免疫细胞治疗

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科学家重新探索，我们是否可以从肿瘤的发生、发展的根源寻找到治疗肿瘤的新方法？2020/11/42免疫细胞治疗细胞治疗的技术特点示意图2020/11/43免疫细胞治疗

免疫细胞治疗

2020/11/44免疫细胞治疗细胞免疫理论的建立肿瘤免疫理论的提出免疫监视学说的提出

肿瘤免疫的概念起源于上世纪初。1909年Ehrlich首先提出，免疫系统不仅负责防御微生物侵犯，而且能从机体内清除改变了的宿主成分。并提出了细胞免疫直接对抗肿瘤的概念，此后人们认识到癌细胞是改变了的宿主成分。

六十年代经Thomas、Burnet和Good等人将该观点系统化，提出了免疫监视学说。

免疫监视学说的中心思想是：免疫系统具有一个十分完备的监视功能，能准确地分辨“自己”和“非己”的成分；它不仅能清除外界侵入的各种微生物，排斥同种异体移植物，而且还能消灭机体内突变的细胞，防止肿瘤的生长，保护机体的健康。

每当免疫监视功能由于这种或那种原因被消弱时，便为肿瘤的发生提供了有利条件；如果机体不具备免疫监视功能，人类的肿瘤发病率会大大的提高。2020/11/45免疫细胞治疗免疫细胞治疗肿瘤体细胞免疫治疗技术

向肿瘤患者输入具有抗肿瘤活性的免疫细胞，直接杀伤肿瘤细胞或激发机体抗肿瘤免疫反应，从而达到治疗肿瘤的目的，这一过程称为体细胞免疫治疗。

大量研究表明，肿瘤患者的外周血中存在癌细胞，是引发肿瘤复发转移、导致患者死亡的重要原因之一。有效清除血循环中的癌细胞，对预防肿瘤复发、改善肿瘤晚期患者的生存质量具有重要的作用。自体体细胞医疗技术的概念

自体体细胞治疗技术是应用病人自体的体细胞通过体外培养获得免疫活性细胞作为治疗手段的医疗技术2020/11/46免疫细胞治疗免疫细胞治疗主要技术细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-inducedkillercell,CIK）1.1991年发现的，以共同表达CD3和CD56为特征；2.增值速度快。经过2－3周左右的体外培养，细胞数量可增加400倍以上，占总细胞的比例可达40%以上。3.杀瘤活性高：杀伤单位（TLU）为LAK细胞的73倍以上。4.杀瘤谱广：CIK细胞虽然以CD3、CD56细胞为主要效应细胞，却没有T淋巴细胞杀伤时的MHC限制性。5.体外培养依赖CD3单抗和IFN-γ。CD3单抗可作为丝裂原活性单位与T细胞表面的CD3交联，诱导其活化，而IFN-γ则诱导IL-1等细胞因子的合成。树突状细胞(dendriticcell，DC)是最有效的抗原递呈细胞。DC的目标在于诱导肿瘤特异性和长期持久的免疫反应，这种效应有助于防止微小残留病灶和肿瘤复发。LAK/TIL/CD3AK/CTL：自上世纪80年代以来先后应用于临床的自体免疫细胞，但由于存在着扩增倍速较低、细胞来源困难、细胞毒力不高等诸多问题，该疗法在临床应用上受到一定限制。经基因改变的自体T细胞：自体T细胞体外经慢病毒转染表达识别CD19的嵌合受体，该受体识别表达CD19的CLL肿瘤细胞后杀伤肿瘤细胞，这一基因改变的细胞在回输后在体内增值1000倍以上。2020/11/47免疫细胞治疗免疫细胞治疗的适用范围Page8Page8优势可以调节和增强全身免疫机能；可有效的杀伤残余的肿瘤细胞，防止肿瘤复发、转移；缓解晚期患者的临床症状，延长生存期，创造更多的治疗机会，甚至实现长期带瘤生存；减轻放、化疗的毒副反应，提高患者生存质量；它特异性极强、无免疫排斥反应，相对于其他三种治疗模式副作用小。适应症

减少恶性肿瘤传统治疗后的复发与转移；提高肿瘤综合治疗疗效；少数肿瘤及患者的主要治疗手段（对放化疗不敏感或者无法耐受的情况以及对免疫原性较强的的肿瘤）。禁忌症

孕妇；患者不能进行淋巴细胞分离术或者少量多次抽血者；器官功能衰竭者；有器官移植史的患者；不可控制的感染性疾病，如HIV阳性；有其它免疫缺陷疾病，在4周内使用过大量免疫抑制剂的患者；对本治疗中所用生物试剂过敏者；T淋巴细胞瘤患者。2020/11/48免疫细胞治疗治疗的基本流程疗效观察单个核细胞采集细胞分离、扩增细胞鉴定及无菌检测细胞回输2020/11/49免疫细胞治疗可以重点开展的免疫细胞治疗项目

1.NK：自然杀伤细胞治疗2.CIK:细胞因子诱导的杀伤细胞治疗3.CIK+DC:CIK细胞+树突细胞治疗4.TIL:肿瘤浸润性淋巴细胞(来自于肿瘤组织、胸水、腹水和转移淋巴结）治疗5.TIL+DC-肿瘤组织

6.DC-肿瘤组织+T细胞治疗4. 7.AAIC:抗原活化的树突状细胞治疗

8.EAAL

:治疗肿瘤和慢性传染性病毒感染………..2020/11/410CIK细胞免疫治疗50ml外周血单个核细胞INF-γ、IL-2、CD3诱导细胞培养达1×109以上质控检测细胞回输，6个疗程或结合放化疗制定方案免疫细胞治疗2020/11/411免疫细胞治疗免疫细胞治疗CIK细胞制备培养

用血分机获得80ML浓缩血2000g×20min，20℃

175cm2培养瓶CIK培养液（含IFN-γ）第2天加混合细胞因子PMNC层CIK培养隔2-3天补液扩瓶培养瓶内细胞收集、离心、洗涤回输第7天扩瓶后抽样送检（细菌培养和表型分析）第3天扩瓶培养留血浆50ML备用分离出富含白细胞的部分淋巴细胞分离液2020/11/412免疫细胞治疗DC-CIK细胞免疫治疗80-100ml外周血单个核细胞成熟DC与自体CIK混合培养，不加抗原细胞培养达1×109以上质控检测细胞回输，6个疗程或结合放化疗制定方案NK细胞,T细胞2020/11/413免疫细胞治疗树突状细胞制备流程第7-8天，DC细胞收集、离心、洗涤和回输第5天加肿瘤抗原，第6天加促熟剂，抽样送检第3天补充含半量细胞因子的培养基6孔板1640培养液2000g×20min，20℃

留血浆50ML备用分离出富含白细胞的部分淋巴细胞分离液PMNC层用血分机获得80ML浓缩血细胞贴壁120min贴壁细胞进行DC细胞培养方案悬浮细胞进行CIK培养方案2020/11/414免疫细胞治疗肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）治疗肿瘤组织、肿瘤浸润的淋巴结、癌性胸水/腹水体外获取特异性淋巴细胞细胞培养达1×109以上质控检测细胞回输，6个疗程或结合放化疗制定方案2020/11/415免疫细胞治疗经修饰的自体T淋巴细胞(DC+T)免疫治疗80-100ml外周血单个核细胞肿瘤相关抗原诱导DC细胞培养达1×109以上质控检测细胞回输，6个疗程或或结合放化疗制定方案DC刺激自体T淋巴细胞增殖，CD3诱导Tcells2020/11/416免疫细胞治疗免疫细胞治疗部分仪器设备，实验室照片等2020/11/417生活质量改善免疫功能检测客观疗效评估不良反应细胞免疫治疗的临床观察指标免疫细胞治疗近期疗效：1.靶病灶大小的变化：按照RECIST1.1版评定肿瘤近期疗效，即以治疗前后影像学检查为依据进行评价，分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、病灶稳定(SD)和进展(PD)2.疾病控制率（DCR）：CR+PR+SD反应率（RR）：CR+PR远期疗效：无病生存时间（DFS）

无进展生存时间（PFS）

总生存（OS）2020/11/418免疫细胞治疗国外临床应用报告（以CIK治疗为例）

德国波恩大学权威专家施密特教授于2011年2月在国际肿瘤专业顶级杂志《JCancerResClin

Oncol》发布发布了关于CIK临床应用的最新总结报告，文章题目和摘要如下：

HontschaC,BorckY,ZhouH,MessmerD,Schmidt-WolfIG.ClinicaltrialsonCIKcells:firstreportoftheinternationalregistryonCIKcells(IRCC).JCancerResClin

Oncol.2011;137(2):305-10.

在867例临床比对研究中，426例各肿实体瘤的各个不同阶段的病人接受了CIK治疗，各例病人输入的CIK细胞数2.19

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108~5.2

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1010范围，在可观察统计的381例中结果为：24例完全缓解（CR）；27例部分缓解（PR）；40例好转（MR）；161例稳定（SD）；129例进展（PD）。但病人生存质量有显著提高，而且CIK治疗副作用轻微。其中还发现肝炎病毒负荷减轻。2020/11/419免疫细胞治疗国内临床应用报告（以CIK治疗为例）

据报道CIK治疗256例中晚期各种实体瘤，无CR