment’sresultsBABO第16页/共30页【实验结果】Experiment’sresults第17页/共30页

免疫标记技术

immunolabelingtechniques第18页/共30页简介免疫标记技术是指用荧光素、酶、放射性同位素等对抗体或抗原进行标记，然后再通过检测标记物来观察抗原抗体反应的实验技术。第19页/共30页分类

classification

第20页/共30页免疫胶体金技术

第21页/共30页胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）等检测。第22页/共30页胶体金（Colloidalgold）是氯金酸（HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的作用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态。第23页/共30页胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电吸引而形成牢固结合。胶体金标记技术（Immunogoldlabelingtechnique）是以胶体金作为示踪标记物应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。第24页/共30页胶体金试纸条诊断技术的原理以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利用胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/抗体。最常用的是双抗夹心法检测抗原第25页/共30页胶体金试纸条示意图检测线质检线吸收垫样品垫硝酸纤维素膜连接垫（胶体金垫）背衬（底板）第26页/共30页【实验原理】

Experiment’smechanism原理图胶体金标记的鼠抗人α—hCG抗体抗人β—hCG抗体抗鼠IgG抗体hCG第27页/共30页【操作步骤】

Experiment’sMethods1.待测样品、检测试纸和其它检测材料等在室温后检测2.将测试纸有箭头的一端插入尿液标本容器中