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文档简介

蛋白质测定操作方法

样品消化蒸馏和吸收滴定一、实验材料(样品消化)试剂:硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸(1)样品消化样品1g+0.4g硫酸铜+6g硫酸钾+20ml浓硫酸+玻珠数粒先小火炭化,无泡沫后,加大火力,液体变蓝绿透明,继续加热微沸30分钟45度角消化终点瓶口不能对着人盖上小漏斗YOURSITEHERE

在消化过程中,浓硫酸既可使有机物脱水后被炭化为碳、氢、氮;又能将有机物炭化后的碳转化为二氧化碳,而硫酸则被还原成二氧化硫,二氧化硫使氮还原为氨,本身则被氧化为三氧化硫,氨随之与硫酸作用生成硫酸铵留在酸性溶液中而氨则与硫酸结合成硫酸铵,留在溶液中。2NH2(CH2)2COOH+13(浓)H2SO4=

消化原理(NH4)2SO4+6CO2↑+12SO2↑+16H2OYOURSITEHERE消化过程中各种试剂发生的反应

浓H2SO4:

A:使有机物炭化,生成碳,碳将H2SO4还原为SO2B:强氧化剂

C:蛋白质与浓H2SO4生成NH3,CO2,SO2,H2OD:NH3与H2SO4生成硫酸铵YOURSITEHERE硫酸钾作用:

提高溶液的沸点,3400C提高到4000C,加快有机物分解。

K2SO4+H2SO4=2KHSO4

2KHSO4=K2SO4+H2O+SO3原因:随着消化过程中硫酸不断地被分解,水分不断逸出而使硫酸钾浓度增大,故溶液沸点升高。但硫酸钾加入量不能太大,否则消化体系温度过高,又会引起已生成的铵盐发生热分解而造成损失:

NH4)2SO4=NH3↑+(NH4)HSO42(NH4)HSO4=2NH3↑+2SO3↑+2H2O除硫酸钾外也可加入硫酸钠,氯化钾等盐类来提高沸点,但效果不如硫酸钾YOURSITEHERE硫酸铜的作用:

C+2CuSO4→Cu2SO4

+SO2↑+CO2↑CuSO4

+2H2SO4→2CuSO4+2H2O+SO2↑

A:

催化剂,加速氧化分解

B:

指示消化终点:待有机物全部被消化完后,这时溶液具有清澈的蓝绿色(如果还有硫酸亚铜存在,溶液将是褐色的。)

操作注意事项1.确保凯氏烧瓶的干燥2

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