(41)-10.1.2常用微量元素的检测

微量元素与维生检验第二节常用微量元素的检测一、样品的采集、保存和预处理影响准确测定微量元素的关键因素之一是污染，严格的防污染措施必须从抽血开始，贯彻包括预处理直到分析过程的始终。常用微量元素检测样本样本采集保存影响因素评价血液样品通常为清晨空腹静脉血或毛细血管血立即检测，4℃冷藏或-20℃和-80℃可保存更长时间。溶血等影响测定。常用尿液样品根据需要可采集24h尿、晨尿、1h尿等放吸附性能差、能密闭的塑料容器中，2℃～8℃保存或加入苯甲酸。尿液标本影响因素较多，且浓度偏低。较少用毛发和指甲取材方便样本处理的过程对结果影响较大。较局限唾液样品采样应在早晨空腹时进行。受个体、年龄、性别、季节和精神等因素影响少用样本的采集与保存（1）稀释法（2）高温灰化法（3）低温灰化法（4）高压消化法（5）常压消化法（6）燃烧法、水解法及微波消解法等

样本的预处理二、微量元素的检测方法（1）紫外－可见分光光度法（2）原子吸收光谱法(AAS)（3）电感耦合等离子体发射光谱法（4）中子活化分析法原理：紫外可见吸收光谱法又称紫外可见分光光度法。它是基于待测元素与某些试剂在一定条件下形成化合物，该化合物对紫外、可见光具有选择性地吸收而进行定量分析的一种吸收光谱法。方法学评价：该法操作简便，也是临床微量元素检测中常用的方法。紫外可见分光光度法原理：原子吸收光谱法又称原子吸收分光光度法，根据样品中待测元素原子化的方法不同，分为火焰原子吸收光谱法、化学原子吸收光谱法和石墨炉原子吸收光谱法。它是基于待测元素，从光源发射的特征辐射，被蒸气中待测元素的基态原子吸收，然后根据待测元素浓度与吸收辐射的原子数成正比的关系，求得样品中被测元素的含量。方法学评价：原子吸收光谱法简便、灵敏、准确，是临床微量元素检测中最常用的方法。原子吸收光谱法原理：电感耦合等离子体发射光谱法是利用电感耦合等离子作为激发能源．使处于基态的待测元素原子从外界能源获得能量，跃到激发态，激发态原子将多余能量以光的形式释放出来返回基态，从而产生特征光谱而进行定量分析的一种方法。方法学评价：该法灵敏、准确、快速、干扰小，而且可多种元素同时测定，是临床微量元素检测的常用方法，仪器价格昂贵。此外，离子选择电极法、伏安法、荧光分析法等，都是临床微量元素检测中常用的方法。电感耦合等离子体发射光谱法原理：中子活化分析法是放射化学分析法之一，它是利用热中子辐射，使待测元素原子发生核反应，产生放射性同位素，检测其放射性强度而进行定量分析的方法，是进行元素含量分析的一种最灵敏的方法。方法学评价：该方法标本用量小、干扰小，可以同一样品中的多种元素进行测定，但因中子源放射性强、成本高，不易推广使用。中子活化分析法（一）血清铁和总铁结合力测定血清铁血清总铁结合力：总铁结合力是指血清中运铁蛋白能与铁结合的总量。铁饱和度=×100%发色剂：亚铁嗪、双联吡啶等测定原理Fe3+Fe2+强还原剂有色络合物发色剂血清铁和总铁结合力常用的方法是亚铁嗪比色法。原理：血清中的铁与运铁蛋白结合成复合物，在酸性介质中铁从复合物中解离出来，被还原剂还原成二价铁，再与亚铁嗪直接作用生成紫红色复合物，与同样处理的铁标准液比较，即可求得血清铁含量。测定注意事项：①标本不能溶血，标本应及时分离血清；②所有试管等都应避免铁污染。方法学评价分光光度法：首选方法，可自动化分析，也可手工操作。AAS法：仪器设备复杂、费用昂贵，可靠性较差（二）锌测定方法：吡啶偶氮酚比色法原理血清中的高价铁及铜离子被维生素