医学微生物学-第10章 肠杆菌科

第10章肠杆菌科(Enterobacteriaceae)

149所医院——118,868临床菌株；

G+34,208株(28.8%,葡萄球菌属20894,肠球菌属7977,链球菌属4058);G-84,660株(71.2%,其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和不动杆菌分别为21,780、15,097、13,928和12,165;肠杆菌科细菌分布于所有临床科室。卫生部全国细菌耐药监测网Mohnarin（2011）2一大群居住在人和动物肠道中生物学性状近似的革兰阴性杆菌。

至少有44个菌属，170个以上的菌种。

多数是肠道的正常菌群。少数为致病菌，是人类肠传染病的最重要病原菌（＜20种）。3454、抗原结构（1）O抗原：存在于脂多糖的最外层。核心多糖为肠杆菌科共同抗原、耐热。S-R变异。IgM。（2）H抗原：存在于鞭毛蛋白、不耐热。H-O变异。IgG。（3）荚膜抗原：存在于O抗原外围的多糖、不耐热。具型特异性。能阻止O抗原凝集现象。伤寒沙门菌的Vi抗原,大肠埃希菌k抗原。67第一节埃希菌属

Escherichia人类/动物肠道正常菌群,6个种。出生后数小时就进入肠道，并终生伴随。大肠埃希氏菌（E.coli）最重要。（1）提供营养作用的合成代谢产物---维生素B。（2）机会致病菌---肠道外感染。（3）致病性E.coli----胃肠炎。（4）指示微生物。8革兰阴性杆菌，多数有周鞭毛，菌毛，无芽孢，基因组大小差异大。兼性厌氧菌，浑浊生长，S型菌落。发酵多种糖类，多发酵乳糖，产酸/气，IMViC试验为++--，硫化氢（-），动力阳性。一、生物学特性9大肠埃希菌抗原（1）O抗原：＞170种，有交叉反应，某些

与腹泻和泌尿道感染密切相关。（2）H抗原：＞50种，基本无交叉反应。（3）K抗原：＞100种，多糖性质。10二、致病性和免疫性（一）致病物质1、粘附素特异性高使细菌粘附于肠道或尿道上皮细胞定植因子抗原、束形成菌毛（Bfp）、紧密黏附素、I型菌毛、侵袭质粒抗原2、外毒素志贺毒素I/II、耐热肠毒素a/b、不耐热肠毒素I/II溶血素A3、内毒素、荚膜、载铁蛋白、Ш分泌系统11换图T3SS1213（二）所致疾病（不是内源性感染）14粘附素肠产毒素性大肠埃希菌(enterotoxigenicE.COLI,ETEC)15·肠侵袭性大肠埃希菌(enteroinvasiveE.COLI,EIEC)症状像菌痢：发热、腹痛、腹泻、脓血、里急后重16肠致病性大肠埃希菌(enteropathogenicE.COLI,EPEC)17肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagicE.COLI,EHEC)181920肠聚集性大肠埃希菌(enteroaggregativeE.COLI,EAEC)微绒毛变短，单核细胞浸润和出血21菌株部位

疾病与症状致病机制ETEC小肠旅行者腹泻，婴幼儿腹泻，水样便，恶心，呕吐，腹痛，低热LT和（或）ST肠毒素，大量分泌液体和电解质EIEC大肠水样便，少量血便，腹痛，发热质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞（胞内）EPEC小肠婴幼儿腹泻最常见的病原菌，水样便，恶心，呕吐，发热质粒介导粘附和破坏上皮细胞（T3SS）EHEC大肠水样便，大量出血，剧烈腹痛，低热或无，可并发HUS、血小板减少性紫癜SLT-I或SLT-II，中断蛋白质合成(志贺毒素)EAEC小肠婴儿持续性腹泻，呕吐，脱水，低热集聚性粘附上皮细胞，阻止液体吸收引起胃肠炎的E.coli22在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标≤3个大肠菌群/1L饮水≤100个细菌总数/1ml饮水卫生学指标大肠菌群指数每1000ml水中大肠菌群数我国的卫生标准：细菌总数每1ml或1g样品中细菌总数23。。。。24抗原与分类——根据O抗原分类菌种群型痢疾志贺菌A1～10福氏志贺菌B1～6，X，Y变种鲍氏志贺菌C1～18宋内志贺菌D12526白介素1β、272829微生物学检查及时送检/暂用30%甘油缓冲盐水保存SS平板（无色透明小菌落）血清学反应（玻片凝集）最后诊断分离培养新鲜脓血便/肛拭双糖培养基（生化反应）快速诊断荧光菌球试验协同凝集试验30第三节沙门菌属（Salmonella）一大群人与动物肠道中的寄生菌两个种：肠道沙门菌和邦戈沙门菌肠道沙门菌：6个亚种，肠道亚种约1400血清型菌群菌型甚多，仅少数对人直接致病31沙门氏菌污染鸡蛋事件2010年明尼苏达州、亚利桑那州、伊利诺伊州、内华达州、得克萨斯州、威斯康星州、科罗拉多州、加利福尼亚州沙门氏菌病例猛增，数量是平时大约4倍；调查显示，多数病人食用鸡蛋后染病。这些鸡蛋可能遭沙门氏菌污染。鸡蛋召回数量起初为2.28亿枚，18日升至3.8亿枚，23日升至5.5亿枚问题蛋32一、生物学性状（一）形态与染色①革兰阴性菌，有菌毛。

②一般有周鞭毛，一般无荚膜，无芽孢。（二）基因组特征

①至少包含7个致病岛及大量前噬菌体。②SPI-1和SPI-2与Ⅲ型分泌系统有关。（三）生化反应与培养特性

①不发酵乳糖或蔗糖。②动力阳性。33一、常见沙门菌的主要生化特性34（四）抗原构造①

菌体抗原O：脂多糖中特异性多糖部分，引起人类疾病大多数在A~E组。伤寒沙门菌和副甲、肖氏沙门菌有交叉的抗原成分。如12抗原是刺激机体产生IgM②

鞭毛抗原H：分第1相和第2相第1相特异性高刺激机体产生IgG35伤寒、希氏沙门菌的表面抗原与毒力有关③Vi抗原抗原性弱，刺激机体产生短暂低效价抗体伴随活菌一起存在测定Vi抗体有助于检出带菌者因为所以本质36（5）抵抗力理化因素的抵抗力较差。对一般消毒剂敏感。对胆盐、煌绿等耐受比其他肠道菌强。存活时间：水中2~3周，粪便1~2个月。37二、致病性与免疫性（一）致病物质1.侵袭力：①III型分泌系统(SPI-I和SPI-II)

——介导沙门菌穿越肠粘膜M细胞到皮下固有层，被吞噬，但不被杀灭(Vi抗原抗吞噬）。②侵袭蛋白③耐酸应答基因、氧化酶、超氧化物岐化酶

——保护细菌不没杀伤④Vi抗原—微荚膜功能2.内毒素：宿主体温升高、白细胞下降、全身中毒症状。3.肠毒素：性质似ETEC（鼠伤寒沙门菌）38（二）所致疾病肠热症（伤寒和副伤寒）

传染源:污染食物

传播途径:粪-口传播

胃肠炎(食物中毒):是最常见的沙门菌感染

潜伏期6～24小时,常致集体食物中毒

鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌败血症

全身症状严重,但胃肠炎少见无症状带菌者

39胆囊----肠道-------粪排菌皮肤----血栓出血--玫瑰疹肾-----尿肝脾-----肿大骨髓相对缓脉伤寒沙门和甲型副伤寒杆菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌小肠上部粘膜肠系膜淋巴结

固有层淋巴结进入血液再次进入血液第一次菌血症第二次菌血症再次进入肠道局部坏死伤寒和副伤寒的致病过程40三、微生物学检查法伤寒病人不同病期血、粪、尿中病原菌和特异凝集素检出阳性率4142微生物学检查——血清学诊断

原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。用途：辅助诊断伤寒，副伤寒。1、肥达试验——诊断肠热症！43肥达试验的结果判断判断标准：O凝集效价≥1：80；

H凝集效价≥1：160；副伤寒H凝集效价≥1：80动态观察：恢复期效价增加≥4倍诊断意义：

OIgM,出现早，维持时间短——特异性强

HIgG,出现迟，维持时间长——特异性弱O高H高肠热症可能性大O低H低排除O高H低早期或有交叉反应的其它沙门菌感染O低H高预防接种或曾患过伤寒44防治原则

口服减毒活疫苗（Ty21a）分离病原菌查Vi抗体：≥效价1:10—反复便检2、带菌者检查45其他肠道杆菌克雷伯菌属--------医源性感染的重要细菌变形杆菌-----条件致病菌 食物中毒 多形性迁徙生长现象 分解尿素 外斐试验46肠道杆菌生化反应

乳糖葡萄糖动力硫化氢尿素酶大肠杆菌+--痢疾杆菌-+---伤寒杆菌-+++/--副伤寒杆菌-++-变形杆菌-+++47第11章弧菌属（Vibrio）48第一节霍乱弧菌（V.cholerae）（一）形态与染色液体中运动非常活泼呈穿梭样涂片中排列整齐呈鱼群状革兰染色阴性弧型或逗点状，单鞭毛（二）培养特性

耐碱不耐酸在pH8.8～9.0的碱性蛋白胨水/碱性琼脂平板上生长良好49（三）抗原构造与分型50（四）抵抗力51二、致病性与免疫性（一）致病物质（1）霍乱肠毒素（choleratoxin）

已知最强的致腹泻毒素，溶源性生长的噬菌体基因编码

A亚单位ctxA活性亚单位B亚单位ctxB与受体介导A亚单位进入细胞52B亚单位与小肠粘膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结合，介导A亚单位进入细胞致病机理A亚单位裂解为A1和A2两条多肽，A1亚单位发挥毒性作用53胞内cAMP↑，导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进，分泌Na+、K+、HCO3-和水，大量水和电解质在肠腔堆积，引起剧烈腹泻与呕吐G蛋白Gs活化腺苷酸环化酶ATPcAMPA1作为腺苷二磷酸核糖基转移酶NAD54鞭毛运动（2）鞭毛、菌毛及其他毒力因子普通菌毛有助于细菌穿过肠粘膜表面粘液层而接近肠壁上皮细胞是细菌定居于小肠所必须的因子O139型——抵抗血清中的杀菌物质多糖荚膜和特殊LPS毒素55上吐下泻：剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物），大量水分和电解质丧失低容量性休克和肾衰竭（死亡率高达60%）烈性肠道传染病，为我国的甲类法定传染病传播途径主要是通过污染的水源或食物经口摄入（二）所致疾病传染源患者及无症状感染者霍乱呕吐与腹泻并作，病