检测的概述详解演示文稿

检测的概述详解演示文稿当前1页，总共43页。优选检测的概述当前2页，总共43页。一、HER2检测的概述

二、HER2检测前的最佳实验——组织处理及固定

三、HER2检测中的最佳实践——方法及流程

四、HER2检测后的最佳实践——结果判读

五、读片

六、HER2检测的质控及质保

HER2检测系列内容当前3页，总共43页。一、HER2检测的概述

二、HER2检测前的最佳实验——组织处理及固定

三、HER2检测中的最佳实践——方法及流程

四、HER2检测后的最佳实践——结果判读

五、读片

六、HER2检测的质控及质保HER2检测系列内容当前4页，总共43页。内容提要什么是HER2及其作用HER2检测的意义---乳腺癌&胃癌HER2检测的方法相关指南及检测现状当前5页，总共43页。

什么是HER2？当前6页，总共43页。HER2基因人类表皮生长因子受体-2基因HumanEpidermalgrowthFactorReceptor-2(HER2)Gene定位于染色体17q21编码跨膜受体样蛋白（HER2蛋白）,具有酪氨酸激酶活性HER2蛋白分子量185kDa的糖蛋白:细胞外区（配体结合区）跨膜区（传导信号）细胞内区（激酶活性）HER2细胞内细胞外细胞膜HER2当前7页，总共43页。

HER2状态HER2基因HER2信使RNAHER2蛋白HER2基因HER2信使RNAHER2蛋白HER2正常表达细胞(HER2–)(~2万个受体）HER2过表达的细胞(HER2+)(100–200万个受体）当前8页，总共43页。HER2阳性的定义蛋白水平(过表达):细胞表面HER2蛋白受体表达大量增加基因水平(扩增):

HER2编码基因于细胞核内拷贝增加IHCFISH当前9页，总共43页。10IHC0IHC3+IHC1+IHC2+当前10页，总共43页。正常HER2基因于DNA复制时若发生分子转换可能会转变成癌基因正常细胞：无基因扩增HER2阳性细胞：基因扩增FISHFISH当前11页，总共43页。HER家族——HER二聚体触发信号传导Cellmembrane基因转录提高细胞运动抑制凋亡细胞生长和增殖转移化疗耐药肿瘤生长EGFEGFREGFRTGFTGFEGFRHER2HER2HER3NRGNRGHER2HER4HER2HER2信号级联放大核膜IntracellularYardenYandSliwkowskMX.NatRevMolCellBiol2001;2:127–137.当前12页，总共43页。HER2过表达的结果正常HER2表达HER2基因扩增导致HER2过表达HER2过表达导致肿瘤增殖促进细胞的生长和增殖------肿瘤发生抑制细胞的凋亡诱导血管新生提高细胞运动能力,增强肿瘤的浸润转移作用MoasserMM.Oncogene,2007.26(46):6577FreudenberyJA,WangQ,Katsumata,etal.ExpMolPathol.2009.87(1):1当前13页，总共43页。14HER2检测的临床意义当前14页，总共43页。15HER2对乳腺癌的临床意义当前15页，总共43页。16肿瘤流行病调查－中国Incidence–Thenumberofnewcasesofaspecificdisease(peryear)Mortality–Thenumberofdeathsofaspecificdisease(peryear)当前16页，总共43页。早期乳腺癌患者*

HER2阴性(n=771) HER2阳性(n=189)HER2过表达对早期乳腺癌预后不利存活率(%)01260961201009080706050402436487284108时间等级检验p=0.0004

Wilcoxon检验p=0.0009*未经选择的I,II和III期乳腺癌患者时间(月)PaulettiGetal.JClinOncol.2000;18:3651–3664.Reprintedwithpermission.©2008AmericanSocietyofClinicalOncology.Allrightsreserved.当前17页，总共43页。HER2过表达会降低乳腺癌转移/复发患者的存活率DawoodSetal.JClinOncol201028:92–98.Reprintedwithpermission.©2008AmericanSocietyofClinicalOncology.Allrightsreserved.0.80.60.40.20.001224364860整体存活率确诊后时间(月) HER2阴性(n=1,782) HER2阳性(n=118)1.0当前18页，总共43页。HER2阳性与含蒽环类药物的化疗疗效相关FISH:乳腺癌HER2阳性(n=160)FISH:乳腺癌HER2阴性(n=460)CEFCMF整体存活率(%)p=0.681008060402000510p=0.061008060402000510时间（年）时间(年)CEF,环磷酰胺、表阿霉素和氟尿嘧啶;CMF,环磷酰胺、甲氨蝶呤和氟尿嘧啶CEFCMFPritchardKIetal.NEnglJMed2006;354:2103–2107.整体存活率(%)当前19页，总共43页。HER2过表达和（或）扩增与紫杉醇临床获益有关乳腺癌HER2-阳性乳腺癌HER2-阴性紫杉醇无紫杉醇

无病存活率1008060402000510

无病存活率1.00.80.60.40.200510时间(年)时间(年)紫杉醇无紫杉醇HayesDFetal.ASCOAnnualMeeting2006;Abstract510.HER2/紫杉醇相关性（p=0.0093）当前20页，总共43页。曲妥珠单抗有效改善HER2阳性转移性乳腺癌患者预后10080604020001224364860确诊后时间(月)存活率(%)DawoodSetal.JClinOncol2010;28:92–98.Reprintedwithpermission.©2008AmericanSocietyofClinicalOncology.Allrightsreserved.HER2阳性状态与患者存活率无关HER2阳性,曲妥珠单抗

(n=191)HER2阴性(n=1782)HER2阳性,无曲妥珠单抗

(n=118)一项回顾性研究数据显示，与HER2阴性乳腺癌相比，HER2阳性乳腺癌患者接受曲妥珠单抗治疗后的死亡率下降44%[多变量分析后危险比（HR）为0.56;95%CI0.45–0.69;p<0.0001]当前21页，总共43页。HER2状态对乳腺癌的临床重要性乳腺癌的HER2阳性率约为15–20%对于乳腺癌患者，HER2状态与无病生存期（DFS）及总体存活（OS）密切相关，是患者预后的重要预测因子HER2状态也可预测乳腺癌的药物治疗效果，包括对曲妥珠单抗治疗的反应对紫杉醇及蒽环类药物治疗的反应对三苯氧胺的耐药性CarlsonRW,etal.JNCCN2006:4(Suppl.3):S1–S22.

HER2状态评估对于确定患者是否接受抗HER2靶向治疗至关重要当前22页，总共43页。HER2对胃癌的临床意义23当前23页，总共43页。胃癌

世界第二致死癌症，中国为高发区早期诊断，较困难预后差，绝大多数患者直到晚期才出现相应症状约16%转移性胃癌或胃-食管肿瘤患者为HER2阳性(ToGA实验)24当前24页，总共43页。

HER2对胃癌患者预后的影响SongYetal.ChinJCancer2010;29:76–81.中国研究：晚期胃癌患者的生存率平均生存率(月)p有HER2过表达5.90.021没有HER2过表达12.6平均生存率(月)p有HER2扩增5.50.028没有HER2扩增12.6有或没有HER2过表达

(n=83)有或没有HER2扩增

(n=83)100806040200061218总体生存率

(%)*时间(月)100806040200061218总体生存率

(%)*没有HER2过表达有

HER2过表达没有

HER2扩增有HER2扩增时间(月)当前25页，总共43页。应用HER2靶向治疗药物进行化疗能突破进展型胃癌12个月平均总体存活时间EOX6XP7ECX6ECF6DCF4EOF6IF5FP4FAMTX2BSC1SP3BSC,最佳支持治疗;F,5－氟尿嘧啶;A,阿霉素;MTX,甲氨蝶呤;S,S-1;C/P,顺铂;I,喜树碱;X,顺铂;

E,表柔比星;O,奥沙利铂;

D,多西紫杉醇FP/XP+T8FP/XP+T(探索性)81.MuradA.M,etal.Cancer1993;72:37–41;2.VanhoeferU,etal.JClinOncol2000;18:2648–2657;3.AjaniJA,etal.ASCOGastrointestinalCancersSymposium2009;Abstract8;4.VanCutsemE,etal.JClinOncol2006;24:4991–4997;

5.DankM,etal.AnnOncol2008;19:1450–1457;6.CunninghamD,etal.NEJM2008;358:36–46;

7.KangY.K,etal.AnnOncol2009;20:666–673;8.BangYJ,etal.Lancet2010;376:687–697.061218时间

(月)FP/XP+T:IHC3+或FISH阳性的患者FP/XP+T(探索性):IHC2+/FISH阳性或IHC3+的患者当前26页，总共43页。ToGA研究提供的HER2阳性率的数据目标

人群(IHC2+/FISH+或IHC3+)探索性分析ToGA人群符合

ToGA资格(IHC3+和/或

FISH+)78%22%78%16%不符合

ToGA资格不符合

ToGA资格IHC0/FISH+或IHC1+/FISH+6%当前27页，总共43页。主要研究终点:OS（总生存）IHC3+orFISH+当前28页，总共43页。29主要研究终点:OS（总生存）IHC3+orIHC2+/FISH+当前29页，总共43页。HER2状态对胃癌的临床意义所有的胃或胃食管结合部癌患者都应在初次诊断时检测肿瘤的HER2状态。HER2在胃癌中过表达预示更差的疾病结局以及进展性更强的疾病类型准确的胃癌HER2表达和基因扩增检测结果是进展期胃癌HER2靶向治疗患者筛选和疗效预测的前提2010年，欧洲和美国先后批准化疗联合使用曲妥珠单抗治疗HER2阳性胃及胃食管交界癌患者KelleyJRandDugganJM.JClinEpidemiol2003;56:1–9.BangYJ,etal.Lancet2010;376:687–697.BangYJ,etal.JClinOncol2008;26:Abstract4526.GravalosCandJimenoA.AnnOncol2008;19:1523–1529.当前30页，总共43页。HER2检测对乳腺癌及胃癌患者得到正确诊疗有很重要的意义HER2检测的意义当前31页，总共43页。HER2常用检测方法当前32页，总共43页。HER2常用检测方法免疫组织化学(IHC):应用抗体检测蛋白过表达是乳腺及胃组织检测HER2状态的首要方式1原位杂交

技术(ISH):利用核酸探针检测HER2基因扩增，可用于复检经IHC检测难以确定结果的病例及疑难病例11.WolffACetal.JClinOncol2007;25:118–145.IHC：显示组织细胞蛋白质表达状态ISH：显示组织细胞基因的扩增状态当前33页，总共43页。实验室HER2检测方法总结IHC通过抗体检测HER2蛋白表达FISH通过荧光标记的DNA探针检测HER2基因扩增SISH通过DNP标记之DNA探针并通过后续显色反应(银染)来检测HER2基因扩增通过地高辛标记之DNA探针并通过后续显色反应(DAB信号)来检测HER2基因扩增CISH通过DNP标记之DNA和染色体着丝粒探针并通过后续显色反应(HER2银染及17号染色体碱性磷酸酶红染)检测HER2DualSISH当前34页，总共43页。HER2检测方法之优缺点检测方法优点缺点IHC大多病理实验室均采用，相对较易，较快，较便宜，可自动化操作，免疫组化切片保存较久并可反复检评可同时观察细胞形态检测结果易受检测步骤影响产生偏倚检测结果较主观，半定量FISH检测结果相对免疫组化更加定量化稳定性好可自动化操作检测价格昂贵，信号强度随时间衰减较难鉴定乳腺癌侵微小浸润灶不能同时观察细胞形态病理医生及技术员接受相关技术操作及检测结果分析的训练较少CISH与原位杂交相比较少受实验前分析及处理步骤影响操作较快，普通光镜观察即可染色长期稳定可同时观察细胞形态与荧光原位杂交相比技术较新，操作欠相关经验缺乏经验之人员较难分析检测结果检测HER2及CEP17拷贝数需制备不同切片SISH全自动显色原位杂交(自动图像分析)其他优点与显色原位杂交相同可检测HER2过表达之微小肿瘤灶(胃癌)可观察HER2异质性染色结果(胃癌）检测HER2基因及CEP17拷贝数需制备不同切片DSISH全自动显色原位杂交(自动图像分析)HER2及CEP17可于亮视野显微镜观察其他优点与显色原位杂交/银染原位杂交相同缺乏经验之人员较难分析检测结果多体性时较难分析当前35页，总共43页。国内外相关指南国外指南：ASCO/CAP乳腺癌HER2检测指南（2007）NCCN乳腺癌临床实践指南（2012）NCCN胃癌临床实践指南（2011）欧洲胃癌HER2检测指南（2011）国内指南：乳腺癌HER2检测指南（2009版）胃癌HER2检测指南(2011)36当前36页，总共43页。NCCN乳腺癌及胃癌