微生物的培养和利用

微生物的培养和利用第1页/共56页编号①②③④⑤成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量0.4g4.0g0.5g0.5g100mL第2页/共56页编号①②③④⑤成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量0.4g4.0g0.5g0.5g100mL第3页/共56页第4页/共56页第5页/共56页第6页/共56页第7页/共56页第8页/共56页第9页/共56页第10页/共56页解析A第11页/共56页解析无菌水泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到但菌落鉴别乳酸菌中和生产的乳酸（或酸）具有透明圈甘油第12页/共56页返回第13页/共56页培养基中加入高浓度食盐时可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可将该菌分离出来在培养基中加入青霉素时可抑制细菌、放线菌的生长，从而分离得到酵母菌和霉菌举例依据某些微生物对某些物质的抗性，在培养基中加入某些物质，以“抑制”不需要的微生物，“促进”所需要的微生物生长原理第14页/共56页可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存在高温环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存在高盐环境中第15页/共56页干热灭菌和湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）用牛皮纸（报纸）包扎器皿抑制细菌（放线菌）的生长第16页/共56页解析接种环温度过高，菌种被杀死第17页/共56页返回第18页/共56页培养基及容器高压蒸汽灭菌法玻璃器皿、金属用具干热灭菌法接种工具灼烧灭菌法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子强烈的理化因素灭菌用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源化学药剂消毒法不耐高温的液体巴氏消毒法日常用品煮沸消毒法仅杀死物体表面或内部的部分微生物较为温和的物理或化学方法消毒应用范围常用方法结果条件第19页/共56页检测培养基平板灭菌是否合格3.8×107第20页/共56页解析灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落B溶解氧营养物质第21页/共56页返回第22页/共56页第23页/共56页第24页/共56页第25页/共56页第26页/共56页第27页/共56页第28页/共56页则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物生存培养基中若缺乏有机碳源可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存培养基中缺乏氮源时可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物当石油是唯一碳源时第29页/共56页操作复杂，需要涂布多个平板不能对微生物计数缺点既可以获得单细胞菌落，又能对微生物计数可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落优点适用于厌氧菌和兼性厌氧菌适用于好氧菌适用范围从适宜的稀释度的平板上的菌落中挑取菌体在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体菌体获取稀释度要足够高，为确保实验成功可以增加稀释度的范围每次划线前后均需灼烧接种环注意事项①一系列的梯度稀释②涂布平板法操作接种环在固体平板培养基表面连续划线关键操作稀释涂布平板法平板划线法比较项目第30页/共56页第31页/共56页解析尿素酚红红稀释涂布平板法

1.75

少UGA

115第32页/共56页第33页/共56页返回第34页/共56页不能区分死菌与活菌缺点用计数板计数方法利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量原理第35页/共56页设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数操作每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数计算公式当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌原理第36页/共56页纤维二糖葡萄糖红透明圈第37页/共56页酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲＋＋＋＋－＋＋培养基乙＋＋＋－＋＋＋解析不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌第38页/共56页返回第39页/共56页利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现特有的特征，然后筛选目的微生物鉴定培养法利用选择培养基对微生物进行选择培养，直接获得目的微生物选择培养法利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表面，直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物单菌落挑取法第40页/共56页如利用刚果红染色法，根据培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈来筛选分解纤维素的微生物染色鉴别法如培养基中加入酚红指示剂，培养某种微生物后，培养基变红说明该种微生物能够分解尿素指示剂鉴别法根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别菌落特征鉴别法第41页/共56页苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）萃取法油脂第42页/共56页解析血细胞计数板稀释涂布平板

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第43页/共56页返回第44页/共56页培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积影响分离效果

第45页/共56页避免培养基污染棉塞

量与活性第46页/共56页解析

J4

发酵过程会产生热和产酸，J4

菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高第47页/共56页第48页/共56页返回第49页/共56页第50页/共56页解析氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖接种环接种环灼烧后为冷却划线未从第一区域末端开始目的菌株能分泌讲解苯磺隆的蛋白质不合理，缺少空白对照第51页/共56页返回第52页/共56页