细胞生物学试验

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细胞凝集反应：1.试验原理：细胞膜是双层脂嵌蛋白质结构，脂和蛋白质以能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被。凝集素是一类含糖的并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞各刺激细胞分裂的作用。凝集素可以通过使它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥〞的结果，参与能与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。2.为什么在等渗溶液中细胞也会发生破碎和溶血现象？

答：细胞膜可以允许一些溶质进入细胞内，水也可以透过膜进入细胞内，从而导致细胞内的渗透压大于细胞外的渗透压，细胞出现破碎。3.造成溶血时间不同的因素有哪些？

答：1.细胞膜对于溶质进入细胞的速率不同导致溶血速度不同。

2.也与分子本身的性质有关，分子越小，进入细胞速率越快，反之则慢，另外非极性分子比极性分子更简单进入细胞。4.细胞会出现破碎有哪些状况？

1.细胞在低渗或高渗溶液中会出现破碎，

2.细胞在等渗溶液中，由于细胞外的溶质可以进入细胞内，造成渗透压不平衡，导致细胞破碎。（可能不考）试验结果：编号溶液类型是否溶血溶血所需时间不结果分析1氯化钠+稀释羊血2氯化铵3醋酸铵4硝酸铵5草酸铵细胞膜对氯化钠的透过具有选择性，因此氯化钠溶液与红细胞是等渗溶液，浓度相当，不会发生破碎同1不带电荷的极性分子，体积大，跨膜运动比较困难体积大虽然能溶血但时间较长不6硫酸钠不7葡萄糖不8甘油9乙醇10丙酮1112

细胞器的活体染色：1名词解释：1.詹纳斯绿B：主要用于生物活体染色的一种碱性染料。能穿过细胞膜，进入细胞特异地显示线粒体是一种对线粒体专一的活体染料，有染色能

力的基团带正电，结合在负电性性的线粒体内膜上，内膜的细胞色素c氧化酶使染料保持氧化状态，浮现蓝绿色，

2中性红：细胞活体染色和酸碱性指示剂的一种碱性染料，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌，进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而浮现樱桃红色，在这种状况下，原生质和细胞壁一般不着色。

3.活体染色：对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒害的一种染色方法。

4.超活染色：即为体外活染，是用燃料溶液从活的动植物中分理处细胞或组织小块染料被选择固定在生活细胞上的某种结构上而显色。

叶绿体的分开和荧光观测：1名词解释1.差速离心：利用不同物质沉降速率的差异，在不同离心速度下分开和收集不同颗粒的离心技术。常用于分开细胞匀浆中的各种细胞器。

2.荧光：某些物质在—定短波长的光(如紫外光)的照射下吸收光能进入激发态，从激发态回到基态时，就能在极短的时间内放射出比照射光波长更长的光(如可见光)，这种光就称为荣光．

3.自发荧光：若中止供能荧光现象马上中止。有些生物体内的物质受激发光照射后直接发出荧光，称为自发荧光(或直接荧光)，如叶绿索的火红色荧光和水质素的黄色荧光等。

4.次生荧光：有的生物材料本身不发荧光，但它吸收荧光染料后同样也能发出荧光，这种荧光称为次生荧光(或间接荧光)，如叶绿体吸附吖啶橙后可发桔红色荧光。细胞骨架的微丝染色试验与显微观测：1.细胞骨架的分类（名词解释）：真核细胞中与保持细胞形态结构和细胞运动有关的纤维网络。包括微管、微丝和中间丝。

2该试验中用到的TritonX-100,M缓冲液，戊二醛-pb的作用是什么？试验最终为什么要用托马斯亮蓝R250？答：TritonX-100,表面活性剂也是一种非离子去垢剂，能够溶解质膜结构中及细胞内大量蛋白质，而细胞骨架中的蛋白质却不被破坏。M缓冲液可以稳定细胞骨架

戊二醛的作用是固定细胞不让细胞形状和细胞骨架发生变化。

托马斯亮蓝R250，普通的蛋白质染料，它可以使各种细胞骨架蛋白质着色，并非特异地显示微丝。

DNA的FENLGEN试验

试验原理：DNA经弱酸(1mol／LHCl)水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键开启，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应，形成紫红色的化合物，使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生，是由于反应产物的分子内含有醌基，醌基是一个发色团，所以具有颜色。对照组预先用热三氯醋酸或DNA酶处理，抽提去细胞中的DNA而得到阴性反应，从而证明白Feulgen反应的专一性。（一定要答上对照）

植物组织培养：目的：验证植物细胞的全能性

名词解释

1细胞全能性：指细胞经分裂和分化后仍具有形成完整有机体的潜能或特性

2.植物组织培养：借用无菌操作，培养植物的离体器官组织或细胞，使其在人工合成的培养基上，通过细胞的分裂，增值，分化，发育，最终长成植物完整再生植株的过程。为什么配置培养基要先配置母液？

1.配置培养基的量比较大，成分比较多。2.大多数成分可以长期保存。

MS培养基母液配置

类别成分母液体积扩大倍数配一升培养基的吸取量100大量硝酸钾1000元素硝酸铵7水硫酸镁2水氯化钙微量4水硫酸锰1000元素7水硫酸锌碘化钾铁盐7水硫酸铁1000有机甘氨酸物质肌醇烟酸琼脂糖类50010100101001001010306.5ABO