细菌、病毒整合

兽医微生物学PAGEPAGE2509动医6班（第25页）革兰阳性球菌名称形态、结构培养特性致病性及毒力因子微生物学诊断抗原及抵抗力备注葡萄球菌属（Staphylococcus）（金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌）革兰氏阳性。圆形、无芽胞、无鞭毛。但在脓汁、乳汁、液体培养基中呈双球或短链排列。需氧或兼性厌氧。普通琼脂平板：光滑、湿润、隆起的圆形菌落，金黄色、黄色或柠檬色。致牛乳腺炎的菌多为深黄色。血液琼脂平板：菌落大、致病菌多呈明显β溶血。普通肉汤：浑蚀、沉淀致病性葡萄球菌常引起各种化脓性疾患，账血症或脓毒账血症。当污染食品时，可引起食物中毒。毒力因子：α溶血素（坏疽性乳腺炎）、肠毒素（人食物中毒）、凝固酶（致病菌的重要毒力因子）、耐热核酸酶（致病菌的重要毒力因子）。（1）涂片、染色、镜检：（2）分离培养鉴定：致病菌的特点：菌落金黄色，呈β溶血，凝固酶、耐热核酸酶阳性，分解甘露醇，皮下接种家兔后24H致局部皮肤溃疡坏死多糖抗原、蛋白抗原（人源菌株都含有葡萄球菌蛋白A[SPA]）。在无芽胞菌中，葡萄球菌抵抗力较强，对多种抗生素敏感，但易产生抗药性。链球菌属（streptococcus）(无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌、化脓链球菌、猪链球菌)链状、圆形、G+、有些有荚膜。致病性链球菌链较长。兼性厌氧，最适温度为37℃。普通培养基生长不良，需添加血液、血清、葡萄糖。菌落为灰白色、表面光滑、边缘整齐的小菌落。α溶血（草绿色）、β溶血（致病力强）、γ溶血败血症、脑膜炎、关节炎、心内膜炎、肺炎和突然死亡。猪链球菌2型可通过伤口感染人，致人败血症、脑膜炎和心内膜炎。毒力因子为链球菌溶血素SLO\SLS、链激酶、链道酶、透明质酸酶（1）取样：（2）样品的处理（3）PCR血清型：按荚膜抗原的差异分为35个血清型，包括1－34和1/2，猪链球菌2型是其中毒力最强、最常见的一种，猪链球菌1型、7型及9型也可使猪发病死亡。对热较敏感。革兰氏阳性无芽胞杆菌单核细胞李氏杆菌(Listeriamonocytogenes)短杆菌，两端钝圆，多单在，有时排列成V型、短链。老龄培养物或粗糙型菌落的菌体为长丝状。G+，无荚膜、无芽胞，20-25℃条件下培养可形成4根周鞭毛，37需氧或兼性厌氧，生长温度为1-45℃，最适温度为30-371、普通培养基：生长良好，光滑型菌落透明、蓝灰色。2、鲜血培养基：β溶血。3、普通肉汤：轻度混浊，无菌环、无菌膜侵害巨噬细胞，为胞内菌。犊牛和羔羊表现为败血症和肝坏死。成年牛、羊表现为神经症状，“转圈病”。孕畜流产。毒力因子为内化素和ActA、最重要的是李氏杆菌溶血素o(LLO)1、涂片、染色、镜检2、分离、培养、纯化3、生化4、小动物试验：小白鼠具O抗原和H抗原。13个血清型（血清学诊断意义不大）耐碱不耐酸。抗干燥能力强，在干粪中能存活2年以上。对氨苄青霉素敏感。丹毒杆菌（Erysipelothrix)短杆菌，两端钝圆，多单在，有时排列成V型、短链。老龄培养物或粗糙型菌落的菌体为长丝状。G+，无荚膜、无芽胞，无鞭毛。需氧或兼性厌氧，生长温度为1-45℃，最适温度为30-371、普通培养基：生长不良。2、鲜血培养基：光滑、透明、露珠样小菌落，α溶血。3、普通肉汤：轻度混浊，无菌环、无菌膜。可寄生于哺乳动物、禽和鱼类。引起3-12月猪的丹毒，羔羊关节炎，鸡下痢、鸭败血症和类丹毒。有些菌株毒力因子有透明质酸酶、神经氨酸酶1、涂片、染色、镜检2、分离、培养、纯化3、生化：4、小动物试验：鸽子耐碱不耐酸。抗干燥能力强，在干粪中能存活2年以上。对青霉素敏感。具O抗原和H抗原。13个血清型。血清学诊断意义不大。1、疫苗：我国应用猪丹毒GC42或C4T（10）弱毒菌苗。2、抗血清3、抗菌素菌名溶血型4℃运动性接触酶七叶苷水解VP及甲基红试验新生霉素明胶穿刺感染试验鸽豚鼠李氏杆菌β+++++敏感沿穿刺线生长+丹毒杆菌α抵抗试管刷状+—丹毒杆菌与李氏杆菌的生化特点革兰氏阳性芽胞杆菌芽胞杆菌属（Bacillus）炭疽芽胞杆菌（B.anthracis）蜡状芽胞杆菌（B.cereus）G+链大杆菌（组织中为短链，纯培养为长链），无鞭毛，不运动。有椭圆形芽胞位于中央和荚膜。为最大的细菌。需氧或厌氧。A普通琼脂：强毒长成粗糙型菌落。B血清或血液培养基、5%CO2可形成粘液型菌落。C肉汤：上清透明，有白色絮状沉淀。D明胶：成倒立的雪松状，时间稍长呈漏斗状。E含青霉素的肉汤中：0.5U/mL呈“串珠反应”,1.0U/mL生长受到抑制。引起绵羊和牛的败血症。人感染后发生肠炭疽、肺炭疽和皮肤炭疽。毒力主要与荚膜和毒素有关。（1）细菌学检查：涂片、染色、镜检。分离培养生化鉴定动物试验（2）血清学：用已知抗体检测未知抗原A、Ascolis氏沉淀反应（强阳性）B、串珠荧光试验有荚膜抗原、菌体抗原、保护性抗原及芽胞抗原四种成分。60℃30-60min免疫防治：菌苗、血清和抗菌素梭菌属(Clostridium)产气荚膜梭菌（魏氏梭菌）(Cl.perfringens)菌体直杆状，两端钝圆，单在或成双。革兰氏阳性。无鞭毛。芽胞位于菌体中央，使菌体膨胀成梭状。多数有荚膜。厌氧生长，A、D、E型最适温度为45℃，B和C型37℃-45A普通琼脂：可生长。B绵羊血琼脂平板：菌落边缘整齐、灰色至灰黄色、表面光滑半透明、园屋顶状。有时呈叶状或丝状边缘。溶血，双溶血环，内环由θ毒素引起的完全溶血，外环由α毒素引起的不完全溶血A型引起人气性坏疽和食物中毒。B型引起羔羊痢疾和其他动物的肠毒血症。C型引起羊猝疽。D、E型引起动物的肠毒血症。A、人中毒：作细菌的分离鉴定。B、动物的发病主要由细菌在肠道内产生的肠毒素引起，因此要进行毒素的中和试验。根据致死性毒素，可分为A、B、C、D、E五个型。在含糖的厌氧肉肝汤中因产酸于几周可死亡，而无糖则可生存几个月生化特性：发酵牛乳培养基，“暴烈发酵”免疫防治：三联菌苗或五联菌苗肉毒梭菌（Cl.botulinum)菌体直杆状，两端钝园，单在或成双。革兰氏阳性。周鞭毛。芽胞位于菌体近端，使菌体膨胀成球拍状。专性厌氧生长。产毒素的温度为25-30℃。A普通琼脂：可生长。B绵羊血琼脂平板：菌落为园形扇状、裂叶状或根状边缘。扁平或隆起，透明或半透明，灰色至灰白色。βA、B、E、F引起人食物中毒。A、B引起马、牛、水貂中毒。C引起禽、马、牛等中毒。毒素检查：材料+10%胰酶37℃60min，腹腔接种小鼠，若有毒素，24H内发病，小鼠主要表现为坚毛、四肢瘫痪、呼吸困难、呼吸呈风箱式，腰部凹陷，宛如蜂腰，最终死于呼吸麻痹。根据毒素的不同，可分为A、B、C、D、E、F、G7个型。芽胞抵抗力极强，肉毒毒素对碱敏感气肿疽梭菌(Cl.chauvoei)菌体直杆状，两端钝圆，单在或成双，在豚鼠腹腔渗出液中呈短链。革兰氏阳性。周鞭毛。芽胞位于菌体中央，使菌体膨胀成梭状或汤匙状。专性厌氧生长。生长温度为37℃，pH为7.2-7.4A、普通琼脂：生长不良。B、葡萄糖血琼脂：菌落圆形，中央隆起纽扣状。β溶血。肌肉丰满部位发生气性水肿，肌肉常呈暗红棕色到黑色，故又称黑腿病。6个月-2岁的牛最易感细菌的分离鉴定共同的O抗原芽胞抵抗力强破伤风梭菌(Cl.tetani)G+杆菌、两端钝圆、细长、正直或略弯曲。单在或成双。有鞭毛能运动。有芽胞，偏端而成球拍状。严格厌氧。37℃，pH7.0-7.5（1）普通琼脂上：生长旺盛。（2）血清或血液培养基：β溶血。在皮肤黏膜伤口侵入机体后在其中繁殖，产生强烈毒素，引发破伤风一般无需作微生物学诊断。涂片、染色、镜检。动物试验（小鼠）10个血清型，我国为V型芽胞的抵抗力很强免疫防治：（1）菌苗：（2）血清：分支杆菌属及相似菌属分支杆菌(Mycobactreium)细长、直或微弯的杆菌，单在，少数成丛。G+，抗酸性染色。不产生鞭毛、芽胞或荚膜。细胞壁含有10%左右的糖脂，抗3%盐酸酒精脱色，故称为抗酸菌。专性需氧，生长温度为37-37.5℃，最适pH6.4-7.01、普通培养基：生长不良。2、罗杰二氏培养基（内含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐等）：长成粗糙、隆起、不透明、边缘不整齐，颗粒、结节状、乳白色或米黄色的菌落。结核杆菌14-15小时分裂一次。3、肉汤：形成菌膜。被巨噬细胞吞噬后不被消化降解，细菌在胞内繁殖，形成病灶，产生干酪样坏死。1、涂片、染色、镜检：2、分离、培养、纯化：病料用6%H2SO4或4%NaOH处理15min，每份病料接种4-6支管，培养8周。3、变态反应：用PPD4、血清学：ELISA5、PCR：抗干燥能力强；湿热抵抗力弱，62-63℃或煮沸可将其杀死。对紫外线敏感，直射日2H内可杀死该菌，对75%分为结核分支杆菌、牛分支杆菌和禽分支杆菌。变异：易产生耐药性变异和毒力的变异。免疫与变态反应：机体主要产生细胞免疫。还产生迟发性变态反应。免疫与治疗：结核病的免疫是带菌免疫。人可用卡介苗。但在动物，为防止对检疫的干扰，一般不作免疫。副结核分枝杆菌(M.paraenberculosis)短杆状，无芽胞、无鞭毛、无荚膜。病料中成丛排列。革兰氏阳性、抗酸性阳性。需氧，最适温度37.5℃，最适Ph6.8-7.2。生长缓慢，初代分离及困难，需在培养基中添加分支杆菌抽提物，一般需6-8周，或6引起细胞免疫和体液免疫，细胞免疫随病情进展而降低，体液免疫随病情发展而提高。感染牛呈间歇性腹泻，回肠和空肠呈明显增生性肠炎，黏膜呈脑回状显微镜检查分离培养变态反应抗体检测对热较敏感放线菌属牛放线菌(Actinomycesbovis)从培养基中来的细菌呈杆状或棒状，可形成Y、V或T型排列的无隔菌丝。来自病料的细菌，呈菊花状，革兰氏染色中央为阳性、周围呈阴性。初代分离需厌氧。培养基中加入甘油、血清或葡萄糖，生长更旺盛。在血琼中的菌落半透明、乳白色、不溶血、粗糙。主要感染牛、猪、马、羊。以颌骨缓慢肿大为多见取硫磺样颗粒加5%KOH，压碎，固定，革兰染色，镜检对干燥、低温、高热抵抗力很弱肠杆菌科埃希氏菌属（Escherichia）大肠埃希氏菌（Ecoli）即大肠杆菌革兰氏阴性无芽胞杆菌。大部分有周鞭毛和菌毛。直杆状，两端稍圆。单在或成双排列。为最小的细菌本菌为兼性厌氧菌。最适生长温度为37℃，最适pH为7.2-7.4.1、普通培养基：中生长良好。隆起、光滑，整齐，灰白色。2、肉汤：浑浊，粘性沉淀，管壁有菌环。3、麦康盖培养基：红色菌落。4、伊红美兰鉴别培养基：黑色带金属光泽的菌落。5、血平板：β溶血(致病菌株)1、产肠毒素大肠杆菌（ETEC）：毒力因子主要是粘附素和肠毒素。引起动物腹泻。2、肠产毒性大肠杆菌（EnterotoxigenicE.coli,ETEC）：引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻度水泻，也可呈严重的霍乱样症状。致病因素是LT或ST，或两者同时致病。有些菌株具有定居因子，常见者为O6：K15：H16、O25：K7：H42。3、产类志贺毒素大肠杆菌（SLTEC）：主要毒力因子是粘附性菌毛和类志贺毒素，引起猪水肿和人的出血性肠炎。4、肠致病性大肠杆菌：是婴儿腹泻的主要病原菌，有高度传染性，严重者可致死；成人少见5、败血性大肠杆菌：6、尿道致病性大肠杆菌涂片、染色、镜检分离培养、纯化生化试验、血清学O抗原K抗原H抗原抗原结构式:O:K:H生化特性：大肠杆菌能分解多种碳水化合物产酸产气。大多数菌株可发酵乳糖。防治：1、抗粘附素全价或亚单位苗2、类毒素苗或LT-B亚单位苗3、基因工程苗4、抗血清5、抗菌药沙门氏菌属（Salmonella）革兰氏阴性，无芽胞，周鞭毛。呈直杆状。兼性厌氧，与E.coli相似只有鸡白痢、鸡伤寒、羊流产和甲型副伤寒在普通培养基上生长较差。大部分不利用乳糖。培养基中加入硫代硫酸钠、胱氨酸、血清等可提高其生长效率。主要引起败血症、胃肠炎、局部炎症。人中毒。多毒力因子鉴别培养基增菌培养基三糖铁和尿素培养基生化鉴定A-F群多价O血清沙门氏菌具有O、H、K和菌毛四种抗原。沙门氏菌的抗原式：O：H1：H2生化特性：绝大多数发酵葡萄糖产酸产气，在三糖铁琼脂上常产生H2S.防治：1、疫苗2、净化3、药物耶尔森菌属鼠疫耶尔森菌(Yersiniapestis)革兰氏阴性，菌体呈球杆状。固体培养基培养，菌体为卵圆形或短杆状，散在或群集。肉汤中培养，细菌排成短链状。兼性厌氧菌。最适生长温度为28-30℃，最适pH为7.2-7.4。1、普通琼脂培养基：生长贫瘠。菌落呈半透明、奶油状，光滑湿润。2、肉汤培养基：液体清亮，液面有菌膜。4-5鼠疫是由鼠疫杆菌所致的烈性传染病，病死率30%～100%人感染后，死者皮下严重充血、出血，大量血红蛋白转为含铁血红素，致使皮肤变黑紫色，故又称为“黑死病”。毒力与FI等毒力因子相关1、病料的采取2、分离培养3、鉴定抗原性：18种O抗原。还有V抗原、FI、W和MT抗原。弧菌科（Vibrionaceae）弧菌属副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)弧状、杆状或丝状。端鞭毛。革兰氏阴性。1、血琼脂：在绵羊血平板上生长旺盛，但不溶血。2、TCBS琼脂：菌落绿色。本菌存在于海产品中，人类食用污染本菌的鱼、贝类等引致食物中毒。主要由溶血素和磷酸脂酶A2引起。中毒者主要表现为水样腹泻、呕吐及发热病人粪便或可疑食品接种嗜盐菌选择培养基或SS平板，取可疑菌作生化试验和神奈川试验。（本菌致病株绝大多数能裂解人、兔等的红细胞，用溶血反应区分致病株和非致病株，称为神奈川实验）巴氏杆菌科巴氏杆菌（P.multocida）G-球杆菌，来自组织的细菌以美蓝染色为两级浓染。无鞭毛、无芽胞。新分离的强毒株有荚膜，菌落为黏液型，较大。需氧或兼性厌氧。1、普通培养基：生长贫瘠。2、血清或血液培养基：生长旺盛。淡灰白色、闪光的水滴样小菌落。不溶血。3、在麦康凯培养基：不生长。4、肉汤培养基：表面形成菌环，液体清朗，管底有粘稠的沉淀。主要引起败血症。急性型呈出血性败血症迅速死亡，慢性型呈萎缩性鼻炎（猪、羊）、关节炎、局部化脓性炎症小鼠极易感染，鸽子对杀禽亚种易感性强1、取材：心、肝、脾、肺、肾、血液。2、涂片、镜检：3、分离培养：4、生化试验：5、动物试验依荚膜抗原可分成6个血清型。依菌体抗原可分为16个型。我国家禽为5：A（菌体：荚膜），8：A；猪为5：A，6：B；兔为7：A，5：A。抵抗力不强，在无菌蒸馏水和生理盐水中很快死亡防治：1、疫苗2、血清3、抗菌药里氏杆菌属鸭疫里(巴)氏杆菌(Riemerella)G-短杆菌，呈杆状或椭圆形，个别呈长丝状，多为单个，少数成双或短链，两级浓染。可形成荚膜，无芽胞、无鞭毛。需氧或兼性厌氧。初次培养需5-10%CO2。1、普通培养基：生长贫瘠。2、巧克力或胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）：生长旺盛。光滑型奶油状小菌落。3、在麦康盖培养基：不生长。4、血清或胰蛋白胨的肉汤：轻微混浊，管底有少量沉淀。主要感染2-3周的雏鸭。引起急性或慢性败血症和浆膜炎。vap1基因的编码产物是可能的毒力因子，为CAMP协同溶血素1、涂片、染色、镜检2、分离、培养、纯化：取发病鸭的脑和心，接种巧克力培养基。3、生化鉴定4、血清学鉴定5、动物试验：豚鼠共有21个血清型，我国主要为I型。与巴氏杆菌一样，对外界抵抗力不强，4℃免疫：灭活菌苗和弱毒苗放线杆菌属（Actinobacillus）猪胸膜肺炎放线杆菌(A.pleuropneumoniae）G-小球杆菌，具有多形性，新鲜组织涂片两极浓染。有荚膜和鞭毛，具运动性兼性厌氧。初次培养需5-10%CO2，最适生长温度为37℃1、普通培养基：生长贫瘠。2、巧克力：生长旺盛。3、绵羊鲜血琼脂：β溶血，金色葡萄球菌可增强其溶血。4、麦康盖琼脂：不生长（与巴氏同）。主要引起猪的典型胸膜肺炎。小于6月龄的猪最易感。猪是本菌高度专一性的宿主。毒力因子复杂。1、取材：肺、胸水、鼻及气管渗出物。2、涂片、染色、镜检3、分离、培养、纯化4、生化鉴定。5、血清学鉴定。6、动物试验。血清型：14个型，1型的毒力最强，102个细菌可使猪发病，105可致猪死亡。我国为2、3、5、7、8型。抵抗力与巴氏相同生化特性：产生脲酶、分解蔗糖。免疫：灭活菌苗免疫母猪。净化。青霉素嗜血杆菌(Haemophilus)G-短杆状，杆状或长丝状、球状。无鞭毛、无芽胞，两极浓染。新分离治病菌株有荚膜需氧或兼性厌氧。最适温度37℃，pH7.6-7.8。初次分离需5-10%CO2，同时需提供X因子和V在巧克力琼脂上，菌落为圆形、隆起、表面光滑、边缘整齐、灰白色半透明小菌落。可致人和动物的多种疾病。毒力因子是荚膜、菌毛、内毒素。1、流感嗜血杆菌：人的呼吸道感染。2、副猪嗜血杆菌：引起猪的格氏病，主要表现为心肌炎、腹膜炎、胸膜炎、脑膜炎及关节炎。与猪流感联合引起流感。3、副禽嗜血杆菌：鸡鼻炎、打喷嚏、面部水肿、产蛋下降。1、取材：脑、血液、分泌物。2、染色、涂片、镜检：两极浓染3、分离培养：巧克力琼脂或鲜血琼脂，5-10%CO2。血琼脂平板上生长贫瘠。4、V因子需要实验：卫星现象5、卟啉试验（X因子需要实验）外界抵抗力不强，在干燥环境中易死亡，常用消毒剂都容易杀灭本菌。革兰氏阴性需氧杆菌布氏杆菌(Brucella)短杆或球状、G-、多单在，鉴别染色法染成红色。不形成芽胞和荚膜。专性需氧，但初次分离5%-10%CO2。最适温度37℃，1、普通培养基，生长不良。2、肝汤琼脂：圆形、光滑、湿润、初无色、后带灰白或灰菌3、液体培养基：初浑浊久粘稠沉淀。引致多种动物和人的布氏杆菌病，毒素为内毒素。可经气溶胶传播，是潜在的生物武器。流产布氏杆菌一旦潜入血流，则出现菌血症，在妊娠中期造成坏死性胎盘炎，致使孕畜流产。1、细菌学检查（显微镜检查、分离培养、动物试验）2、血清学检查变态反应属内抗原A\M\R和属外抗原对外界环境的抵抗力较强，对湿热的抵抗力不强支气管败血波氏菌（B.bronchiseptica）细小球杆状，无芽胞，周鞭毛。革兰氏阴性G-、两极浓染。I相菌，周生菌毛，无鞭毛，毒力强。III相菌，无荚膜和菌毛，有周鞭毛,毒力弱1、普通琼脂：生长良好。2、波-让氏琼脂：I相菌落呈珍珠状或半圆状、乳白色，光滑致蜜，β溶血。多次传代后变异成II相或III相灰白色，扁平、光滑、质地稀软、不溶血。3、蛋白胨琼脂：灰白、透明、光滑、边缘整齐微隆。4、麦康凯琼脂：菌落微红色，周围有小红圈。引起呼吸道的不显性感染及急、慢性炎症，统称为波氏菌病，最有代表性的是猪萎缩性鼻炎、犬传染性支气管炎、兔传染性鼻炎。毒力因子包括黏附素及毒素两大类。1、细菌学检查2、动物试验3、血清学检查具有O、K、H抗原，抵抗力不强，常用消毒剂均对其有效。军团菌(Legionella)杆状或长丝状，菌端钝圆，有的略弯曲，常见纺锤体菌状。无芽胞和荚膜，端生鞭毛，大多数有运动力。。需氧，2.5%CO2。在C活性炭酵母浸液琼（CYE）中：需培养3-5天，菌落为雕花玻璃状。在缓冲活性炭酵母浸液琼脂（BCYE）中，针尖大小的菌落，园形、灰色。人和多种动物均可感染。人表现为急性呼吸道传染病。嗜肺军团菌只感染人并致病。1、取材：肺、胸腔液等。2、分离培养：CYE和BCYE3、鉴定：对细菌作免疫荧光染色具O抗原和H抗原。依O抗原的不同可分为多个血清型。抵抗力较大肠杆菌强。革兰氏阴性厌氧和微需氧无芽胞杆菌弯曲菌属(Campglobacter)空肠弯曲菌（C.jejuni）螺旋状弯曲杆菌，呈弧状或豆点状，G-。有端鞭毛。接触空气后成球状微需氧。5%O2、10%CO2、85%N2的混合气体。42-43℃。光滑型（圆形、隆起、半透明细小菌落）和粗糙型（边缘不整齐、蔓延生长的菌落）引起牛、猪、犬的腹泻，绵羊流产、禽传染性肝炎。人的急性胃肠炎和食物中毒目前可采用PCR方法直接检测粪样中的细菌。细菌学检查，采集病料或排泄物，直接涂片染色镜检，分离培养用改良Camp-BAP琼脂或Skirrow琼脂培养含有耐热的O抗原和不耐热的H、K抗原对氧敏感，在外界环境中很易死亡，对干燥抵抗力弱，对酸和热敏感，对常用消毒剂敏感分型：利用萘啶酮酸敏感试验、马尿酸钠水解试验和快速H2S产生试验，将该菌分为生物I型和II型，前者H2S阴性、后者阳性。胎儿弯曲菌(C.fetus)螺旋状弯曲杆菌，两端尖细。老龄培养物可长成疏松弯曲螺旋的丝状体，尤其是琼脂平板上的可呈球形或类球形微需氧。5%O2、10%CO2、85%N2的混合气体。37℃，pH7初次在琼脂培养基中分离，菌落为光滑型、雕花玻璃型、粗糙型或粘液型。胎儿亚种引起绵羊和牛的散发性流产，也可感染人引起流产、早产、肠炎、败血症等或脑膜炎，经口传染。涂片、染色、镜检。分离培养：用特殊培养基在特殊条件下培养。生化鉴定。血清学检查，主要用于牛的诊断，用试管凝集试验，血清凝集价达1：100者可判阳性。抵抗力不强，易为干燥、直射阳光及弱消毒剂等杀死，对氧敏感，对多种抗生素敏感螺旋体(Spirochaeta)概述G-，呈螺旋状或波浪状圆柱形，具有多个完整的螺旋。结构：中心为原生质细胞质2-100根轴丝外鞘（细胞壁和粘液层）运动方式：①旋转式②伸缩螺旋间距离活动③蛇行式多数厌氧，有的需血液、腹水或其它特殊成份染色方法：革兰氏染色：大部分不着色。姬姆萨染色：红色或蓝色。镀银染色：黑褐色。印度墨汁或刚果红：透明无色。暗视野:分裂方式：二等分裂。疏螺旋体属（Borrelia）伯氏疏螺旋体（B.burgadorferi）菌体长20-30μM，直径0.2μM，有2-40个大而宽疏的螺旋，鞭毛缠绕菌体。致病性的疏螺旋体都能结合血小板，而且这种结合是由整合素介导。是莱姆病(Lyme)病原,感染人、犬、牛、马等动物，致关节炎等多种疾病。伯氏疏螺旋体致人、犬、牛和马的关节炎，病人常出现的第一个病症是叮咬部位呈圆环状疹块。犬表现为游走性关节炎。硬蜱吸吮后数年内具传染显微镜检查：用暗视野显微镜或姬姆萨染色等可观察到疏螺旋体。分离培养：用改良的Kelley氏培养基。血清学：ELISA，犬在感染4周后可检测出抗体，3个月后达高峰。分子生物学方法：PCR、核酸杂交。防治：药物：强力霉素、阿膜西林。疫苗：灭活疫苗、亚单位疫苗。鹅疏螺旋体（B.anserine）菌体长8-20μM，直径0.2μM。瑞氏染色呈紫兰色，碱性复红呈紫红色。微需氧。普通培养基中不生长，但在凝固鸡蛋蛋白及马或鸡灭活血清培养基上，或以5倍量5%蛋白胨水和少量红细胞裂解液稀释的兔血清培养基上，或在含正常鸡血清的肝素培养基上生长。经蜱传染，致禽类败血症。可感染鸡、鸭、鹅、火鸡及多种鸟类。病禽感染后体温升高、拒食、腹泻、贫血，死亡率高。镜检：高温期采血作血涂片。分离培养：血清学试验：琼脂扩散、凝集试验、间接免疫荧光。56℃15min可灭活。常用的化学消毒剂常用的浓度均可在5防治：药物：土霉素口服。疫苗：灭活疫苗蛇形螺旋体属[短螺旋体属]（Serpulina）猪痢疾蛇形螺旋体菌体多为2-4个弯曲，两端尖锐，形似双燕翅，维多利亚蓝、姬姆萨氏和镀银法均能很好染色严格厌氧。培养基需预先还原，并置于一个大气压的H2和CO2的混合气体以及冷钯为触媒的环境中才能生长。培养基中应含有10%胎牛血清或血液的TSB或BHIB液体或固体培养基。在血液培养基中，可形成扁平、半透明、针尖状、强β溶血性菌落。主要引起8-14周龄的猪发生血性下痢1、镜检：以病猪的新鲜粪便或表面粘液、或病变结肠粘膜或肠内容物直接制成涂片，以姬姆萨法染色。相差或暗视野检查，组织切片：2、培养：3、致病力鉴定：动物感染试验：若猪在接种后30d以内有一半下痢和产生肠道病变，即可证明其有致病力。猪结肠结扎试验防治：无疫苗，应净化猪群细螺旋体属【钩端螺旋体属】（Leptospira）呈纤细的圆柱形，长6-20μM，直经0.1-0.2μM。在暗视野检查时，常形成串珠状结构，菌体一端或两端弯曲成钩。革兰氏染色阴性，但较难着色。姬姆萨染色可着色，但效果欠佳。镀银染色和刚果红染色较好。暗视野显微镜下可见其运动。需氧，对营养要求不高。在含动物血清和蛋白胨的柯氏（Korthof）培养基中生长良好。最适pH7.2-7.4,最适生长温度是28℃-30℃,生长时间为2天致病性钩体是一种人畜共患传染病病原。急性为发热、贫血、出血、黄疸、血红素尿、黏膜和皮肤坏死，亚急性为肾炎、肝炎、脑膜炎、产后泌乳缺乏症，慢性为虹膜睫状体炎、流产、死产、不育不孕早期：三症状“寒热、身痛、全身乏”三体征“眼红、腿痛、淋巴结大”镜检：直接镜检染色镜检分离培养：血清学检查在中性的湿土和水中可存活数月。直射阳光和干燥可将其致死。常用消毒剂、常用浓度可将其灭活。对青霉素、金霉素和四环素敏感。生化特性：不发酵糖类，不分解蛋白质，氧化酶和过氧化酶为阴性。霉形体（Mycoplasma）（支原体）猪肺炎霉形体（M.hyopneumoniae）猪鼻霉形体（M.hyorhinis）猪滑液霉形体（M.hyosynoviae）禽败血霉形体（M.gallisepticum)细胞外围只有一层胞浆膜，无细胞壁。细胞膜分为三层，内、外层为蛋白质，中间为脂质，一种脂质含36%胆固醇、另一种脂质胆固醇含量低。具有多形性，常呈球状、环状、杆状，部分细胞还有分枝的丝状。无鞭毛，但能滑动。革兰氏染色阴性，但着色不良。姬姆萨染色呈淡紫色。大部分在有氧环境下生长，但在固体培养基分离时加入5%CO2和95%N2，生长更好。pH为7-8，适宜温度为36℃。一般培养基不生长，需牛心浸液、酵母膏、辅酶I、氨基酸等。培养基中加入醋酸铊、叠氮钠等药物可抑制杂菌的生长。在固体培养基：2-6天后，菌落为圆形、透明、露滴状。典型菌落呈“煎荷包蛋状”，菌落中心深入培养基中、致密、色暗，周围长在培养基表面、较透明。在液体培养基：数量较少，不易见到浑浊。可在细胞培养中生长，但不引起细胞病变，可妨碍病毒的细胞培养。病原性霉形体常定居于多种动物的呼吸道、泌尿生殖道、消化道粘膜表面、乳腺及眼等。引起动物的多种传染病。特点是潜伏期长，成慢性经过，地方性流行，多具有种的特性。胞黏素是支原体的主要毒力因子之一。1、直接镜检意义不大。2、分离培养：3、生理生化鉴定：4、血清学鉴定：生长抑制试验（血清置于培养基中，如同型可见抑菌圈），代谢抑制试验（血清加入含葡萄糖的液体培养基中，如同型可抑制糖的代谢）、表免疫荧光法（荧光抗体直接染于琼脂块，在入射式荧光的照射下，如同型可发出特异的荧光）。因无细胞壁，所以对外界环境的抵抗力不强。45℃15-30min，55℃5-15min可将其杀死。常用消毒剂、常用浓度可将其杀死。但对醋酸铊、结晶紫、亚硝酸盐等有较强的抵抗力。青霉素、先锋霉素对它无效。对放线菌素D、丝裂菌素C繁殖方式：以二等分裂为主，也有出芽、分支或由球状细胞伸展成长丝，然后分节，成为许多球状和短杆状细胞。生化特性：发酵型：能分解葡萄糖及其它糖类，产酸不产气。非发酵型：不能分解糖类。分型：霉形体的抗原由细胞膜上的蛋白质和类脂组成，各种霉形体的抗原结构不同，交叉很少。免疫：自然感染的动物可产生较强的免疫力。部分动物可用疫苗进行预防。立克次氏体(Rickettsia)立克次氏体是一类依赖于宿主细胞和专性细胞内寄生的小型革兰氏阴性原核单细胞微生物。细胞多型，大小介于病毒和细菌间，有类似革兰氏阴性细菌的细胞壁和化学组成，革兰氏染色阴性、姬姆萨染色呈紫或蓝色，除贝氏科克斯体外，均不能通过细菌滤器。致人畜疾病的立克次氏体多寄生于网状内皮系统、血管内皮细胞和红细胞。主要寄生于节肢动物的肠上皮细胞、或唾液腺、生殖道内。人畜主要通过它们的叮咬或粪便污染伤口而感染。人和动物感染后可产生细胞免疫和体液免疫1、病原学染色、分离培养2、血清学对理化因素的抵抗力不强衣原体（Chlamydia）一类具有滤过性、严格细胞内寄生，并经独特发育周期以二等分裂繁殖和形成包涵体的革兰氏阴性原核细胞型微生物。细胞圆形或椭圆形，革兰氏染色阴性，含DNA和RNA两种核酸，具有由粘肽组成的细胞壁，有较复杂、能进行一定代谢的酶系统，专性细胞内寄生，有独特的发育期、呈二等分裂1、鸡（鸭）胚培养：5-7天鸡胚，8-10天鸭胚。在卵黄囊内生长。2、动物接种：3-4周小鼠。3、细胞培养：引致多种动物和人的多种炎症，并可影响生殖系统。人感染后主要表现为肺炎和毒血症。免疫：制成鸡胚培养的灭活苗。鸡胚卵黄囊灭活油佐剂苗进行免疫接种，可预防羊衣原体流产。对某些抗生素敏感形态染色及发育周期：1、元体：球状、椭圆。发育成熟的衣原体，对动物和人有高度传染性，但无繁殖能力。姬姆萨染色呈紫色，马基维洛染色呈红色。2、网状体：圆形或椭圆。网体仅是衣原体的繁殖个体型态，无感染性。姬姆萨染色和马基维洛染色呈蓝色。3、包涵体：是衣原体在细胞空泡中的集团，内含大量元体和网状体。姬姆萨染色呈深紫色，G-真菌分类:壶菌门、接合菌门（多数腐生，形成无隔菌丝。无性：孢子囊孢子,有性：结合孢子）、子囊菌门（无性：出芽或形成分生孢子，有性：子囊孢子）、担子菌门（有性繁殖。由有隔菌丝形成各种子实体）、半知菌门（菌丝有中隔，无性繁殖产生分生孢子。）生物学特性：有细胞壁但不含肽聚糖。致病性：一些外源性真菌感染，造成皮肤、皮下和全身性感染，一些内源性真菌在免疫力降低和长期使用广谱抗生素发生机会感染，一些真菌污染空气时可引起接触性皮炎等疾病，有些真菌在粮食或饲料上生长，产生毒素，人、畜禽食用后可导致急性或慢性中毒。外界因素：1、温度：生长温度为10-40℃，最适温度为25-35℃。菌丝或酵母在60℃2、pH：可在1.5-11的范围内生长,最适为5-10.3、湿度：95-100%的相对湿度中生长良好，80-85%生长不良或停滞。4、光线：5、气体：多数真菌为需氧菌。诊断1、显微镜检查：抹片检查：湿标本检查：印度墨汁：乳酸石炭酸棉兰酵母菌圆形、椭圆形、腊肠形。比细菌大，具细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞浆。细胞壁占干物质的10%，主要由甘露醇、葡聚糖和几丁质组成。生长曲线与细菌相同。可进行无性和有性繁殖，但以无性为主，主要为芽殖、裂殖和产生掷孢子。霉菌凡生长在营养基质上，能形成绒毛状、蛛网状或絮状菌丝体的真菌。霉菌呈丝状。生长在空中的为气生菌丝、伸入基质的为营养菌丝、菌丝末端有孢子的为繁殖菌丝。霉菌呈绒毛状、絮状。依孢子类型不同，可表现为不同颜色。无隔菌丝呈长管状分支，多核单细胞。有隔菌丝由隔膜分隔成多细胞，隔中央有孔，细胞核及原性质可流动。菌丝的细胞结构基本与酵母相似。生长与繁殖：芽孢子、节孢子、厚垣孢子、孢子囊孢子炭疽杆菌与其它需氧芽胞杆菌的鉴别鉴别项目炭疽芽胞杆菌蜡状芽胞杆菌动力-+对豚鼠致病力+-菌落粗糙、边缘不整齐蜡样光泽、波纹状串珠试验+-Ascolis反应强阳性阴性或阳性荚膜形成+-青酶霉素抑制+-肉汤生长絮状沉淀、上层清、无菌膜均匀混浊、颗粒沉淀、有菌膜Γ噬菌体裂解+-溶血反应不溶解或微溶Β溶血碳酸氢钠琼脂M型菌落R型噬菌体(bacteriophage,phage)：感染细菌的病毒。一、形态结构：蝌蚪形、微球形、纤丝形二、抗原性及抵抗力具抗原性、可刺激机体产生特异性抗体。三、增殖过程：吸附、侵入，增殖、裂解。四、与寄主细菌的关系：溶菌反应，溶原化二种类型。烈性噬体、溶原性噬菌体。五、实际应用：用于细菌的鉴定、分型和工具双股DNA病毒名称属的特性致病性主要病毒种微生物学诊断培养痘病毒科大多数病毒粒子为砖状，副痘病毒的病毒粒子为纺锤状，核衣壳为复合对称，单分子的线状双股DNA组成。病毒在细胞质内增殖，形成包涵体，是最大的DNA病毒感染人或动物后引起局部或全身化脓性皮肤损害猪痘病毒，牛痘病毒..取材病毒的分离培养病毒的鉴定可在发育的鸡胚绒毛尿囊膜上生长，多数在膜上形成痘斑，均可在同种动物的单层细胞上良好的生长，引起CPE或肉眼可见的空斑。牛痘，痘苗病毒常侵害血管，常为出血坏死性痘斑非洲猪瘟病毒科单分子线状双股DNA，有囊膜，核衣壳二十面体对称全身出血，呼吸障碍，和神经症状。主要感染单核巨噬细胞系统，引起组织的严重坏死，出血，最终导致死亡。复制能力和引起巨噬细胞病变的能力为病毒毒力的衡量因素非洲猪瘟病毒病原分离鉴定，取病料节终于鸡胚卵黄囊或接种与猪白细胞或骨髓原代细胞分离病毒，电镜下观察血清学试验实验动物鉴定核算探针可在鸡胚卵黄囊培养繁殖，也可在体外培养的猪骨髓细胞和白细胞上增殖疱疹病毒科伪狂犬病病毒病毒粒子椭圆或圆形，位于细胞核内的无囊膜，胞浆内有囊膜，双股DNA体温突然升高，不食，间有呕吐或腹泻，精神高度沉郁，昏睡状态下死亡，可引发