巨细胞病毒感染课件

巨细胞病毒感染

CytomegalovirusInfection

概述

分布广全球性

潜伏-活化的生物学特征有严重后果

人是人类CMV的唯一宿主，CMV在人群中感染非常广泛，通常呈隐性感染，多数感染者无临床症状，无临床症状者称无症状性CMV感染（或隐性CMV感染），出现临床症状者称症状性CMV感染或CMV病。健康人群CMV感染多为隐性感染或症状轻微，在新生儿、器官移植受者、爱滋病等免疫功能低下的人群，CMV感染可引起严重临床症状。严重后果ＣＭＶ感染已成为目前引起非遗传性感音神经性耳聋的主要原因。据报道约10%～15%的无症状ＣＭＶ感染儿、30%～60%有症状儿会出现先天性或迟发性感音神经性耳聋,且不论是先天性还是迟发性感音神经性耳聋,大多会出现渐进性恶化。严重后果最近有学者研究表明，曾经感染过巨细胞病毒的人发生心梗、中风或者因其它心血管疾病而死亡的危险性增加。主要是CMV感染后可引起冠状动脉炎症，损伤及平滑肌细胞增生，局部脂类物质积聚等病理改变，引起机体内长期炎症反应而导致动脉粥样硬化和慢性心脏病的发生。但炎症和免疫在动脉粥样硬化发生发展中究竟是“因”还是“果”，具体的作用机制仍是目前研究的热点。

严重后果CMV感染与先心病

尽管近年有关CMV感染可致先天畸形的报道较多，但CMV感染是否导致先心病尚无定论，病原学一．疱疹病毒科DNA双链二．一个血清型三个亚型三．抗原IEAEALA三个阶段中的基因所表达的产物分别称为即刻早期抗原(IEA)、早期抗原(EA)以及晚期抗原(LA)。整个复制周期约48～72小时。当机体感染HCMV后,可在外周血白细胞中检测到HCMV抗原,称为HCMV抗原血症。HCMV抗原血症检测可早期诊断活动性HCMV感染,有研究表明,HCMV抗原血症可在活动性HCMV感染出现症状前的几天至1周出现阳性。HCMV的结构蛋白包括衣壳蛋白、被膜蛋白(又称基质蛋白)以及包膜蛋白。HCMV的晚期结构抗原pp65属于被膜蛋白中最主要的一种,大约95%的被膜蛋白致密颗粒由pp65组成,该蛋白主要参与病毒基因调节以及改变宿主细胞的代谢。流行病学(3)与排毒者长期接触，可经唾液、尿、眼泪等传播。

(4）同源性CMV感染：可经输血、器官移植等传播。同源性CMV感染是输血和器官移植的一种严重危害，多次输血或一次大量输血使原发和再发感染的危险性增高，输入含白细胞血液的危险性更高，器官或骨髓移植术后CMV感染率也高。

(5)性交传播：因为病毒常常存在于泌尿生殖道的分泌物、精液或宫颈分泌物中，所以通过性交可直接传播CMV感染环三．易感人群

CMV遍布世界各地，人对其有广泛的易感性，与年龄及免疫功能有关四．流行特征

1.感染率高

2.男女无差异

发病机理1．产毒性感染核内复制包涵体形成细胞溶解

2．潜伏性感染胞内潜伏乘机复制3．细胞转化基因整合信息转移

免疫学1体液免疫

CMV多种病毒蛋白具有抗原性，可引起体液免疫应答，产生多种抗体。无论隐性或显性感染，机体感染CMV后一般均可产生正常的抗体反应，抗体有降低CMV感染的毒力作用,但只有抗体存在不足以防止CMV感染，因为体内有较高水平抗体者仍可感染CMV和发病。CMV通常与宿主细胞结合，主要通过激活补体及抗体依赖的细胞毒杀伤细胞起免疫拮抗作用。免疫学2细胞免疫

2．1

T淋巴细胞介导的细胞免疫细胞毒T淋巴细胞在抗肿瘤、抗病毒中起极其重要的作用。Walter等给骨髓移植受者输注CMV-特异性的T淋巴细胞，重建细胞免疫功能，可以明显降低术后CMV感染率和死亡率。

2．2自然杀伤细胞（NK细胞）介导的细胞免疫NK细胞与T淋巴细胞相互补充，构成机体的免疫监视网络，在抗肿瘤、抗病毒中起极其重要的作用。CMV感染的动物模型研究表明，缺乏NK细胞可发生致命的CMV病，而NK细胞被动免疫可防止致命性CMV感染的发生。三.

CMV逃避T淋巴细胞介导的免疫攻击CMV在与机体免疫应答斗争的过程中，产生了多种机制逃避T淋巴细胞的攻击：①CMV感染引起CD8＋淋巴细胞升高、CD4＋淋巴细胞下降，抑制机体免疫功能；②干扰受感染细胞HLA-Ⅰ抗原分子的表达或产生HLA-Ⅰ抗原同源物，使CTL不能识别受感染细胞，破坏免疫应答，逃避CTL的杀伤作用；③抑制细胞因子的产生。

四.CMV逃避NK细胞的攻击最近的研究表明，CMV-UL18在受感染细胞表面可编码一种充当NK细胞受体的蛋白质，逃避NK细胞的免疫攻击

病理变化受感染器官细胞的肿大及典型的核内“猫头鹰眼样”包涵体CMVinclusionCMVcanoftenproduceapneumonia.HereareCMVinclusionsinlungCMVinclusion临床表现（二）、生后感染

1、围产期感染

a.全身型

b.呼吸系型（百日咳样）

c.肝脾肿大

d.胃肠型

e.肾型

f.血液系统型2、儿童感染

a.流感型

b.单核细胞增多症型

c.呼吸型

d.胃肠型

e.肝炎

f.无症状型

3、免疫抑制病人感染致命的间质性肺炎，致盲的CMV视网膜炎及消化道感染。

4.成年人感染健康的成年人发生巨细胞病毒感染时多无明显的临床症状，部分患者可有与传染性单核细胞增多症相似的表现，症状为低热，乏力，咽痛，淋巴结肿大，关节肌肉酸痛，多发性神经炎，周围血中有不典型淋巴细胞，脾大等，多为输血后的单核细胞增多症。

实验室检查目的：1.有无CMV感染；2.产毒性或潜伏性感染一.病毒学

1.病毒分离：血、尿、唾液或组织中

病毒血症一般在抗原血症出现后的3～9天才开始但其敏感性受到很多因素的影响,技术条件要求高,而且费时,实验操作时间约1～6周,出现细胞病变的平均时间为2～3周,达不到早期、快速诊断的目的。另外,病毒分离不能区别潜伏感染与活动性感染,对HCMV疾病的预测性较差,所以临床应用价值不大2.从受检组织中见到巨细胞包涵体

唾液、尿液、子宫颈分泌液等标本离心沉淀，将脱落细胞用姬姆萨染色镜检，检查巨大细胞及核内和浆内嗜酸性包涵体

3.CMV抗原如PP65

4.PCRCMVmRNA表明产毒性感染CMVDNA表明CMV感染二.血清学检查1.CMV-IgM

2.CMV-IgG

CMV-IgG：1、阳性结果表明CMV感染，6个月内婴儿需除外胎传抗体；2、从阴性转为阳性表明原发性感染；3、双份血清抗体滴度≥4倍增高，可以表明产毒性感染；4、在严重免疫缺陷者，可出现假阴性。

CMV-IgM：1、阳性结果表明产毒性感染，如同时CMV-IgG阴性，则表明为原发性感染；2、新生儿和幼小婴儿产生IgM的能力较弱，可出现假阴性；3、受患儿体内高水平的IgG和类风湿因子等干扰，出现假阴性HCMV症状

HCMVPP65HCMVnPCRHCMV-IgMHCMV-IgG

01020304050607080诊断临床表现+（病原学）仅靠临床表现，不能诊断CMV感染，必须依靠实验室手段，从临床标本中分离出病毒或其特异性抗体等才能确诊治疗如果在妊娠早期发现有原发巨细胞病毒感染时，应尽快终止妊娠。妊娠中、晚期感染者应进一步检查胎儿有无畸形而采取相应的治疗措施。对于有临床症状或者是先天巨细胞病毒病者可用抗病毒药物治疗。但这些药物并不能解决根本问题，往往停药后病毒又潜伏地回升抗病毒治疗效果与机体免疫功能密切相关。治疗但CMV感染在移植病人、AIDS病人、肝癌，特别是白血病、淋巴瘤病人中仍有较大的发病率和死亡率。

目前抗CMV病的重点是预防性抗病毒治疗，Pre-emptive治疗是指检测到CMV亚临床感染的证据或针对CMV感染高危者行抗病毒治疗。早期检测到活动性CMV感染是Pre-emptive治疗的先决条件。治疗所谓的“先发制人”(Ｐｒｅｅｍｐｔｉｖｅ)即口服或静注更昔洛韦以预防性治疗ＨＣＭＶ病,越来越受关注。但无目标地泛用,不仅造成浪费,更可能导致药物的毒性或耐药毒株诱导产生的副效应。Ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ以ＨＣＭＶＰＰ65抗原血症作为指标,研究分析了“先发制人”的意义及必要性及时发现,无病毒抗原血症者不需要服药,亦不会发生ＨＣＭＶ病。然而根据病毒抗原血症的程度给予适当的药物,则能达到阻止病毒进一步侵害组织的目的。他把ＨＣＭＶＰＰ65抗原血症的监测视为ＨＣＭＶ活动与否的“晴雨表”。Ｍｏｒｉ则认为,所谓“先发制人”必须是针对那些有中高度抗原血症(≥10个/片)治疗更昔洛韦(ganciclovir)是美国食品与药品管理局批准的第一个治疗CMV感染的药物,也是首选药,可抑制受染细胞CMVDNA的合成，对CMV有较强的抑制作用,有效率可达70%～80%,但不能治愈,需维持治疗,单用易产生耐药性,故推荐联合用药方案。膦甲酸钠是病毒DNA聚合酶抑制剂，可用于更昔洛韦治疗无效或不能耐受者高效价CMV免疫球蛋白可于抗病毒药物联合应用预防一.一般预防

阻断血液/体液途径

(1)进行有意识的身体素质的锻炼。提高机体免疫机能及抗病能力，特别是育龄期妇女，以减少巨细胞病毒对胎儿的严重危害。

(2)对于孕妇或有慢性消耗性疾病、免疫力低下等患者要注意保护，使她们远离传染源。

（3）注意环境卫生、饮食卫生。

（4）乳汁中巨细胞病毒阳性者，不应哺乳。预防（5）在库存血液中，巨细胞病毒存活时间不长，输用库存血传播巨细胞病毒的机会比新鲜血少。一般认为，因输血传播巨细胞病毒的感染主要是与献血者的白细胞有关。因此，应尽量输用库存血液或选用洗涤红细胞、冰冻红细胞及除去白细胞的红细胞，均可部分防止巨细胞病毒的感染。预防

二.免疫预防

1.主动免疫

减毒活疫苗和亚单位疫苗

2.被动免疫

由于巨细胞病毒的先天性感染和致癌作用，一些学者考虑用疫苗以阻断CMV感染。由于受技术的限制，还无法培养出经济实用的、可做死疫苗的高价效CMV，目前应用的是命名为Towne的减毒活疫苗。

研究进展1.CMV的致病性2.CMV抗原血症的检测3.CMV-pp65、gB蛋白疫苗目前已成功制备CMV-PP65、gB蛋白疫苗。给器官移植受者CMV疫苗主动免疫，将成为预防术后CMV感染的重要方法。谢谢！CMV-prevalence-world概述CMV遍布世界各地，人对其有广泛的易感性。人是CMV的唯一宿主。血清学调查表明：40-100%成人有CMV抗体，其流行无季节性倾向。不同国家及不同经济状况感染率不同。在亚洲和非洲90%的人口受感染，其中大多数人在青少年时期即有抗体，说明感染年龄较早，而西方国家其感染发生较晚。调查还表明，低经济收入人群较高经济收入人群感染率高。男女之间抗体阳性率基本相同。ＣＭＶ属于疱疹病毒科β属双链ＤＮＡ病毒,是人类疱疹病毒中基因组最大的一种病毒。电镜下HCMV由内向外由64nm的核心、100～110nm的衣壳、被膜或基质以及180nm的包膜组成。CMV模拟图cmv-立体图CMVinclusionpp65检测技术HCMV是宫内感染及婴幼儿肝炎中最常见的病原，因而如何早期、快速而精确地诊断HCMV活动性感染已成为监测HCMV感染状况、及时给予抗病毒治疗以及判断预后的关键。ＨＣＭＶＰＰ65抗原血症检测法即用针对ＨＣＭＶＰＰ65的单克隆抗体,通过免疫酶染技术或免疫荧光技术检测外周血多形核细胞(ＰＭＮＬｓ)中ＨＣＭＶＰＰ65抗原的存在,根据检出阳染细胞数来判断ＨＣＭＶ激活程度,作为疾病的诊断以及疗效的观察指标。90年代末,检测