三七花总皂苷在制备促进血管新生的药物中应用

(19)民国(19)民国家知局(21)(22)(71)申请人中大学附属龙华医地址200032市徐汇区路725(72)发明人(74)专利机构元一成知识

(10)申请公布号CN(43)A61P9/14A61K133/00人A61K36/258A61P9/00A61P9/10(2006.01)A61P17/02(2006.01)A61P19/08权利要求书1权利要求书1页说明书4页附图3A中提取的活性部位三七花总皂苷在促进血管苷可作为的原料，进一步促进血管新生的药ACN

权利要求 1/1三七花总皂苷在促进血管新生的药物中的应[0003](angiogenesis) 家[0005](PanaxNotoginseng(Burk)F.H.Chen)家[0006]本发明的目的是提供涉及三七花总皂苷在制药中的新用途，具体涉及三七花总皂AB-8大孔吸附树（大学化工厂装柱径为1:10按每克生药1.25g干树脂上70%乙醇溶液及洗脱流速均为2倍树脂柱体积/h洗脱物蒸干后得到三七花蕾总皂苷的提褐色。以高效液相色谱分析法测得含量为95%以上。使用前用DMSO配制为100mg/ml储备液，0.22μm滤膜过滤，-20℃。[0009]本发明采用制得的三七花总皂苷，以三七（根）总皂苷为对照，进行对斑马鱼模 平滑的拱形结构； (B–D)浓度分别为 μg/ml的PNS(E–G)SanqiF浓度分别为2550、100μg/ml。箭头代表出芽肠下静脉血管； PN（50μgmlPNS（100μg/ml#P<0.001 2.（PNS）（SanqiF）VRI[0015]其中，(A)Control:0.2%DMSO2448hpfB)VRI500ng/ml（C-E2550100μg/m（F-H分别为μg/mlSanqiF24时PNS（AB0.2%DMSO48小时72hpf斑马（CH（C-H）再加药处理24小时后72hpf（a-SIVs1PNS（50μg/mlF（50g/lPNS（100μg/mlSanqiF（100μg/ml）对照，&P<0.05。 动物转斑马鱼Tg（flila-EGFP）y1，由美国ZebrafishInternationalResourceCenter（Oregon，PO）公司提供。斑马鱼依据zebrafishhandbook方法饲养。 药物试剂与仪器三七花云南科创中心提（产地云南选1:10的70%乙醇溶液洗脱吸附及洗脱流速均为2倍树脂柱体积/h洗脱物蒸干后得到三七花蕾[0022]内皮细胞生长因子受体抑制剂（VEGFreceptorkinaseinhibitorII,VRICalbiochem公司（Cat.No.676481溶解在DMSO中配制为500μg/ml储备液20℃储存；紫外可见光分光光度计UV8453Agilen奥林巴斯旋转盘共聚焦显微镜系统，Olympus产品。 正常健康转斑马鱼模型实验：选择状态良好，发育至24h的转斑马鱼，加入用DMSO溶解的 饲养箱里处理3h，然后用饲养液3~4遍，再加入用DMSO溶解的 [0025]在正常健康斑马鱼模型上通过统计肠下静脉血（SIVs）的光滑拱形结构出鱼数目除以总斑马鱼数目PNSSanqiFVRI（DLAVsISVs定义为完（intact而一些已经DAPCV延伸出但是并无与DLAVs相连的ISVs定义为缺陷型血（defective分别对每条斑马鱼的完整型和缺陷15mean±SD 4~6（1.A）μg/mlPNS（1.B-DSanqiF（如图1.E-G所示从24hpf处理到72hpf光滑的拱形血管出现了不同程度的的出芽血管数据分相同浓PNS的出芽率以及平均出芽数目SanqiF高，并且前者不具有浓度依SanqiF在50和100μg/ml浓度下均与相同浓度下的PNS表篮网的光滑拱形结内部有4~6根血ISVs区域完平均数目为28根，完好连接DA和DLAVs（2.A-A'-aVRI（如2.B-B'-b），ISVSIVsDLAVs均出现了明VRI空白对照组平均有2根完整ISVs3根缺陷型ISVs（如图2.C-C'-c所示50（如图2.D-D'-d所示100（2.E-E'-e所示）μg/mlPNS加药组4