(5)-1.5第一章总论-分离方法-按照分配系数的不同

二、中草药有效成分的分离与精制(一)根据物质溶解度差别进行分离(二)根据物质分配系数差异进行分离(三)根据物质吸附能力差异进行分离(四)根据物质分子大小差异进行分离(五)根据物质解离程度差异进行分离(六）根据物质沸点不同进行分离（二）、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离1.分配比K

K=CU/CL

2.分离因子β

β=KA/KB

（KA

KB）

β1001次萃取，基本分离10β1001012次

β2100次以上

β1无法分离上层下层（二）、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离

——未知成分值的确定利用PC选择设计液－液萃取分离物质的最佳方案Rfa(1-Rfb)Rfb(1-Rfa)式中，Rfa

＞

Rfb一般β＞50，简单萃取即可解决问题；但β＜50时，宜采用分配柱色谱或其它方法β=固定相：水流动相：水饱和的有机溶剂极性？Rf值？P24×××ab

（二）、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离B.Ka

与pKa

表示酸碱性化合物酸碱性强弱,而pH值变化则可改变化合物的存在状态。A.游离型与解离型物质

因素KapKapH<3pH>12亲脂溶剂亲水溶剂酸性物质越大越小游离型解离型游离型化合物分配比大解离型化合物分配比大碱性物质越小越大解离型游离型

例：HA1、HA2、B，且酸性HA1?HA2PH≥12BA-

≤3BH+HA

分配系数K和分离因子分配比KK=CU/CL

分离因子ββ=KA/KB

（KA

KB）pH值与K

未知成分的小结（二）、根据物质在两相溶剂中的分配比不同1简单液液萃取法2纸色谱（PC，paperchromatography）3逆流分溶法（CCD，countercurrentdistribution）4

液液分配柱色谱5

液滴逆流色谱（DCCC，dropletcountercurrentchromatography）6高速逆流色谱(HSCCC，highspeedcountercurrentchromatography）

按操作方式不同1.简单液液萃取法β50

A．有机溶剂/水B．有机溶剂/酸、碱水

pH——物质存在状态——溶解性——KC．PH梯度萃取梯度调节PH，每次改变一种成分的存在状态，依次分离。缺点：手工操作繁琐、溶剂用量大、易乳化上层下层工作原理：多次、连续的液液萃取（二）、根据物质在两相溶剂中的分配比不同

——3

逆流分溶法（CCD）(β＜50)操作麻烦，易乳化（二）、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离

4液滴逆流色谱DCCC（dropletcountercurrentchromatography）

避免乳化（二）、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离

5高速逆流色谱HSCCC

（highspeedcountercurrentchromatography）行星式旋转产生的离心力场固定相保留在蛇形管内流动相单向、低速经过固定相（二）、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离

——5高速逆流色谱HSCCC

经典溶剂系统：正己烷-甲醇-水，正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，氯仿-甲醇-水，正丁醇-甲醇-水（二）、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离

——6

液－液分配柱色谱

固定相涂覆于硅胶等多孔载体上，装柱流动相通过色谱柱进行洗脱物质在两相溶剂中作逆流分布

——

分配比不同，被洗脱速度不同定义（二）、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离

——4

液－液分配柱色谱分配色谱法基本原理正相分配色谱反相分配色谱正相色谱极性物质吸附强非极性物质吸附弱后出先出反相色谱极性物质吸附弱非极性物质吸附强先出后出TLC

载体

固定相

流动相

适用范围

正相色谱

硅胶Si-OH

硅藻土、纤维素

水

缓冲液

弱极性溶剂

CHCl3,EtOAC,BuOH等

反相色谱

reversephase

chromatography

键合硅胶Si-OR

RP-2/RP-8/

RP-18

石蜡油

强极性溶剂

MeOH、CH3CN

MeOH-H2O、CH3CN-H2O

极性大的成分

BuOH部位

（1）正相色谱与反相色谱?（二）、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离

——6

液－液分配柱色谱

化学修饰RP-2RP-8RP-18亲油性表面亲水性表面三者亲脂性强弱顺序如下：RP-18RP-8RP-2。

分离中等极性、大极性成分弱极性成分（二）、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离

——6

液－液分配柱色谱

加压液相色谱种类：快速色谱Flashchromatography

2.02×105Pa

低压液相色谱LPLC,＜5.05×105Pa中压液相色谱MPLC,5.05～20.2×105Pa高压液相色谱HPLC,＞20.2×105Pa(Highperformanceliquidchromat