乳蛋白-EGCG和壳聚糖-绿原酸复合物的制备、结构表征及功能评价共3篇

乳蛋白-EGCG和壳聚糖—绿原酸复合物的制备、结构表征及功能评价共3篇乳蛋白-EGCG和壳聚糖—绿原酸复合物的制备、结构表征及功能评价1乳蛋白-EGCG和壳聚糖—绿原酸复合物的制备、结构表征及功能评价

自然界中存在着许多具有生物活性的化合物，其中EGCG和绿原酸是两种非常重要的多酚类化合物，具有抗氧化、抗癌、抗炎、抗菌等多种生物活性。然而，它们的生物利用率较低，不易被吸收，且易被摧毁，导致其在生物体内的作用受到限制。因此，将多种生物活性物质进行复合，可大大提高其生物利用率和稳定性，以便更好地发挥其作用。

本文中，我们描述了一种新型复合物，由乳蛋白和EGCG以及壳聚糖和绿原酸构成。复合物的制备采用简单的化学方法，使用络合反应使乳蛋白和EGCG以及壳聚糖和绿原酸形成复合物，然后经过离子凝胶层析技术分离纯化。最终的复合物为乳蛋白-EGCG和壳聚糖-绿原酸复合物。

通过红外光谱、紫外光谱和荧光光谱对复合物的结构进行了表征。结果显示复合物中存在大量的氢键、范德华力和离子键相互作用，表明复合物的结构较为稳定。荧光光谱结果表明乳蛋白和壳聚糖对EGCG和绿原酸的荧光强度有明显的增强作用。

接下来，我们对复合物的抗氧化能力、肝保护作用以及细胞增殖活性进行了实验评价。抗氧化能力实验结果表明，复合物的自由基清除能力明显高于单独使用乳蛋白、EGCG、壳聚糖或绿原酸的情况。肝保护实验结果表明，复合物可以显著改善四氯化碳诱导的小鼠肝损伤。细胞增殖活性实验结果表明，复合物可以促进肝癌细胞增殖，但对正常肝细胞的影响相对较小。

综上所述，本研究成功制备出一种新型的乳蛋白-EGCG和壳聚糖-绿原酸复合物。通过对复合物的结构表征及功能评价，表明该复合物具有较高的抗氧化能力和肝保护作用，但对正常细胞的影响相对较小。因此，该复合物有望成为一种具有良好应用潜力的生物活性物质综合实验结果表明，本研究成功制备出一种具有良好应用潜力的乳蛋白-EGCG和壳聚糖-绿原酸复合物。该复合物具有较高的抗氧化能力和肝保护作用，对正常细胞影响相对较小，加之制备方法简便，因此有望成为一种广泛应用的生物活性物质。未来可进一步优化复合物的结构及功能，探索更广泛的应用领域乳蛋白-EGCG和壳聚糖—绿原酸复合物的制备、结构表征及功能评价2乳蛋白-EGCG和壳聚糖—绿原酸复合物的制备、结构表征及功能评价

近年来，食品添加剂在食品加工中得到了广泛应用，而一些食品添加剂由于其化学特性或使用过量会对人体健康产生一定的风险，因此，开发一种环保健康、安全无害的食品添加剂变得尤为重要。本文讨论了一种食品添加剂——乳蛋白-EGCG和壳聚糖—绿原酸复合物的制备、结构表征及其功能评价。

1.制备方法

制备乳蛋白-EGCG复合物，首先在氧气保护下，将乳蛋白与EGCG在磷酸缓冲液溶液中共同孵育2小时，之后离心分离，洗涤重悬后即可得到复合物。

制备壳聚糖—绿原酸复合物的方法如下：将壳聚糖和绿原酸按3：1的比例加入醋酸溶液中，搅拌成均匀混合液后，在氧气保护下进行反应，反应4小时后加入磷酸盐缓冲液，经离心、洗涤重悬后即可得到复合物。

2.结构表征

红外光谱分析发现，乳蛋白-EGCG复合物中的乳蛋白含量大幅度增加，而EGCG的含量减少，且产生了新的酰胺键；壳聚糖—绿原酸复合物中，绿原酸的含量大幅度增加、而壳聚糖的含量减少，同时发现壳聚糖中的氨基与绿原酸中的羧基形成了新的氢键作用。

3.功能评价

乳蛋白-EGCG复合物和壳聚糖—绿原酸复合物的抗氧化活性分别采用DFR法和Folin—Ciocalteu法测定，结果表明复合物的抗氧化活性优于单一添加剂，并且两者的抗氧化活性均随着添加量的增加而增加。同时，两种复合物对人体有益的细胞保护功能也得到了验证，它们能够有效地减少氧化应激对人体细胞的损害。

综上所述，乳蛋白-EGCG和壳聚糖—绿原酸复合物具有很好的应用潜力，在食品加工中可以代替传统的化学合成添加剂，保护消费者的健康本研究通过制备乳蛋白-EGCG和壳聚糖—绿原酸复合物，成功提高了添加剂的抗氧化活性和细胞保护功能。复合物的结构以及功能评价均得到了验证，表明其具有很好的应用潜力，可以在食品加工中替代传统的化学合成添加剂，并保护消费者的健康。因此，本研究对食品加工行业的可持续发展具有重要意义乳蛋白-EGCG和壳聚糖—绿原酸复合物的制备、结构表征及功能评价3乳蛋白-EGCG和壳聚糖—绿原酸复合物的制备、结构表征及功能评价

摘要：

近年来，天然化合物和生物大分子制备复合物用于食品和药物等领域的应用备受关注。在本研究中，我们使用乳蛋白和绿茶多酚（EGCG）以及壳聚糖和绿原酸制备了两种复合物，并对其进行了结构表征和功能评价。结果表明，乳蛋白-EGCG和壳聚糖—绿原酸复合物的制备成功，复合物的颗粒大小稳定，表面电位也有变化，且可以改善体外糖化和氧化损伤的影响，具有潜在的生物活性和应用价值。

关键词：乳蛋白，EGCG，壳聚糖，绿原酸，复合物

1.简介

随着人们对健康意识的增强，对天然食品和保健品的需求也不断提高。同时，无论是在食品中还是在药物中，生物大分子和天然化合物的应用也越来越被重视。尽管这些天然物质具有广泛的应用前景，但在使用中却存在某些缺陷，如生物可利用性差、稳定性差、口感等问题。因此，制备复合物是解决这些问题的一种有效途径。

乳蛋白和壳聚糖是获得广泛应用的两种生物大分子，绿茶多酚和绿原酸是两种天然化合物，它们被广泛认为是具有生物活性的化合物。研究表明，乳蛋白和壳聚糖自身也具有许多生理功能，并且可以形成稳定的复合物。因此，本研究将乳蛋白和绿茶多酚以及壳聚糖和绿原酸结合起来，制备乳蛋白-EGCG和壳聚糖—绿原酸复合物，并对其结构和功能进行了评价。

2.实验方法

2.1材料的制备

乳蛋白、EGCG、壳聚糖和绿原酸全部是化学纯试剂，并由固相萃取法制备纯化。具体来说，用1.0MNaCl溶液分别溶解乳蛋白和EGCG，壳聚糖和绿原酸，以便用于制备复合物。清洁的琼脂糖柱用于纯化乳蛋白和EGCG。一些重要的实验条件总结于下表中:

|条件|描述|

|-----|--------------|

|pH值|7.0|

|温度|25°C|

|时间|3h|

|其他|无特殊要求|

2.2复合物的制备

乳蛋白和EGCG的复合物制备：

将乳蛋白和EGCG以1:1的比例在室温下缓慢地混合，同时搅拌。其中，EGCG的浓度为1.0mM，乳蛋白的含量为5.0mg/mL。混合约10分钟后，复合物的形成已经基本完成。复合物被离心并将残留物用PBS（pH7.0）清洗，以清除未组装的EGCG和乳蛋白。

壳聚糖和绿原酸的复合物制备：

将壳聚糖和绿原酸混合约10分钟并搅拌，其中绿原酸的浓度为0.5mM，壳聚糖的含量为5.0mg/mL。然后，将混合物通过过滤纸进行过滤，以去除未组装的壳聚糖和绿原酸。

2.3结构表征

FTIR分析：

采用Fourier变换红外光谱仪对复合物的结构进行表征。将样品加入KBr中制成片状，在4000-400cm-1范围内测量其光谱。

Zeta电位测量：

使用ZetasizerNanoZS针对复合物中的颗粒进行平均粒径和zeta电位（ζ）的评估。复合物样品在经过PBS清洗和离心后，将其重悬在水或PBS中，然后通过测量粒径和ζ值来确定复合物的分散状态。

2.4功能评价

糖化水平的分析：

使用方法：在37°C下，取0.2mL的BSA溶液（10mg/mL）加入0.2mL不同处理的脲氨酰丙酮，并用PBS（pH

7.0）进行补偿，在75°C下培养2h进行糖化反应。

用50%的硫酸比色法对糖基化水平进行检测。具体来说，每个样品分别分散在均一的碘离子加入下溶液（3.0%KI和5.0%HAC催化溶液），并在室温下处理5分钟。随后，添加0.5mL50%的硫酸，并在室温下将混合物煮沸20分钟。样品的吸光度在4