果蝇饲养与性状观察 杂交

果蝇饲养与性状观察杂交第1页/共36页2注意安全有毒、危险品严格按操作规程使用与废弃，不得随意丢弃。易燃物品必须远离火源。严防触电，禁止湿手取拿电源开关。一旦发生事故，及时报告。实验房间严禁进食与饮水。进入实验室必须身着工作服。第2页/共36页实验课要求1实验室纪律安静、整洁、认真操作。爱惜仪器、物品，节约材料、药品。试剂的使用：及时盖上瓶塞，不要“张冠李戴”。倒出的溶液严禁回倒，滴管、玻棒不可混用。按规则使用仪器。值周安排实验结束后必须做好清洁。实验结束后请签到第3页/共36页3显微镜和解剖镜的使用防湿、防高温、防药品侵蚀。染液等溶液：不得污染镜头和镜台。不得在高倍镜下取放标本片。移动时小心、轻放，防止滑落损坏。用后关闭灯源，清洁，套上防尘罩。仪器、工具损坏或丢失：及时报告。违反操作规程所致不应有损失，按学校规定处理。第4页/共36页4课程评分规则实验报告实验目的实验原理实验用品实验步骤注意事项实验结果及观察讨论实验小结参考格式实验结果分析6次实验完成后装订成册，注明学号第5页/共36页实验一果蝇饲养与性状、生活史观察实验二果蝇杂交实验的设计——伴性遗传的验证实验三粗糙链孢霉四分子分析实验四蚕豆根尖细胞有丝分裂观察实验五果蝇唾腺染色体的标本制作

实验六减数分裂标本的制备与观察实验七人群PTC味觉基因频率的测定与分析第6页/共36页3.掌握遗传学实验常用的果蝇品系特征及常见的突变类型一目的要求1.了解果蝇的生活史，学会饲养果蝇的方法。2.掌握区别雌雄果蝇技能及处女蝇的选择方法。实验一果蝇饲养与性状、生活史观察黑腹果蝇Drosophilamelanogaster第7页/共36页1.果蝇作为实验材料的优点饲养容易生长迅速2n=8，少唾腺染色体制作容易，横纹清晰突变性状多，形态、行为等二实验原理重要的模式生物第8页/共36页2.果蝇的生活史（变态发育）最适温度20-25℃1-2day1day1day1day1day1.5-2day3.5-4dayWhitingtonLab完全变态昆虫生活史：4阶段第9页/共36页WhitingtonLabBP104:axonstaining22c10:sensoryneuronstaining3.模式生物第10页/共36页Embryodevelopment第11页/共36页WingthreatBoxingBehaviortestFightingExploring第12页/共36页1.果蝇培养基配制成分数量单位作用水玉米粉绵白糖琼脂条丙

酸酵母粉12012.39.30.90.8少量mlgggml溶

剂基本成分基本成分固化剂防腐剂菌

种以大组为单位配制，2人/小组，5瓶培养基/2人玉米粉培养基配方(10瓶)

三操作步骤2瓶今天用，3瓶下次实验用洗培养瓶，制棉塞（纱布和棉花），干燥第13页/共36页水分成两份，一份用于溶解琼脂和糖，另一份煮玉米粉，待两份分别溶解煮好后再混合煮沸。煮培养基加丙酸分装去火后再加入丙酸。将粘稠的培养基充分搅拌后分装培养瓶，厚度约1-1.5cm。撒酵母粉待培养基冷却后，用乙醇棉球擦瓶壁，除去积水，然后在培养基表面撒上一层酵母粉，即可接种果蝇。江南第14页/共36页2.乙醚麻醉果蝇果蝇如复苏，应进行第二次麻醉。罗雪瑞第15页/共36页乙醚麻醉果蝇麻醉:两支翅膀仍重叠在背上死亡:翅膀外展杂交的亲本:切不可选翅膀外展果蝇，不管外展程度如何张凝第16页/共36页3.

果蝇观察：雌雄鉴别特

征雌蝇雄蝇个

体大小腹片64腹背部条纹53腹部末端尖圆性

梳无有第17页/共36页雌腹片6节产卵管呈圆锥状凸出雄腹片4节交尾器为黑色圆形雌雄体消化道、生殖腺发育畸形第18页/共36页雄果蝇在第一对足跗节具有性梳第19页/共36页果蝇雌雄鉴别特

征雌蝇雄蝇个

体大小腹片64腹背部条纹53腹部末端尖圆性

梳无有第20页/共36页野生型体色灰眼色砖红，饱满，圆形刚毛平直，先端略弯长翅，长度约为腹部长度的两倍；圆卵型，静止时平放交叉重叠；翅膀有横隔脉第21页/共36页4.果蝇观察：突变性状的鉴别影响部位突变名称性状特征基因符号染色体翅形残翅翅退化，部分残留vgⅡ短翅翅短，与腹部等长mⅠ(X)匙翅翅小似勺nub2Ⅱ翘翅翅后翻cyⅡ眼白眼复眼白色wⅠ(X)棒眼复眼棒状BⅠ(X)体色黑檀体体色黑亮eⅢ

黑体体色黑，比e深bⅡ黄体体色浅橙黄色yⅠ(X)刚毛焦刚毛刚毛卷曲sn3Ⅰ(X)叉刚毛刚毛近中部分叉fⅠ(X)第22页/共36页果蝇突变体眼色眼睛形状背部颜色翅形状第23页/共36页果蝇突变体第24页/共36页突变型性状观察：4、5、6、7、18、22、25、e5.果蝇性状观察结果记录编号体色眼色翅长短翅形刚毛第25页/共36页6.果蝇生活史的观察尚雨桐郑超第26页/共36页

实验二果蝇杂交实验的设计——伴性遗传的验证2.正确认识伴性遗传与非伴性遗传的区别以及伴性基因在正反交中的差异。一目的要求1.进一步掌握伴性遗传的原理、规律和特点。果蝇性染色体为XY型。雌果蝇为XX同配性别；雄果蝇为XY异配性别。性染色体上的基因在遗传过程中，性状遗传总是和性别相联系，因此，把性染色体上的基因遗传叫伴性遗传。二实验原理第27页/共36页黑腹果蝇品系：选一对形状的①野生型②突变型三实验材料影响部位突变名称性状特征基因符号染色体翅形残翅翅退化，部分残留vgⅡ短翅翅短，与腹部等长mⅠ(X)匙翅翅小似勺nub2Ⅱ翘翅翅后翻cyⅡ眼白眼复眼白色wⅠ(X)棒眼复眼棒状BⅠ(X)体色黑檀体体色黑亮eⅢ

黑体体色黑，比e深bⅡ黄体体色浅橙黄色yⅠ(X)刚毛焦刚毛刚毛卷曲sn3Ⅰ(X)叉刚毛刚毛近中部分叉fⅠ(X)第28页/共36页果蝇接种方法②接种：用毛笔扫到平放的培养瓶内，避免沾在培养基上，果蝇醒后再将培养瓶直立。①麻醉果蝇：勿麻醉至死四操作步骤1.果蝇亲本的饲养江南③2瓶/小组杂交亲本培养野生型1瓶突变型1瓶第29页/共36页④贴上标签，做好标记⑤果蝇恢复后,20-25oC统一培养1.果蝇亲本的饲养第30页/共36页①成虫至新瓶培养2.选择杂交亲本：处女蝇与雄蝇雌果蝇：受精囊可保存交配所得的大量的精子。处女蝇：可保证杂交实验结果的可靠性。挑选原理：♀羽化开始10小时之内尚未成熟，无交配能力。挑选方法：除去全部成虫，收集10小时之内羽化的新果蝇。验证方法：处女蝇单独培养，3天后看是否产卵。具体步骤：②挑处女蝇野生型和突变型各5-10只③挑雄蝇野生型和突变型各5-10只杂交实验的早晨实验开始之前9-10小时保证足够量用于杂交唾腺染色体(2周)(3周)第31页/共36页3.果蝇正反交实验正交：野生型（♀）×突变型（♂）反交：突变型（♀）×野生型（♂）5-10对处女蝇与雄果蝇/杂交贴上标签，做好标记4.去亲本5.F1代性状观察20-25oC统一培养7-8天后，除去成虫，防止因亲本与F1代混杂而影响实验效果F1代羽化，计数并观察F1代性状2瓶/小组每隔2天统计一次，累积6-7天数据(3周)(4周)(5周)第32页/共36页6.F1代自交7.去F1代8.F2代性状观察7-8天后，除去成虫，防止因F1代与F2代混杂而影响实验效果F2代羽化，计数并观察F2代性状注意：验证伴性遗传挑选反交F1代5-10对转入新培养瓶杂交贴上标签，做好标记20-25oC统一培养挑选正交F1代5-10对转入新培养瓶杂交不需处女蝇每隔2天统计一次，累积6-7天数据(5周)(6周)(7周)第33页/共36页正交实验F1代果蝇数量统