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37Duplexreal-timeRT-PCRdetectionmethodforinfluenzavirusandcaninedistemper请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。流感病毒与犬瘟热病毒双重荧光RT-PCR检测方法GB/T6682分析实验室用水规格和GB/T27401实验室质量控制规范动物4缩略语5.2TRIzol，应2℃~8℃保存。5.7TE缓冲液，配制见A.4。——棉拭子；——剪刀、镊子；用无菌剪刀、镊子采集不少于2.0g的肺脏等组织脏器，装入一次性自封袋或其它灭菌容器，编号离心15min，取上清液转入无菌的1.5mL8.2.8可采用经验证的病毒RNA），反应体系需要20μL荧光RT-PCR反应液。按B.2配制反应液，为避免移液器取样损失，建议按n+1个反应在样品处理区进行。分别向上述PCR管中加入样本核酸提取步骤8.2.7中制备的RNA溶液各5μL，盖9结果判定9.1结果分析条件的设定9.2质控标准9.3结果判定9.3.2.2单阳性：9.3.3可疑A.20.5mol/LEDTA（pHACCAGTCAACAAACTCCACFAM-GATTTGTTGCACACAGCATTCC-BCy5

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