注射用丹参多酚酸盐

丹参SalviamiltiorrhizaBge.中华民族对丹参的认识和应用有着数千年的历史。丹参最早记载于《神农本草经》，被列为上品。丹参在历代的本草中多有收载。

古有“一味丹参,功同四物”(熟地、白芍、当归、川芎)之说。ThedriedrootofSalviamiltiorrhiza第一页，共51页。研发背景第二页，共51页。中药“国际化”的必然选择：明确并提纯有效成分！

对丹参有效成分的探索历程1930年：丹参酮1970年：原儿茶醛1980年：丹参素1990年：丹酚酸类脂溶性水溶性1992—2005年：丹参乙酸镁以丹参乙酸镁(MLB)为主要成分的丹参多酚酸盐是丹参中最重要的药用有效活性部位。

—中国科学院上海药物研究所2005年中国科学院上海药物研究所成功实现了丹参乙酸镁的分离纯化与工业化生产第三页，共51页。对丹参多酚酸盐天然植物药的思考？中药天然植物药第一个获得SFDA原料药批文的植物药制剂第一个以化药（H)标准衡量的植物药√第四页，共51页。天然植物药定义：人类在自然界发现并可直接供药用的植物中提出的单一有效成分、有效部位或植物的浸出物或提取物，在现代医药理论指导下，其适应症用现代医学术语表述。按先后产生的时间顺序，植物药经历三个层次：传统的膏、丹、丸、散以水醇法或醇水法为主提取，经粗处理技术与现代工业制剂技术相结合而制成的中成药运用现代分离技术和检测技术精制化和定量化的现代植物药第五页，共51页。丹参多酚酸盐

以往活血化瘀中药注射剂1234第六页，共51页。成分---至真至纯1第七页，共51页。第一个100%成分的分子结构明确的植物药明确的物质基础-丹参多酚酸盐主要成分丹参乙酸镁占80%、其它七种同系物占20%；而且这8种成分都有明确的化学结构式。丹参乙酸镁丹参素钾丹参乙酸二钾紫草酸二钾迷迭香酸钠紫草酸镁异丹参乙酸二钾丹酚酸G镁结构专利-8个有效成分第八页，共51页。第一个不添加任何辅料的植物药针剂100%为丹参天然提取物，不含任何外源性人工添加或结构修饰物质！(不含塑化剂、不含赋形剂、不含防腐剂！)同时冻干粉针剂型也增加了产品的稳定性。由此杜绝辅料的添加可能带来的安全隐患问题！OHOHHCOOHOHOOOHOHHCOOMOHOHHCOOM2M=Mg2+丹参乙酸镁有效成分是香丹注射液对18-1066倍不良反应是香丹注射液的1/50除尽鞣质、绿原酸，不添加任何赋形剂临床不良事件发生率万分之三没有过敏反应报道纯度：EGb761：30%，13%。先锋必：88%。注射用阿莫西林，８５％。注射用头孢哌酮钠８８％。化学结构：三分子3,4-二羟基苯基乳酸和一分子咖啡酸缩合而成的缩酚酸类低聚体化合物化学分子式：C36H30O16常以金属镁盐形式存在分子量：718.59

第九页，共51页。2、第一个采用三级指纹图谱进行质量控制的植物药运用指纹图谱技术对药材、原料药和制剂的质量进行全面控制。为临床用药的疗效和安全性提供了坚实的保障最终成型工艺路线如下：指纹图谱控制质量指纹图谱控制质量指纹图谱控制质量提取液丹参药材大孔树脂吸附乙醇洗脱液滤液浓缩液丹参多酚酸盐原料药丹参多酚酸盐粉针减压浓缩乙醇洗脱乙醇沉淀，离心过滤减压浓缩至干冷冻干燥丹参药材丹参多酚酸盐原料药丹参多酚酸盐粉针剂有效成分定量定性第十页，共51页。3、第一具有明确的药动学的创新天然植物药

丹参多酚酸盐的半衰期为１.38ｈ，用药7h后体内药量消除99%。对血小板聚集率和黏附率的降低作用，达峰时间分别在滴注末和停滴后3h，并呈现滞后效应。高蕊等，中国临床药理学与治疗学2004；9（11）：1209－1212第十一页，共51页。第一个经过严格的有效性和安全性评估的植物药建立LC-MS/MS方法，完成丹参乙酸镁及其同系物的药代动力学研究，明确药代参数明确丹参多酚酸盐的体内分布、代谢产物和代谢途径丹参多酚酸盐成分及其结构100%明确，故完成了以往天然药物（包括中药）难以涉足的多组分药物代谢动力学研究丹参多酚酸盐静脉滴注在Beagle犬的药代动力学研究Time,hConcentration,ng/ml丹参乙酸镁紫草酸镁迷迭香酸钠1.LiXCetalSimultaneousdeterminationofmagnesiumlithospermateB,rosmarinicacid,andlithospermicacidinbeagledogserumbyliquidchromatography/tandemmassspectrometryRapidCommun.MassSpectrom2004;18:2878-82第十二页，共51页。丹参乙酸镁在肝脏代谢过程和代谢物结构式丹参乙酸镁一甲基化物二甲基化物三甲基化物表观分布容积较大，心、脑、肾、肺、肝、脾等均有分布；消除半衰期约为1.38h，消除快，长期用药无蓄积，减少毒副反应发生机会；滴注过程中血药浓度维持较高水平，药代-药效（MK-MD）模型分析表明，本药的药效存在滞后环，即原型药从体内消除后，代谢产物仍具有活性，药物效应仍然能持续一段时间。主要在肝脏代谢，对肝药酶CYP3A4、CYP2D6、CYP1A2、CYP2C9具有抑制作用，6h内胆汁的总排泄率为86％，表明由胆汁至粪便排泄是主要的排泄方式，对肾脏几乎没有负担。第十三页，共51页。4、第一采用评价疗效的植物药注射剂（P=0.000）运动级别运动当量（MET）（P=0.000）治疗前治疗后（P=0.009）（P=0.016）试验后ST下降幅度

运动平板试验第十四页，共51页。5、第一个用“科学”的方法，而不是“哲学”的归纳，阐明其作用机理的植物药DiseaseregressionmodelMechanisticstudyProductdevelopmentTraditionalChineseMedicineHumanPatients(Chronicdiseases)AnimaldiseasemodelsLivercirrhosisViralcardiomyopathyDiabeticnephropathyTargetcellandmolecularstudyAffectedcellsModifiedmolecularpathwaysNovelproductsChemicalcompoundsMolecularproductsValidationofTCM活血/化瘀/通脉扩张血管（微小血管）抑制血小板聚集强力抗氧化促进血管新生钙通道阻滞第十五页，共51页。6、第一个经过严格的有效性和安全性评估的植物药1.物质基础评估[1]丹参多酚酸类化合物以盐的形式存在于生药材内，盐的活性优于酸丹参乙酸镁为主要成分的多酚酸盐是丹参中最重要的有效成分丹参乙酸镁和丹参乙酸抗血小板聚集的活性丹参乙酸镁和丹参乙酸对缺氧小鼠的影响（200mg/Kg，腹腔注射）丹参乙酸镁900(μg/ml)丹参乙酸900(μg/ml)丹参乙酸镁450(μg/ml)丹参乙酸450(μg/ml)抑制率(%)成活时间延长率（%）丹参乙酸镁丹参乙酸9468742278281.徐亚明等发明专利申请公开说明书国家知识产权局公开号CN1247855A第十六页，共51页。第一个经过严格的有效性和安全性评估的植物药2.制剂评估冻干粉针技术克服了多酚酸盐类化合物在水溶液中不稳定冷冻干燥没有采用任何架桥、赋型辅料，既保持了制剂块状疏松体特征，又排除了辅料的安全隐患无菌制剂丹参乙酸镁在水溶液中的稳定性0天4天第十七页，共51页。第一个经过严格的有效性和安全性评估的植物药3.临床前评估丹参多酚酸盐对狗冠状动脉结扎造成心肌梗塞模型，能使心肌缺血程度显著下降，心肌缺血范围缩小，减轻心肌缺血时的细胞损害，具有明显的抗心肌缺血作用。同时丹参多酚酸盐能对抗血小板聚集和抑制血栓形成。其特点是在治疗剂量范围内不影响心脏血液动力学功能。Sprague_Dawley大鼠局部刺激、血管刺激、过敏试验、溶血试验显示丹参多酚酸盐的安全剂量为80mg/Kg，对组织无刺激，无过敏反应和溶血作用第十八页，共51页。第一采用大规模循证医学验证其有效性和安全性的天然植物药第十九页，共51页。安全性得到权威认证国际医学科学组织委员会（CIOMS）对不良反应发生率的规定十分常见：≥10%常见：1%~10%，含1%偶见：0.1%~1%，含0.1%罕见：0.01%~0.1%，含0.01%十分罕见：<0.01%第二十页，共51页。创新天然植物药与传统中药注射剂的区别：第二十一页，共51页。

★由于历史原因，我国现行药品法规、技术要求和指导原则均将中药、天然药物概念合并使用。★例如，现行药品注册管理办法、药品标准以及监管机构设置等均合并使用中药、天然药物的概念，在管理方面使得天然药物分类长期融入中药范畴中，并无明确区分二者的界限或范围。现行药品归类方法中，将天然药物的一部分分归于中药，一部分归于化学药。天然植物药与中药现实情况关于征求《天然药物注册管理补充规定（征求意见稿）》及《天然药物研究技术要求（征求意见稿）》意见的通知食药监注函[2010]227号

2010年11月09日发布各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局（药品监督管理局）、总后勤部卫生部药品监督管理局：

为鼓励创新，国家食品药品监督管理局组织有关专家研究起草了《天然药物注册管理补充规定（征求意见稿）》及《天然药物研究技术要求（征求意见稿）》。为充分听取社会各界的意见和建议，现予上网公开征求意见。一、请国家食品药品监督管理局相关司局、直属单位和各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局及其他单位或人员形成书面意见后于2011年2月28日前反馈。二、意见反馈方式

（一）电子邮件：

（二）传真：（010）88331239

（三）邮寄：国家食品药品监督管理局药品注册司中药民族药处

地址：北京市西城区北礼士路甲38号，邮编：100810

附件：1.天然药物注册管理补充规定（征求意见稿）

2.天然药物研究技术要求（征求意见稿）

国家食品药品监督管理局药品注册司

二○一○年十一月九日第二十二页，共51页。从植物中分离有效单体的四个里程碑1806年从鸦片中分离出吗啡1828年从柳树皮中提炼出水杨酸1973年从青蒿中分离出青蒿素2005年从丹参中分离出丹参乙酸镁第二十三页，共51页。“注射用丹参多酚酸盐”研发与产业化历程

--争取到了国家科研领域所有能够得到的科研支持！国家科技部“863计划”项目国家科技部“国家级火炬计划”项目中国科学院“知识创新工程重大项目”国家科技部“十五”计划“创新药物和中药现代化”重大科技专项国家发改委“高技术产业化示范工程”国家科技部“重大新药创制专项”重点支持项目(2010年)199220112005第二十四页，共51页。“注射用丹参多酚酸盐”产品荣誉第二十五页，共51页。国家科技部十一五规划/新版医保

16位顶级专家共同推荐品种!第二十六页，共51页。第二十七页，共51页。总结注射用丹参多酚酸盐-----创新天然植物药第二十八页，共51页。焦点问题：硝酸酯类药物,利乎,害乎?近年欧美临床试验证实：硝酸酯类药物对再灌注心脏缺乏显著的保护作用,甚至有些研究表明长期使用硝酸酯类将加重心肌损伤一氧化氮(NO)是硝酸酯类药物扩血管作用的主要效应因子过氧亚硝酸阴离子(ONOO-)可能是NO损伤作用的主要原因在再灌注过程中,由于O2-生成增多以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的激活,从而引起ONOO-大量生成。硝酸酯类最好仅作为缓解症状的药物,尽可能避免维持使用。同时,如果在给予硝酸酯类的同时加用抗氧化剂，可能缓解硝酸酯类损伤,最大限度地发挥其作用。

杨新春范谦：首都医科大学附属北京朝阳医院心脏中心，《循环》

《中国医学论坛报第二十九页，共51页。什么药物，

抗心肌缺血的同时具有心肌保护作用？第三十页，共51页。焦点问题：无复流无复流现象(no-reflow)是指闭塞的心外膜冠状动脉再通后，心肌组织无灌注的现象。冠状动脉造影表现为血流明显减慢(血流<=TIMI2级)，而冠状动脉无残余狭窄、夹层、痉挛或血栓形成等机械性梗阻存在。

无复流产生的病理生理机制还不完全清楚，可能由多重机制共同造成。微血管结构完整性破坏微栓子栓塞白细胞聚集微血管功能完整性损伤，主要是痉挛所致血小板激活氧自由基第三十一页，共51页。焦点问题：阿司匹林抵抗，氯吡格雷抵抗出路如何?

大约有5-40%的病人对阿斯匹林或氯吡格雷无反应或反应低下。－PatronoCetal.Chest2001;119:39S-63S与没有抵抗患者相比较，存在抵抗患者预后较差。

－GumP,etal.JAmCollCardiol2003;41:961-965出路：增大给药剂量，获得更强的抗血小板作用－出血的发生率增加监测血小板聚集功能来指导抗血小板治疗－尚存不同观点寻找更多靶点的抗血小板药物第三十二页，共51页。2007.7中国科协与新闻媒体见面会

——中国医药报、人民网、中国药理学报……在此项研究中，他们利用激光多普勒技术建立了一种新的方法，可以在大鼠跳动的心脏上直接观察微循环血流，检测药物对心脏微循环的影响。实验结果证实，丹参多酚酸盐可以促进心脏的血液供应，改善心肌组织微循环，为该药用于临床治疗冠心病、心肌缺血提供了进一步的实验依据。

“因为一直处于运动状态中，在体心脏的微循环测定难度很大，我们的研究在方法学上也为同类研究提供了一种新思路。”1丹参多酚酸盐精准的药理作用第三十三页，共51页。丹参多酚酸盐30，60mg/kg,iv对大鼠心脏微循环灌注的影响第三十四页，共51页。丹酚酸B（丹参乙酸镁）

—目前已知最强的天然抗氧化物质丹酚酸B=1000VitE[1]=100EGb761[2]1.黄诒森，丹参中三种水溶性成份的体外抗氧化作用，药学学报，１９９２；２７（２）：９６－１００2.LiuCS，ComparisonofantioxidantactivitiesbetweensalvianolicacidBandGinkgobilobaextract(EGb761)，ActaPharmacolSin，2006；27(9)：1137–1145丹参多酚酸盐精准的药理作用2.强抗氧化作用，清除自由基第三十五页，共51页。丹参多酚酸盐精准的药理作用

丹参多酚酸盐对Cu2+诱导LDL氧化的TBARS生成和相对电泳迁移的影响（x±s,n=6）1.熊涛等丹参多酚酸盐抑制低密度脂蛋白氧化修饰中药药理与临床2004;20(4):7-102.吴兴军等丹酚酸Ｂ镁盐对自由基的清除作用和对脂质过氧化的抑制作用中国药理学报2000;21(9):855-83.黄诒森等丹参中三种水溶性成分的体外抗氧化作用药学学报1992;27(2):96-100LDL+CuSO4VitaminC1mg/L丹参多酚酸盐0.3mg/L丹参多酚酸盐1.0mg/L丹参多酚酸盐3.0mg/L与LDL+CuSO4组比较，*p<0.05**p<0.01***************TBARS生成数相对电泳迁移率第三十六页，共51页。

—丹参多酚酸盐抑制TXA2合成，但不影响PGI2合成，呈剂量依赖性。丹参多酚酸盐精准的药理作用3、不同于阿司匹林的抗血小板聚集作用第三十七页，共51页。徐标等，中华高血压杂志，2007；15（7）：554-556增加eNOS活性第三十八页，共51页。丹参多酚酸盐精准的药理作用

4、调控心肌L-钙通道钙通道是许多缺血性心脏疾病治疗药物的重要作用靶点丹参乙酸镁具有电压依赖性调控心肌L-钙通道的作用PAADHPDTZ钙通道分子结构模式图IC50=30mMIC50=393mMMLB对HP-50和-100mV时的IC50值分别为30M和393M不同电压下，MLB均表现可逆的抑制钙通道的作用A－C）MLB使用依赖性抑制钙通道D－E）MLB表现减慢钙通道快失活，加速慢失活的作用特点V0.5,Con=-16mVV0.5,MLB=-22mVV0.5,Con=-31mVV0.5,MLB=-40mVA）MLB对钙通道激活动力学的影响B）MLB对钙通道失活动力学的影响C）MLB对钙通道失活恢复动力学的影响第三十九页，共51页。丹参多酚酸盐精准的药理作用5、促进血管新生丹参多酚酸盐可促使新生血管生成，有助于侧枝循环的建立[1]注：与生理盐水对照组比较*p<0.05注：与生理盐水对照组比较*p<0.05,p<0.01丹参多酚酸盐对THP-1细胞诱导的内皮细胞迁移的影响（x±s）丹参多酚酸盐对THP-1细胞分泌

VEGF、bFGF的影响（x±s,ng/L）第四十页，共51页。静脉应用丹参多酚酸盐能够促进梗死心脏心功能改善和促进血管再生，能促进侧支血管的生成。

心肌梗死模型成功后，自当天开始，高剂量组、低剂量组和对照组经静脉途径应用丹参多酚酸盐，均为1次/天，疗程为7天。高剂量组（n=7）：5%GS250ml＋400mg丹参多酚酸盐；低剂量组（n=7）：5%GS250ml＋200mg丹参多酚酸盐；对照组（n=7）：5%GS250ml。王连生、曹克将等，待发表，江苏省人民医院第四十一页，共51页。丹参多酚酸盐治疗组的毛细血管密度、功能血管密度明显大于对照组表3实验组梗死周边区血管计数比较表（均值±标准差）（/mm2）**P<0.01；*P<0.05，对照组比较；＃＃P<0.001，功能血管密度比较；＄P<0.001，与低剂量组比较；

表4实验组梗死区血管计数比较表（均值±标准差）（/mm2）注：*P<0.05，对照组比较；﹫P<0.05，与低剂量组比较；＃＃P<0.001，功能血管密度比较；＄P<0.001，与低剂量组比较；毛细血管（Ⅷ因子阳性），功能血管（SMA阳性）第四十二页，共51页。

ABC图1A~C分别表示高剂量治疗组、低剂量治疗组和对照组的冠状动脉造影结果造影结果显示，梗死区有不同程度的侧枝循环出现