人员、动物及物品进出实验动物屏障设施的操作

人员、动物及物品进出实验动物屏障设施的操作【目的与要求】掌握人员进出实验动物屏障设施的具体步骤、人员净化的具体要求及设备使用；掌握动物、物品传递的步骤，传递过程中的具体要求及设备使用；掌握渡槽、传递窗、预真空高压灭菌器的使用。【原理】通过淋浴，穿着无菌服和风淋等措施，防止人员进入屏障设施造成污染。通过一系列无菌操作将动物传进和传出屏障设施，使动物和屏障设施在操作过程中不受污染。凡能够高压灭菌的物品，一律由双扉高压灭菌锅灭菌后传入。如笼架组装件）、鼠盒可带垫料）、工作服等。不耐热的物品可由灭菌渡槽或传递窗传入，如经辐照灭菌后的饲料、塑料微型喷雾器等。走廊、缓冲间、浴室、传递窗等区域，通常采用紫外线照射和熏蒸消毒。动物饮用水一般采用过滤除菌或高压灭菌。【设施设备、试剂与仪器】更衣室（一更、二更）、淋浴室、无菌工作服（衣裤、帽、口罩、袜等）、风淋室、泡手桶、消毒药。缓冲间、传递窗、动物包装盒等。渡槽、消毒液、500m1量筒。预真空双扉高压灭菌器、高压灭菌效果指示剂、鼠盒、预处理后的垫料。【操作方法与步骤】一、人员进入屏障设施更拖鞋f一更（脱衣裤）f淋浴f二更（穿无菌内衣及工作服）f风淋室f洁净区。二、动物传进屏障设施准备在引进动物到达前，在检疫室内准备相应数量的鼠盒。传递窗内侧准备两份消毒液，一份内浸有长镊，另一份浸有刀具。传递窗外侧准备消毒液、洁净抹布。检查传递窗的紫外灯。传递用消毒液擦洗包装盒并放人传递窗，关紧外侧门打开紫外灯并定时20min。接受动物紫外灯自动关闭后打开内侧门。戴好橡胶手套，从消毒液内取出刀具，划开包装盒的密封胶带，打开包装盒。刀具放回消毒液并洗消双手。用长镊将动物一一放人饲养盒内。操作完毕把消毒液和包装盒放人传递窗，关闭内侧门。包装盒和消毒液由外侧取走处理。检疫观察按规定进行检疫。二、动物发放挑选动物动物待发人员按用户的要求严格挑选动物，做到数量、体重、性别等准确无误。包装动物挑选完毕传入待发室，工作人员再次确认动物的数量、性别等后放入包装盒。用胶带密封后在相应部位标明动物的品种、体重、数量、性别等。传递动物包装完毕放人传递窗或缓冲间，关闭内侧门。外面工作人员取出动物并消毒传递窗或缓冲间。四、高压蒸汽灭菌准备打开电、汽、水开关，预热夹层。预热的同时可以进行装锅等准备工作。装锅在确认内侧门闭紧的前提下打开外侧门。将欲灭菌物品如饲养盒放好垫料）、饮水瓶、工作服等码放在锅内。不可过松，也不可过挤。在适当位置（底层的饲养盒内）放人灭菌效果指示剂或卡，关闭锅门。灭菌按启动钮，高压锅即按预先设定的程序自动灭菌一一脉动真空3次斗132°C灭菌4min呻排汽干燥4min斗结束信号。出锅屏障内部人员在结束信号鸣响后再次确认压力表指示为“零”时方可开门出锅。出锅完毕随手关紧锅门直至门闭指示灯亮。五、灭菌渡槽的使用准备用自来水把渡槽洗刷干净。关闭排水阀，灌注自来水，据事先量好的体积，按1：600加入百毒杀。当渡槽内的液面距中隔板2—3cm时，通知室内工作人员从远端缓缓打开渡槽内盖，利用室内正压挤出槽内存留的污染空气。液面升至预定位置（超过中隔板底边10cm以上）时停止注水。传递操作人员戴好长袖橡胶手套，将物品缓缓放人渡槽。比重大（沉底）的物品可直接推过中隔板，20min后捞出。比重小（漂浮）的物品要浸入液体里，20min后推过中隔板并捞出。六、缓冲间和传递窗的使用一般不使用缓冲间和传递窗向屏障设施内传递物品。只有在传人笼架、精密仪器和传进动物时才使用缓冲间和传递窗，它们的主要作用是向外传递动物和物品。传人物品时先用消毒药充分洗消其表面，再用消毒药喷雾和紫外线照射消毒。传人精密仪器时，可把仪器放人特制口袋内用环氧乙烷（900ms/L，26-32吧，8h）灭菌，口袋放人传递窗按上述方法处理。向外传送物品时，在确认内侧门已关闭后方可打开外侧门搬运物品。搬运完毕，清理并用消毒液洗消表面，紫外线照射20min以上。【注意事项】1.必须按程序操作，不可减免操作步骤。淋浴时应先洗头发后洗躯体，头洗两遍，手指刷洗两遍，淋浴时间不少于6min。二更时应站立操作，洁净服不能接触任何物品。在进入洁净区前要用0.025%的“百毒杀”液洗搓手掌和手背或。风机运转稳定后进人风淋室，必须按要求吹净各部位和保证吹淋时间不少于3min。风机停稳后方可打开内侧门进入清洁区。6.在屏障设施内不同区域工作要着不同颜色与要求的工作服和工作鞋。传进动物的包装要完好无损。消毒时不能留下死角。要保证消毒药的浓度和消毒时间。发出的动物一定