蛙心灌流实验报告

..1/7一、试验目的

试验二 离体蛙心灌流试验专业： 学习离体器官〔蛙心灌流的方法。观看理化因素对蛙心活动的影响。二、试验原理蛙心的灌流:蛙心无养分性血管,离体之后承受人工灌流的方法,仍可保持其陈代谢,心脏仍能有节律的自动收缩、舒张,并维持较长时间,心肌的养分是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。心肌：受体受体感动剂效应β1肾上腺素去甲肾上腺素心率增快、房室传导加速、心肌收缩力加强。M乙酰胆碱心率减慢、房室传导减慢、心肌收缩力减弱。1.任氏液：正常比照、KCl、NaH2PO4、Na2HPO4、pH值与蛙的组织液相近。灌流：灌流：灌流：5.1:10000E 灌流灌流心得安β1受体阻断剂,抑制肾上腺素与β1受体结合,E不能发挥作用。8.阿托品,Ach减慢心率,加速房室传导,增加心房收缩力。三、试验器材离体蛙心溶液、1:10000肾上腺素、乙酰胆碱、心得安、阿托品四、试验步骤任氏剂0.65%NaCl任氏剂0.65%NaCl2%CaCl2

任氏液清洗

任氏液清洗1%KCl 任氏液药物试剂任氏液清洗 任氏液清洗E 心得安+E阿托品+Ach 任氏液

Ach

任氏液清洗五、结果与分析/min：2.5g：1.1g图1 线/min：1.6g：1.1g图2 灌流脉搏曲线分析：细胞外液中Ca2+浓度降低,2期Ca2+内流削减,胞浆中Ca2+削减,心肌收缩力降低。/min：3.5g：1.1g图3 灌流脉搏曲线分析：心肌的舒缩活动与心肌肌浆中的钙离子浓度的凹凸有关。心肌肌浆网不。Na+Ca2+有竞争性抑制,Ca2+浓度上升,Ca2+增加,心肌收缩力增加。4期去极速度加快,心率增快。/min：3.4g：1.1g灌流脉搏曲线分析：K+Ca2+在细胞膜上有竞争性抑制,K+浓度上升,K+抑制细胞Ca2+转运,Ca2+降低,心肌的兴奋—收缩耦联作用减小,心肌收缩力减弱。/min：3.5g：0.9g5肾上腺素灌流脉搏曲线分析：肾上腺素与心肌细胞膜上的β1受体结合,心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性Ca2+浓度上升,心肌收缩力增加。而且肾上腺素使肌钙蛋白与钙离子亲和力下降,肌钙蛋白对钙离子的释放增加,肌浆网膜摄取钙离子的速度加快,钠-钙离子的交换增加,复极期向细胞外排出钙离子增多,心肌舒张速度增快,整个舒。/min最大收缩力：2.5g最小收缩力：1.1g图6 得安+E灌流脉搏曲线分析：心得安是β1受体阻断剂,能够抑制肾上腺素与β1受体结合,使E不能发挥作用,因此心率及心肌收缩力保持不变。/min：2.5g最小收缩力:1.1g图7 乙酰胆碱灌流脉搏曲线分析：乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合,心肌细胞膜K+通道的通透性增加,K+外流,Ca2+内流削减,心肌收缩力降低。同时乙酰胆碱可直Ca2+通道,Ca2+内流削减,心肌收缩力降低。..5/7/min：2.5g：1.1g图8 +Ach灌流脉搏曲线分析：阿托品是M受体阻断剂,能够抑制Ach减慢心率,加速房室传导,增加心房收缩力,因此心率及心肌收缩力保持不变。六、争论为何常用离体蛙心,而不常用离体哺乳类动物心脏做心脏灌流试验？蛙类的某些根本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相像之处,它的离体组、器官的生活条件比较简洁,易于掌握和把握,来源丰富且价格低廉。离体蛙心不需要恒温顺特别的供氧设备,因此常被选作心脏灌流试验。而哺乳类心脏生活,离体心脏灌流需要恒温环境,恒压或恒流灌流、供氧。试验影响因素多、设备多,心脏离体后存活时间较短。因此一般学生试验较少用哺乳类动物心脏做离体心脏灌流试验。离体蛙心为什么会节律性跳动？把离体和脱离神经支配、体液因素影响的动物心脏保持在适宜的环境中,在,这是由于心脏的静脉窦能自动按肯定的兴奋节律产生兴奋,并传导到心房和心室,引起整个心脏又节律的兴奋和收静脉窦能产生节律性兴奋是由于其自律细胞在复极完毕后,马上开头自动的缓慢的去极化,使膜电位渐渐减小,当到达阈电位水寻常,便爆发动作电位。蛙心插管插入心室时,是在心脏舒张期插入还是在心脏收缩期插入 ？为什么？蛙心插管插入心室时,应在心缩期插入。这是由于主动脉开口处有半月瓣,留神室收缩时,半月瓣正好翻开,此时主动脉与心室腔相通,插管简洁顺势插入心室。而在心室舒张期,半月瓣处于关闭状态,对插管产生阻力,不利于插入,强行插入易损难过肌组织。试验过程中,为什么必需保持蛙心插管内液面高度的恒定？液面过高过低会产生什么影响？在试验中,蛙心插管内液面的高度发生变化,心脏收缩曲线会发生相应的变。心肌缩短幅度和速度即受前负荷的影响,也受后负荷的制约。插管内液面高,在心室舒张末期是作用于心肌的前负荷,这个前负荷打算了心肌在收缩之前的初长度。因此依据心肌Starling心肌定律,液面高度的变化将导致心肌收缩强度的转变。心室开头收缩时,插管内液体产生的压力又成为心肌收缩时承受的后负荷,后负荷转变会使心肌收缩的幅度和速度发生变化。液面过高,心缩曲线幅度降低。过高的液面使心室前负荷超过最适前负荷,心肌收缩强度不在增加或下降。而过高的后负荷却使心肌缩短幅度和速度大大下降。液面过低,心室收缩曲线幅度也会降低,前负荷过小,导致心肌收缩强减小的。因此试验中选取一最适液面高度,并保持这一液面高度,以便取得较好的试验结果。任氏液为何能维持离体蛙心较长时间的跳动？怎样才能使离体蛙心存活时间长？由于任氏液是常规的生理代用液。它的组成与体液相近,具有能维持生物体的正常生命活动的功能。它与体液等渗具有一样的PH值,并含有能量、养分物,而且含有生物体心肌波动所需要的离子,如：K+、Na+、Ca2+等,并且等浓度,故能维持蛙心较长时间的跳动。可以通过用与蛙体液相近的生理代用液来使蛙心长时间存活。蛙心灌流时,蛙心