第八章动物实验基本操作

第八章动物实验操作技术

第一节实验动物的抓取与固定第二节实验动物的麻醉第三节实验动物给药途径和方法第四节实验动物采血方法当前1页，总共56页。第一节实验动物的抓取与固定一、大鼠小鼠二、豚鼠三、家兔四、犬当前2页，总共56页。小鼠的手法捉拿当前3页，总共56页。大鼠的手法捉拿当前4页，总共56页。大、小鼠的固定当前5页，总共56页。二、豚鼠的捉拿和固定豚鼠的捉拿豚鼠的手法固定当前6页，总共56页。三、家兔的捉拿和固定家兔的捉拿家兔的手法固定当前7页，总共56页。四、犬的捉拿当前8页，总共56页。家兔手术台固定当前9页，总共56页。第二节

实验动物的麻醉一些动物实验，特别是手术等实验，为减少动物的挣扎、保持安静和便于操作，常对动物采用必要的麻醉。由于动物种属间的差异，所采用的麻醉方法和选用的麻醉剂亦有不同。当前10页，总共56页。一、常用的麻醉剂

氨基甲酸已酯戊巴比妥钠乙醚当前11页，总共56页。（一）挥发性麻醉剂包括乙醚、氯仿等。优点：其麻醉量和致死量差距大，所以安全度也很大，动物麻醉深度容易掌握，而且麻后苏醒较快。缺点：对局部刺激作用大，可引起上呼吸道粘膜液体分泌增多，容易引起窒息，故在乙醚吸入麻醉时必需有人照看，以防麻醉过深而出现上述情况。当前12页，总共56页。（二）非挥发性麻醉剂包括苯巴比妥钠、戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类的衍生物，氨基甲酸乙脂和水合氯醛等。优点：使用方便，一次给药可维持较长的麻醉时间，麻醉过程较平衡，动物无明显挣扎现象。缺点：苏醒较慢。当前13页，总共56页。氨基甲酸乙酯特点：药性温和安全度大多数动物均可使用。有致癌作用不能用于肿瘤有关的实验;有时可降低血压。

动物给药途径剂量浓度给药量维持时间

（g/kg)﹪ml/kg

犬猫兔腹腔静脉0.75~1.0253~42~4h豚鼠肌肉1.35207.0大小鼠腹腔1.5~2.02010当前14页，总共56页。戊巴比妥钠动物给药途径剂量浓度给药量维持时间

（mg/kg)﹪ml/kg犬猫兔静脉3031.02~4h腹腔40~5031.4~1.7豚鼠腹腔40~5022.0~2.5大小鼠腹腔4522.3特点：短效麻醉剂，对动物的循环和呼吸无显著影响。当前15页，总共56页。（三）中药麻醉剂

动物实验时有时也用到像洋金花和氢溴酸东莨菪碱等中药麻醉剂，但由于其作用不够稳定，而且常需加佐剂麻醉效果才理想，故在使用过程中不能得到普及。当前16页，总共56页。二、动物的麻醉方法

（一）全身麻醉

1.吸入法

操作：用乙醚浸湿棉球或纱布，迅速转入密闭容器使其挥发，然后把待麻醉动物投入，约隔4～6分钟即可麻醉，麻醉后应立即取出。给药过程中如发现动物的角膜反射消失，瞳孔突然放大，应立即停止麻醉。可先注射阿托品预防窒息。当前17页，总共56页。2.腹腔和静脉给药麻醉法非挥发性麻醉剂可用作腹腔和静脉注射麻醉，操作简便，是实验室最常采用的方法之一。腹腔给药麻醉多用于大小鼠和豚鼠，较大的动物如兔、犬、猴等则多用静脉给药进行麻醉。由于各麻醉剂的作用长短以及毒性的差别。所以在腹腔和静脉麻醉时，一定控制药物的浓度和注射量。当前18页，总共56页。（二）局部麻醉

1.猫的局部麻醉一般应用0.5～1.0%盐酸普鲁卡因注射。粘膜表面麻醉宜用2%盐酸可卡因。2.兔在眼球手术时，可于结膜囊滴入0.02%盐酸可卡因溶液，数秒钟即可出现麻醉。3.犬的局部麻醉用0.5～1%盐酸普鲁卡因注射。眼鼻、咽喉表面麻醉可用2%盐酸可卡因。当前19页，总共56页。三、麻醉注意事项

1、动物麻醉前禁食10~12h,不少于5h2、虚弱和过于肥胖的动物给药剂量应低于标准量3、静脉注射麻醉剂应注意缓慢达到所需要的麻醉深度则停止给药4、注意实验动物保温。做慢性实验时，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平。

猫为38.6℃±1.0℃，兔为38.4℃±1.0℃，大鼠为39.3℃±0.5℃

当前20页，总共56页。第三节实验动物给药方法在动物实验中为了观察药物对机体功能、代谢、形态的作用需要将药物注入到动物的体内。一般根据动物种类和药物剂型确定给药的方法。当前21页，总共56页。一、给药方法（一）皮下注射当前22页，总共56页。动物注射部位注射量犬猫大腿外侧2ml豚鼠大腿内侧或小腹部1ml大小鼠侧下腹部0.4ml/1ml当前23页，总共56页。（二）皮内注射当前24页，总共56页。（三）肌肉注射动物注射部位注射量犬臀部2~5ml家兔大腿外侧0.5~1.0ml(2ml)豚鼠大腿外侧0.2~0.5ml大鼠大腿外侧0.2~0.5ml小鼠大腿外侧0.1~0.2ml(1ml)当前25页，总共56页。（四）腹腔注射当前26页，总共56页。注射部位左下腹部1/3处小鼠0.1~0.2ml大鼠1~3ml豚鼠2~5ml家兔5~10ml犬5~15ml当前27页，总共56页。（五）静脉注射大小鼠的尾静脉注射当前28页，总共56页。家兔耳部血管家兔的耳缘静脉注射耳外缘静脉耳中央动脉当前29页，总共56页。静脉注射给药剂量小鼠大鼠豚鼠家兔犬0.2~0.5ml1~2ml1~5ml3~10ml5~15ml当前30页，总共56页。（六）经口给药各种动物一次灌胃能耐受的最大容积:小鼠为0.5~1.0ml，大鼠为4~7ml，豚鼠为4~7ml，家兔为80~150ml，犬为200~500ml。当前31页，总共56页。二、实验动物用药量的确定及计算方法

按照人与实验动物的体表面积比例计算（一）人体表面积计算人体表面积（m2）=0.0061×身高（cm）+0.0128×体重(kg)－0.1529例：某人身高168cm，体重55kg，试计算其体表面积。解0.0061×168+0.0128×55.0.1529=1.576m2中国人平均身高：男1.70m女1.59m,体重：男67.7kg女59.6kg当前32页，总共56页。（二）动物体表面积计算A（体表面积，以m2计算）=K×W（体重，以g计算）2/3

10000K值人小鼠大鼠豚鼠家兔猫犬猴10.69.19.19.810.19.811.211.8当前33页，总共56页。计算公式A人/A动物＝B人/B动物A:体表面积（m2）

B:药量（重量）

当前34页，总共56页。人和动物间按体表面积折算的等效剂量比值表

小鼠(20g)大鼠(200g)豚鼠(400g)家兔(1.5kg)猫(2.0kg)猴(4.0kg)狗(12kg)人(70kg)人(70kg)

0.00260.0180.0310.070.0780.160.821.0当前35页，总共56页。第四节实验动物采血方法

实验研究中，经常要采集实验动物的血液和尿液进行常规检查或某些生物化学分析，故必须掌握血液和尿液的正确采集、分离和保存的操作技术。当前36页，总共56页。采血量采血部位动物品种最少量血尾静脉耳静脉眼底静脉丛腹壁静脉冠、脚蹼皮下静脉

大鼠、小鼠兔、犬、猫、猪、绵羊兔、大鼠、小鼠青蛙、蟾蜍鸡、鸭、鹅最中量血后肢外侧皮下小隐静脉前肢内侧皮下头静脉耳中央动脉颈静脉心脏断头翼下静脉颈动脉犬、猴、猫犬、猴、猫兔犬、猫、兔豚鼠、大鼠、小鼠大鼠、小鼠鸡、鸭、鸽、鹅鸡、鸭、鸽、鹅最大量血股动脉、颈动脉心脏颈静脉摘眼球犬、猴、猫、兔犬、猴、猫、兔马、牛、山羊、绵羊大鼠、小鼠不同动物采血部位与采血量的关系当前37页，总共56页。

常用实验动物的最大安全采血量与最小致死采血量

动物品种最大安全采血量（ml）最小致死采血量（ml）小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510家兔1040犬50200猴1560当前38页，总共56页。一、大、小鼠采血法1.剪尾采血2.鼠尾刺血法每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml，大鼠0.3~0.5ml。当前39页，总共56页。

3.眼眶静脉丛采血体重20~25g的小鼠每次可采血0.2~0.3ml；体重200~300g大鼠每次可采血0.5~1.0ml。内眼角当前40页，总共56页。4.心脏采血当前41页，总共56页。5.颈动静脉采血当前42页，总共56页。6、摘眼球采血当前43页，总共56页。二、家兔采血法

1.耳静脉采血当前44页，总共56页。2.耳中央动脉采血

当前45页，总共56页。3.心脏采血4.后肢胫部皮下静脉采血5.股静脉、颈静脉取血当前46页，总共56页。三、采血注意事项1、采血室内光线充足，温度适宜。2、采血部位采血用具应消毒。3、盛放血液的器具应清洁干燥。4、如果血液需要抗凝应预先在盛放血液的容器内加入抗凝剂。5、采血后应注意采血部位的止血、消毒。当前47页，总共56页。四、几种常用血液抗凝剂的配制及使用力法（一）肝素（二）草酸盐合剂（三）氟化钠当前48页，总共56页。（一）肝素1、作用机理抑制凝血酶的活力，阻止血小板凝聚2、使用方法（1）纯品肝素10mg能抗凝65ml—125ml的血液。（2）用1%肝素生理盐水溶液制作肝素试管。当前49页，总共56页。（3）动物全身抗凝大鼠3.0mg/kgw家兔10mg/kgw犬5.0mg/kgw

肝素可改变蛋白质等电点，当用盐析法分离蛋白作分类测定时，不可采用素。当前50页，总共56页。（二）草酸盐合剂配制：称取草酸铵1.2g、草酸钾0.8g、福尔马林0.1ml，用蒸馏水加至100ml。1、作用机理能够沉淀血凝过程中所必需