医学微生物学教学课件：第13、14章

第13章分枝杆菌属教学目的与要求（一）分枝杆菌属共性和种类。（二）掌握结核分枝杆菌的形态染色、致病物质、免疫特点、结核菌素试验与防治原则。

（三）麻风分枝的形态、染色和致病性。细长略弯曲的杆菌,有分枝生长的趋势细胞壁含有大量的脂质抗酸染色（+）致病性与菌体成分有关，引起的疾病都呈慢性，并伴有肉芽肿分枝杆菌共同特点分枝杆菌的分类

分类生长特性主要对人致病的分枝杆菌结核分枝杆菌生长缓慢结核分枝杆菌、牛分枝杆菌非结核分枝杆菌Ⅰ组生长缓慢、光产色堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌Ⅱ组生长缓慢、暗产色瘰疠分枝杆菌Ⅲ组生长缓慢、不产色鸟-胞内分枝杆菌Ⅳ组生长快速、偶发分枝杆菌麻风分枝杆菌人工培养基上不生长第一节结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis)第二节麻风分枝杆菌(Mycobacteriumleprae)

一、生物学性状

二、致病性

三、免疫性

四、微生物学检查法

五、防治原则主线患者夏某，男，61岁，于5个月前开始无明显诱因阵发性咳嗽，咳大量黄白色黏痰，无咯血及痰中带血，无心慌及心前区疼痛，无头痛、头晕，但乏力盗汗，伴胸闷与活动后喘憋，饮食欠佳。近1个月上述症状有所加重，伴发热，且午后明显，体温于38℃左右波动，发病后体重较前减轻3kg。查体：体温37.5℃，双肺呼吸音粗，右上肺可闻及湿性罗音。实验室检查：血白细胞8.5×109/L，其中分叶核58%，淋巴细胞31%，单核5%，血沉为65mm/h。胸部CT显示：右肺上叶可见大片状、斑片状阴影，内有空洞，左肺可见多发斑片状阴影。取咯痰行抗酸染色，镜下可见红色细长弯曲的杆菌。思考：引起本病可能的病原体是什么？还需做什么微生物学检测以确诊？该菌是如何传播的？如何进行特异性预防？

结核病的病原菌1882年德国细菌学家Koch证明全球性卫生问题是艾滋病高发区人群的首要死因世界防治结核病日3月24日Mycobacteriumtuberculosis1993年WHO宣布结核病紧急状态，这在WHO历史上尚属首次。

一般情况每秒钟，一个人新感染结核杆菌。世界上三分之一的人目前已感染结核杆菌

我国居第二位。结核病是传染性疾病中第一号杀手。Mycobacteriumtuberculosis形态与染色细长略弯，有时呈分枝状；荚膜，无芽胞、鞭毛抗酸染色阳性一、生物学性状Mycobacteriumtuberculosis★培养特性专性需氧生长缓慢营养要求高（罗氏培养基）不发酵糖类一、生物学性状Mycobacteriumtuberculosis★耐干燥：黏附在尘埃上保持传染性8－10d，在干燥的痰液中可存活6－8个月。耐酸碱：3％盐酸、6％硫酸、4％氢氧化钠作用30min不受影响耐一般消毒剂：对1:13000的孔雀绿有抵抗力

三耐抵抗力一、生物学性状Mycobacteriumtuberculosis★怕湿热：液体中62－63℃15分钟或煮沸

怕紫外线：直接日光照射数小时即被杀灭怕酒精、石炭酸、来苏儿怕抗痨药四怕Mycobacteriumtuberculosis抵抗力一、生物学性状★毒力变异：

牛型结核杆菌经13年230代培养，制成卡介苗（减毒活菌苗），广泛用于预防接种。L型变异：

结核杆菌经青霉素、环丝氨酸、溶菌酶、异烟肼作用变成L型结核菌。耐药性变异：

MDR-TBMycobacteriumtuberculosis变异性一、生物学性状★致病因素无内毒素、无外毒素、无侵袭性酶脂质：索状因子

磷脂蜡质D

硫酸脑苷脂蛋白质多糖二、致病性与免疫性Mycobacteriumtuberculosis★

索状因子(cordfactor):分枝菌酸与海藻糖结合的糖脂。使结核分枝杆菌在液体培养基相互黏连平行排列呈索状，破坏线粒体膜，影响细胞呼吸，抑制白细胞游走和引起慢性肉芽肿。Mycobacteriumtuberculosis二、致病性与免疫性磷脂：促进单核细胞增生，抑制蛋白酶的分解，引起结核结节、干酪样坏死蜡质D：是一种肽糖脂与分枝菌酸的复合物，佐剂，激发机体产生迟发性变态反应硫酸脑苷脂：抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶

体的融合Mycobacteriumtuberculosis二、致病性与免疫性结核菌素(tuberculin):诱发机体产生抗体，但无保护作用，与蜡质D一起注入体内引起变态反应。分枝杆菌生长素（mycobictin）：

将环境中的铁转运到菌体内与宿主机体竞争铁。Mycobacteriumtuberculosis二、致病性与免疫性所致疾病肺部感染：原发感染继发感染肺外感染：脑、肾、骨、关节、生殖器官等

全身播散性结核

消化道结核

皮肤结核二、致病性与免疫性Mycobacteriumtuberculosis

1.原发感染

多见于儿童。随飞沫和尘埃通过呼吸道进入肺泡。胞内寄生,结核结节、干酪性坏死、空洞。

原发灶内结核杆菌可经淋巴管扩散到肺门淋巴结。90%随着机体免疫力的建立，原发灶大多可纤维化和钙化而自愈（常有潜伏、L型）。

极少数免疫力低下者经淋巴、血流扩散至全身，导致全身粟粒性结核或结核性脑膜炎。Mycobacteriumtuberculosis二、致病性与免疫性

多见于成年人。大多为内源性感染，极少由外源性感染所致。

由于机体已形成对结核分枝杆菌的特异性细胞免疫，对再次侵入的结核分枝杆菌有较强的局限能力，故继发感染的特点是病灶局限，一般不累及邻近的淋巴结，主要表现为慢性肉芽肿性炎症，形成结核结节，发生纤维化或干酪样坏死。病变常发生在肺尖部位。

2.继发感染二、致病性与免疫性Mycobacteriumtuberculosis肺外感染

免疫力低下患者常见于脑、肾、骨、关节、生殖系统少数形成全身粟粒性结核或播散性结核二、致病性与免疫性Mycobacteriumtuberculosis结核杆菌豚鼠皮下注射再次10－14d局部溃烂不愈，附近淋巴结肿大，细菌扩散至全身结核杆菌皮下注射豚鼠局部迅速产生浅溃烂，易愈合。免疫和变态反应Mycobacteriumtuberculosis二、致病性与免疫性结核菌素蛋白蜡质D机体（巨噬细胞移动抑制因子被激活）注入产生变态反应不产生免疫结核杆菌rRNA注入机体（结核杆菌生长抑制因子被激活）产生免疫不产生变态反应完整结核杆菌注入激活以上两种细胞因子产生免疫产生变态反应Mycobacteriumtuberculosis二、致病性与免疫性细胞免疫：属传染免疫（infectionimmunity），又叫带菌免疫，即只有结核杆菌在体内才会有免疫力，一旦体内结核菌被杀灭，免疫也随之消失。

致敏T淋巴细胞：杀死有结核杆菌的靶细胞，同时释放多种淋巴因子，吸引NK、T、Mφ等聚集炎症部位，增强这类细胞的直接或间接杀菌活性。Mφ：吞噬消化、抑制繁殖、阻止扩散甚至彻底消灭。以细胞免疫为主Mycobacteriumtuberculosis二、致病性与免疫性★超敏反应结核分枝杆菌的蛋白质与蜡质D共同刺激T淋巴细胞，形成迟发型超敏反应状态。体内致敏的T淋巴细胞再次遇到结核分枝杆菌时，即释放出淋巴因子，引起强烈的迟发型超敏反应，形成以单核细胞浸润为主的炎症反应，容易发生干酷样坏死，甚至液化形成空洞。

Mycobacteriumtuberculosis二、致病性与免疫性★是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核杆菌是否能引起变态反应的一种试验。结核菌素实验Mycobacteriumtuberculosis★旧结核菌素（oldtuberculin，OT）：主要成分是通过将结核菌接种于甘油肉汤培养基中，培养4-8周加热浓缩过滤而成。纯蛋白衍化物（purifiedproteinderivative，PPD）:

OT纯三氯醋酸过滤而成。试剂Mycobacteriumtuberculosis常规试验：OT或PPD

5单位皮内注射前臂内侧硬结直径48－72h方法Mycobacteriumtuberculosis阳性：0.5-1.5cm：感染过结核杆菌，或BCG接种成功。强阳性：＞1.5cm：可能有活动性结核病。阴性：＜0.5cm：未感染过结核；感染初期；老年人；严重结核患者或正患有其他传染病；获得性细胞免疫低下者意义Mycobacteriumtuberculosis★选择卡介苗接种效果或免疫效果的测定。婴幼儿结核病诊断的参考。测定肿瘤患者的非特异性细胞免疫功能。未接种卡介苗人群中结核病的流行病学调查。应用Mycobacteriumtuberculosis★三、微生物学检查标本取材涂片染色镜检：抗酸染色培养法：罗氏固体培养基动物试验细菌学基因诊断：PCR抗体诊断Mycobacteriumtuberculosis★四、特异性防治卡介苗预防接种对象：新生儿和结核菌素试验阴性的儿童免疫时间：3-5年药物治疗早期、联合、足量、规范使用抗结核药物。常用药物有异烟肼、利福平、链霉素、对氨水杨酸、乙胺丁醇等。Mycobacteriumtuberculosis★下列细菌中繁殖最慢的是：A.大肠埃希菌B.丙型链球菌C.脑膜炎奈瑟菌D.结核分枝杆菌E.肺炎链球菌结核分枝杆菌常用的培养基是：A.沙保弱培养基B.罗氏培养基C.疱肉培养基D.巧克力色培养基E.亚碲酸钾培养基细胞壁含脂类最多的细菌是：A.结核分枝杆菌B.白喉棒状杆菌C.衣氏放线菌D.霍乱弧菌E.幽门螺杆菌不以内毒素或外毒素为致病物质的细菌是：A.白喉棒状杆菌B.炭疽杆菌C.结核分枝杆菌D.绿脓假单胞杆菌E.布氏杆菌第一节结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis)第二节麻风分枝杆菌(Mycobacteriumleprae)

一、生物学性状

二、致病性

三、免疫性

四、微生物学检查法

五、防治原则主线麻风病的病原菌:慢性传染病世界各地均有报道主要分布在亚、非和拉丁美洲主要侵犯神经、皮肤与黏膜,晚期侵犯晚期可侵入深部组织和脏器，形成肉芽肿，家庭内传播多见Mycobacteriumleprae形态与染色细长略弯曲无芽胞，无荚膜，无鞭毛抗酸染色阳性典型的胞内寄生菌

泡沫细胞（麻风细胞）唯一不能人工培养的细菌Mycobacteriumleprae★Mycobacteriumleprae致病

结核样型麻风瘤型麻风

界线类麻风★微生物学诊断显微镜检查PCRMycobacteriumleprae麻风分枝杆菌的特性不包括：A.抗酸染色阳性B.专性需氧，在人工培养基中生长缓慢C.胞内寄生D.以家庭内传播多见E.患者标本中有麻风细胞，有诊断和鉴别意义第14章嗜血杆菌属教学目的与要求掌握流感嗜血杆菌的形态、染色、培养特性、所致疾病及预防

。嗜血杆菌属（Haemophilus）

流感嗜血杆菌（H.influenzae）杜克嗜血杆菌（H.ducreyi）埃及嗜血杆菌（H.aegyptius）副流感嗜血杆菌（H.parainfluenzae）嗜沫嗜血杆菌（H.aphrophilus）

溶血性嗜血杆菌（H.paraphrophilus）

*原发感染：引起急性化脓性感染

化脓性脑膜炎、鼻咽炎、咽喉会厌炎、心包炎

化脓性关节炎等，严重的引起菌血症，以小儿

多见。

*

继发感染：多是内源性感染，以成人多见。流行性感冒麻疹百日咳结核病继发于临床表现慢性支气管炎中耳炎鼻窦炎流感嗜血杆菌所致疾病

：★H.influenzae一、生物学性状

G－小杆菌，多形性，有毒菌株形成荚膜★培养基中需加入血液，以提供X因子和V因子

（巧克力色培养基）

X因子-血红素

V因子-辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ

菌落光滑、无色透明、露滴状

CO2培养

“卫星现象”H.influenzae一、生物学性状★抵抗力：弱，对热和干燥均敏感根据