生物11dna重组技术的基本工具新人教版选修

生物11dna重组技术的基本工具新人教版选修第1页/共20页基因工程的概念基因工程：又叫基因拼接技术或DNA重组技术，是按照人们的意愿，进行严格的设计，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传技术。（赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品）第2页/共20页基因工程的概念基因工程的别名基因拼接技术或DNA重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达结果人类需要的基因产物第3页/共20页抗虫害的玉米转鱼抗寒基因的番茄转基因

鲑鱼基因工程产品第4页/共20页转黄瓜抗青枯病基因的甜椒乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷)第5页/共20页基础理论和技术的发展催生了基因工程

DNA是遗传物质的证明DNA双螺旋结构和中心法则的确立遗传密码的破译基因转移载体的发现工具酶的发明DNA合成和测序技术的发明DNA体外重组的实现重组DNA表达实验的成功第一例转基因动物问世PCR技术的发明基础理论技术发明第6页/共20页DNA重组技术的基本工具

限制性核酸内切酶——“分子手术刀”

DNA连接酶——“分子缝合针”

基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

第7页/共20页一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”分布：主要在原核生物中作用特点：特异性。即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。切点：磷酸二酯键结果：产生黏性末端或平末端

第8页/共20页大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。限制酶第9页/共20页限制性内切酶限制酶第10页/共20页黏性末端和平末端第11页/共20页限制酶所识别的序列有什么特点

限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。第12页/共20页限制酶在原核生物中的作用

原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但是，生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。第13页/共20页

DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。二、DNA连接酶——“分子缝合针”第14页/共20页二、DNA连接酶——“分子缝合针”连接酶有两种：一种是从大肠杆菌中分离得到的，称之为E·coli连接酶。另一种是从T4噬菌体中分离得到，称为T4连接酶。这两种连接酶催化反应基本相同，都是连接双链DNA的缺口，而不能连接单链DNA。E·coli连接酶只能连接黏性末端；T4连接酶既可“缝合”黏性末端，又可“缝合”平末端。第15页/共20页DNA连接酶——“分子缝合针”DNA连接酶与DNA聚合酶一样吗？为什么？第16页/共20页三、基因的载体——“分子运输车”载体必须具备的条件：1、能够在受体细胞中复制并稳定地保存；2、具有一个或多个限制酶切点，以便与外源基因连接；3、具有某些标记基因，便于进行筛选。（如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等）

4、对受体细胞无害载体的作用：1、将外源基因转移到受体细胞中去。2、利用运载体在受体细胞内，对外源基因进行大量复制。常用的载体有：

质粒，λ噬菌体的衍生物，动植物病毒等第17页/共20页质粒①广泛地存在于细菌中、②独立与拟核外、③能自主复制、④双链闭环DNA分子、⑤很小（大小只有普通细菌拟核DNA的百分之一）要对天然质粒进行人工改造第18页/共20页;/济南阳光女子医院wpe47xrz是在这里蹲点吧！”“你就不能配合点吗。”“你又没让我配合。”……被人遗忘的慕容凌娢终于从地上站了起来，但感觉自己的脑细胞正急速死亡，智商再次跌入谷底。韩哲轩怎么会知道我的真名？百蝶好像也知道他去找过夏桦。“呃……”慕容凌娢强壮镇定的笑了笑，“韩哲轩你怎么会在这里？”“百蝶不是说了吗，我就是在这里专门等你们的。”韩哲轩极其爽快的承认了自己的行为，“我看见你们两个出来，就跟上了。刚想叫住你就看见你往后摔了……幸好我闪的快……”这剧情跟我想的怎么不一样？按照言情小说的正常套路，我不是应该被人准确无误的接住吗？然后不就顺理成章的……慕容凌娢居然做起了花痴的白日梦。慕容凌娢把自己的幻想和现实仔细对照了一下，又看了看面前这个笑得漫不经心的人，悲痛的捂住了脸……童话里的故事果真都是骗人的……自己怎么能指望这种人呢？“凌娢你怎么了？”百蝶看着一直发呆的慕容凌娢，稍许有些担忧，“不会真的摔傻了吧！”“没……没事。”慕容凌娢紧张的摇了摇头，生怕百蝶看出什么端倪。“不过韩哲轩，你怎么会知道我的真名？”既然韩哲轩知道了自己的名字，也就是知道了自己一开始就说了谎，真的好尴尬啊！“像我这种开挂玩家，怎么能连这种东西都不知道呢。”韩哲轩居然没有再提起“白绫”这个化名，这让慕容凌娢很是欣慰。“是夏先生告诉你的吧！”慕容凌娢绝对不会相信这是可以猜到的东西。“如果你乐意这样想，我不介意。”(古风一言)那时，谁绣芙蓉鸳鸯戏。而今，谁惹青丝千里外。第016章原来不是青楼“是夏先生告诉你的吧！我的真名。”慕容凌娢绝对不会相信这是可以猜到的东西。“如果你乐意这样想，我不介意。”韩哲轩摊开双手，还是一副漫不经心的样子。“那看来是我想错了，你是怎么知道的？”“猜得。”“哦，原来是这样啊……”慕容凌娢表面上笑着说，心里却在告诫自己，冷静……一定要冷静，不能着急，不能生气……这算是答复吗？太敷衍了吧！不想告诉我就直说吗，真是烦人。韩哲轩最终也没有告诉慕容凌娢他是怎么知道她的真实姓名的，因为这个话题很快就被百蝶机智的转移了，她可不想看着两个人如此尴尬的僵持在大街上，毕竟这样太引人注意了。“凌娢，你不是觉得饿了吗？赶快走吧。”百蝶拉着慕容凌娢的胳膊便将她向前拖去，强行拉开了她和韩哲轩的距离。“就是，如果为了那种小事而饿死