张玉梅《医学微生物学》微生物-第35章肝炎病毒

第35章肝炎病毒Hepatitisviruses整理课件肝炎病毒（Hepatitisvirus）以侵害肝脏为主引起病毒性肝炎的病毒种类：甲型肝炎病毒（HAV）：小RNA病毒科嗜肝病毒属乙型肝炎病毒（HBV）：嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA病毒属丙型肝炎病毒（HCV）：黄病毒科丙型肝炎病毒属丁型肝炎病毒（HDV）：缺陷病毒戊型肝炎病毒（HEV）：杯状病毒科杯状病毒属GBV-C/HGV、TTV(输血传播肝炎病毒)整理课件肝炎病毒甲、戊型：消化道传播---急性肝炎，不转为慢性肝炎或慢性携带者乙、丙型：输血、血制品或注射器污染传播，除引起急性肝炎外，可致慢性肝炎，并与肝硬化及肝癌相关丁型肝炎病毒为一种缺陷病毒,需辅助病毒，传播途径同乙肝庚型肝炎病毒（HGV）、输血传播肝炎病毒（TTV），传播途径同乙肝整理课件项目甲型肝炎乙型肝炎丙型肝炎丁型肝炎戊型肝炎病毒HAVHBVHCVHDVHEV病毒分类小RNA病毒科嗜肝DNA病毒科黄病毒科缺陷病毒戊型肝炎病毒科基因组ssRNA（+）7.8kb

dsDNA3,2kbssRNA(+)10.5kbssRNA(-)1.7kbssRNA(+)3.5kb传播途径肠道传播肠道外及性传播多数肠道外传播多数和肠道外传播肠道传播潜伏期/范围（天）25/15～4575/40～12050/15～9050/25～7540/20～30慢性化无3～10%40～70%2～70%无暴发性肝炎0.2%0.2%0.2%2～20%0.2～10%五型病毒性肝炎比较整理课件HepatitisAvirus1973年Feinstone应用免疫电镜技术从急性肝炎患者粪便发现近年发现许多生物学性状与肠道病毒明显不同1991年国际病毒命名委员会将它重新分类为小核糖核酸（小RNA）病毒科嗜肝病毒属（新属）整理课件甲型肝炎病毒（hepatitisAvirus，HAV）整理课件生物学性状HAV为球形颗粒，直径27～32nm，二十面体立体对称无包膜。基因组为线状+ssRNA整理课件HAV的结构衣壳蛋白由VP1～3三种多肽构成衣壳蛋白具有抗原性（HAVAg）整理课件细胞培养：HAV可用猴肾、人胚肾细胞等进行增殖和传代，生长缓慢，不引起CPE易感动物：黑猩猩、南美洲猴、猕猴等接种后可出现急性肝炎抵抗力：较强对乙醚、酸、热（60oC）稳定。高压、紫外、煮沸等可灭活整理课件传染源多为患者和隐性感染者粪－口途径传播通过污染的水、食物、海产品、食具等传播HAV的致病性散发流行：以日常接触为主，临床多见暴发流行：水源或食物污染，尤其是生食毛蚶、蛤蛎等水产品整理课件粪－口途径口咽/唾液腺中早期增殖肠道与局部淋巴结大量增殖入血并形成病毒血症肝为最终靶器官（主要是免疫病理作用）通过胆汁随粪便排出致病机制10％整理课件整理课件（四）临床特点1.潜伏期：2～6周2.流行季节：散发病例-无明显季节性。3.临床特点：自限性，少数人出现黄疸，不发展为慢性暴发流行-雨水多、洪水泛滥的季节。流感样症状，消化道症状，尿黄、乏力整理课件整理课件微生物学检查早期可检测血清中抗－HAVIgM，HAV新近感染的重要指标流行病学调查可检测抗－HAVIgG已接种甲肝疫苗者检测中和型抗HAV抗体直接检测抗原用分子生物学方法检测病毒RNA整理课件甲肝的防治控制传染源隔离治疗急性期病人所有废弃物及日常用水均需严格消毒切断传播途径

养成良好的卫生饮食习惯水产品不宜生吃水果蔬菜要洗干净整理课件免疫预防免疫预防对象是未感染者，主要为儿童和与肝炎病人有密切接触者减毒活疫苗或灭活疫苗被动免疫可用丙种球蛋白整理课件HapatitisBVirus1963年Blumberg在多次输血的血友病患者中发现澳抗，1968年确认与血清型肝炎高度相关，1970年Dane在电镜下看到具有传染性的42nm病毒颗粒HBV在亚洲广泛流行，在中国约10%人口携带该病毒，全球约3.5亿慢性感染者。属嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA病毒属整理课件整理课件电镜检查血清标本可见小球形颗粒（22nm）、管形颗粒（22nmx50—700nm）、大球形颗粒（42nm）整理课件电镜下的HBV生物学性状（一）形态与结构整理课件Dane颗粒（大球形颗粒）Dane颗粒具有双层核壳结构：外壳为包膜，其表面有HBsAg，前S1，前S2内壳为衣壳，HBcAg，HBeAg核心内部含HBV的DNA和DNA多聚酶整理课件Dane颗粒（完整的病毒）形态HBsAgHBcAgHBVDNADNA聚合酶（外膜蛋白）（核衣壳蛋白）整理课件（二）HBV的基因结构与复制方式不完全双链环状DNA

长链为负链，至少含4个ORF：S、C、P和X区。

S区有S基因、前S1基因和前S2基因；

C区中有C和前C基因；

P区编码DNA聚合酶，有逆转录酶的活性；

X

区编码HBxAg，与肝癌的发生与发展有关整理课件短链为正链，长度为长链的50%～80%两条链DNA的5′端构成粘性末端粘性末端两侧分别有11nt组成直接重复序列（directrepeat,DR），称为DR1和DR2DR区是病毒DNA成环和病毒复制关键序列整理课件整理课件2.HBV基因组结构pre-s1pre-s2SPCpre-cXHBVDNA3.2kb编码pre-S1LHBs(PreS1抗原)pre-S2MHBs

(PreS2抗原)SSHBs(HBs)pre-CHBeAgCHBcAgPDNA聚合酶XHBxAgS区C区整理课件HBV的复制1.吸附、侵入、脱壳2.形成完整双环3.转录；翻译；4.装配5.逆转录负链6.复制正链7.成熟与释放整理课件HBV的复制吸附穿入脱壳dsDNA入核（+）DNA延长修补裂隙（-）DNA转录2.1KbmRNA外衣壳蛋白3.4KbmRNA（前基因组）内衣壳蛋白逆转录子代V（-）DNA（易整合）子代V（+）DNAdsDNADNA聚合酶0.7KbmRNA2.4KbmRNA3.5KbmRNA整理课件

抗原组成HBsAg和PreSAg是机体受HBV感染的标志由S区中S基因编码HBsAg有1个共同抗原决定簇a和2组互相排斥的亚型抗原决定簇d/y和w/r4种亚型：adr、adw、ayr、ayw我国内地和沿海各省汉族主要为adr型，少数民族多为ayw，欧美为adw抗HBs能与HBV表面结合，使其失去感染性，具有保护作用整理课件HBV核心抗原（HBcAg）在肝细胞核中才能检出，血中不易检出分子量22KD，由C区C基因编码，病毒内衣壳蛋白抗HBc无中和作用，非保护性抗体检出高效价抗HBc，特别是抗HBcIgM表示HBV在肝内处于增殖状态整理课件HBVe抗原（HBeAg）由PreC和C基因共同编码，15KDHBeAg是PreC经蛋白酶降解形成HBV活跃复制及具有强传染性的标志抗HBe对HBV感染有一定保护作用，预后良好征象PreC区可发生突变，出现变异株，对抗HBe（+）应检测血中HBVDNA整理课件易感动物和细胞培养：只有黑猩猩对HBV易感，体外细胞培养尚未成功，采用病毒DNA转染的细胞培养系统整理课件抵抗力：强对低温、干燥、UV、醚、氯仿、酚等均有抵抗性高压蒸汽灭菌、0.5%过氧乙酸、5%次氯酸钠、3%漂白粉液、0.2%新洁尔灭均可灭活病毒，但处理时间要稍长HBV其它生物学性状整理课件二、致病性与免疫性传染源：患者或无症状HBV携带者传播途径：血液、血制品、母-婴传播及接触传播临床表现：多样，有无症状带毒者、急性肝炎、慢性肝炎、重症肝炎等病毒并不直接引起肝细胞损伤，主要造成免疫病理损害整理课件致病与免疫机制（一）细胞免疫及其介导的免疫病理反应（二）体液免疫及其介导的免疫病理反应（三）自身免疫反应引起的病理损害（四）免疫耐受与慢性肝炎（五）病毒变异的免疫逃逸

整理课件致病与免疫机制（一）细胞免疫及其介导的免疫病理反应途径有三：1、CTL的直接杀伤作用2、T细胞产生和分泌多种细胞因子3、CTL诱导的肝细胞调亡作用后果：急性肝炎重症肝炎慢性肝炎在清除病毒同时又导致肝细胞损伤整理课件致病与免疫机制（二）体液免疫及其介导的免疫病理反应

1、产生抗HBsAb、PreS1-Ab和PreS2-Ab等保护性中和抗体，清除游离病毒、阻断病毒黏附

后果：形成抗原抗体复合物，导致III型超敏反应，主要导致肝外损害。肾小球肾炎、关节炎、急性肝坏死。临床表现为重症肝炎

整理课件致病与免疫机制（三）自身免疫反应引起的病理损害

HBV感染肝细胞后，暴露出肝特异性脂蛋白抗原（LSP），可作为自身抗原诱导机体产生针对肝细胞组分的自身免疫反应。后果：产生自身抗体，导致慢性肝炎

整理课件致病与免疫机制（四）免疫耐受与慢性肝炎当HBV感染者特异性免疫处于较低水平或完全缺乏时，机体既不能有效地清除病毒，也不能产生有效的免疫应答杀伤靶细胞，病毒与宿主之间和平共处，形成免疫耐受。

后果：临床上表现为无症状携带者和慢性持续性肝炎。

整理课件致病与免疫机制（五）病毒变异的免疫逃逸

变异可导致病毒的免疫学性状和机体特异性应答反应的改变，包括S基因、Pre-S基因、

Pre-C基因、C基因的变异。后果：造成慢性肝炎。整理课件病毒数量不多，应答正常急性肝炎痊愈病毒数量多，应答过高重症肝炎死亡率高病毒不断复制及释放，应答过低慢性肝炎肝硬化免疫应答强弱与临床表现及转归关系出现免疫效应双重性整理课件HBV与原发性肝癌（HCC）携带者发生肝癌的危险性比正常人高217倍X基因编码的X蛋白有反式激活作用，可反式激活原癌基因等，从而影响细胞周期，促进细胞转化，最后发展成原发性肝癌。动物实验整理课件乙肝五项的临床意义

HBsAg、抗HBsHBeAg、抗HBe抗HBc（IgM、IgG）1.HBsAg(+)：HBV感染的指标。见于急性、慢性肝炎和无症状携带者；抗HBs阳性机体对HBV获得免疫力，乙肝恢复期及疫苗接种者2.判断传染性： 血清中出现HBsAg、HBeAg和抗HBcIgM表示病毒复制，传染性强。

HBeAg转阴，表示病毒停止复制，传染性降低。前C区基因变异除外。

HBeAg是强感染的指标。三、微生物检查整理课件3.判断预后：

HBsAg阳性持续6个月以上，应考虑乙肝由急性转为慢性；HBsAg、HBeAg转阴抗HBs出现表示乙肝进入恢复期，预后良好4.PreS1、PreS2和抗PreS1、PreS2，临床上不做常规检测5.

HBVDNA:检测血清中HBVDNA是病毒体内复制和血清有传染性的直接指标整理课件病毒抗原抗体系统检测结果分析HBsAgHBeAg抗-HBs抗-HBe抗-HBcIgMIgG结果分析+-----无症状携带者++--+-乙肝急性期（传染性强，“大三阳”）+--+-+慢性乙肝，趋向好转，病毒低（或无）复制（“小三阳”）++--+/-+慢性乙型肝炎急性发作，病毒复制，传染性强--++-+/-乙型肝炎恢复期-----+既往感染--+---感染过HBV或接种过疫苗，有免疫力整理课件整理课件预防及免疫控制传染源，切断传播途径，保护易感者人工主动免疫：疫苗（血源性、基因工程、多肽或核酸疫苗)人工被动免疫：含高效价抗HBsAb人血清球蛋白（HBIG）

8天内有预防作用整理课件我国丙肝病毒携带者的比例在2%-5%随着年龄的增长，丙肝病毒携带率亦增高乙肝患者容易重叠HCV感染易感人群感染HCV后，慢性化的比例高达50%以上整理课件丙型肝炎病毒HepatitisCVirus球形，有包膜+SSRNA,主要在肝细胞内复制人类是HCV的天然宿主，体外培养困难抵抗力：不强对乙醚、氯仿等脂溶剂敏感。甲醛、紫外、煮沸等可灭活黄病毒科丙型肝炎病毒属整理课件

Hypervariable

region：包膜蛋白抗原性快速变异，引起免疫逃逸，慢性肝炎的主要原因，研制疫苗障碍capsidenvelopeproteinprotease/helicaseRNApolymerasec225’coreE1E2/NS1NS2NS333cNS4c-100NS53’HepatitisCVirusGenome整理课件HCV的致病性与免疫性传播途径似是引起输血后慢性肝炎和肝硬化的主要原因潜伏期：4-8周致病机制与病毒的直接致病作用和免疫病理损伤有关，易于慢性化急性肝炎、慢性肝炎、无症状携带者；诱发肝外损伤：肾小球肾炎免疫力不牢固HBV整理课件HCV的诊断及预防检查病毒RNA检测抗HCV，必须对献血员进行该项检测因HCV免疫原性不强及变异，目前尚无可用疫苗整理课件HDVPrevalenceHighIntermediateLowVery

LowNo

DataTaiwanPacificIslandsGeographicDistributionofHDVInfection我国丁肝感染率在1.6%-5%，西南地区感染率高整理课件丁型肝炎病毒（hepatitisDvirus，HDV）HDV是一种缺陷病毒，为球形。必须在HBV或其他嗜肝DNA病毒辅助下才能复制。基因组为环状