epa1613b中文翻译您可以自由链接、传播此_第1页
epa1613b中文翻译您可以自由链接、传播此_第2页
epa1613b中文翻译您可以自由链接、传播此_第3页
epa1613b中文翻译您可以自由链接、传播此_第4页
epa1613b中文翻译您可以自由链接、传播此_第5页
已阅读5页,还剩58页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

1613同位素稀释高分辨色质联4- 氯代二苯并二恶英及二苯并呋应用范 方法概 定 污染与干 安全 设备和器 试剂和标 样品、保存、和保持时 质量保证和质量控 校 样品前处 萃取及浓 净 HRGC/HRMS分 体系和效 定 定 复杂样品分 污染预 废弃物管 方法效 术语 参考文 附录图 应用范4-8氯代二苯并二噁英及二苯并呋喃(CDD/Fs。本方法可用于EPA相关数据的监测与收集。此类项目包括清洁水法(CleanWaterAct)、资源保护恢复法(ResourceConservationandRecovery、综合环境响应、补偿及责任行动法(ComprehensiveEnvironmental 、pensation、andLiability)及安全Act研机构的分析方法建立(1-6)本方法可分析表1172,3,7,8CDD/Fs2,3,7,8-TCDD、2,3,7,8-TCDF的方(MLs)是在无干扰的情下测得的。应用本方法2,3,7,8-TCDD的方法检出限(MDL)可达4.4pg/L。本方法中C/MS操作部分HRGC/HRMS专业人员或在专业人员的监督下由分析人员使用。为证明分析结果的可接受性,使用本方法的必须通过92节所述过程的验证。本方法是“基于效能的”。即允许修改以减少干扰或降低测试费用。9.1.2节提供了本方法的任何修改,除明确允许部分外,均应视为重大修改。修改内容应符40CFR136.4136.5方法概1、2、3分别给出了水及固体样品、多相混合样品以及生物组织样品的前处理、萃取萃水样(固体组分小于1):箱1L2,3,7,8取代CDD/Fs种同位素标记内标。并根据不同情况选择下述三种方法之一进样品无可见颗粒物时,使用二氯甲烷液液萃取或节所述的固相萃取技术(SPE。萃取液浓缩后净化。样品含可见颗粒物时,使用玻璃纤维滤膜真空过滤。滤膜使用SDS索氏提取器(见参考文献7)提取。滤出液使用二氯甲烷液液萃取。二氯甲烷萃取液浓缩后同SDS萃取液混合后净化。在SPE圆盘上置玻璃纤维滤膜,真空过滤水样后将SPE圆盘及滤膜SDS萃取,萃取液浓固体、半固体及多相混合样品(非生物组织:含10g(干重)固体的样品加入同位素标记内标。多相混合样品应加压过滤后弃去水相,粗大颗粒应研磨或均质化。多相混合样品中非水液体应同固相混合后SS索氏提取。提取液浓缩后净化。鱼或其他生物组织:20g10g加入同位素标记内标。平衡后加200mL盐酸及200mL二氯甲烷:正己烷(11。振荡12-24小时37C4-2,3,78-TCDD内标。样品净化可包括以下方法:酸/碱反萃取、凝胶渗透色谱(GPC、硅胶、Florisil以及活性炭净化。高效液相色谱(HPLC)可用于2,3,7,8取代的CDD/Fs或其他异构根据所采用的萃取步骤可能用到层析柱分离、硅吸附以及硫酸/碱反萃取净化。GC分离,每>10000CDD/Fs单体由以下方法定性,得到目标化合物的GC保留时间及其监测离子的2,3,7,8取代的CDD/Fs单体或同系物可以由保留时间及丰度比与预先定义的限值是否一致定性。如色谱柱能有效分离2,3,7,8-TCDD、2,3,7,8-TCDF及其他4氯使用选择离子流图(Selectedioncurrentprofile,SICP)定量分析,根据不同目有相应同位素标记内标的15种2,3,7,8取代的CDD/Fs单体(见表1GCM校正后,可使用同位素稀释技术计算各目标化合物浓度。1,2,3,7,8,9-HxCDD、 及同位素标记化合物,可使用内标法定量2,3,7,8取代CDD/Fs和给定氯化程度的同族物(如,总TCDD浓度,可使用相同氯化程度的CDD/Fs标准曲线得到的响应因子计算其浓度。分析质量由可重现的校正过程及对萃取过程、净化过程以及GC/MS的验证试验定见本方法篇末污染与干9璃器皿的正确与否极为重要。实际操作中,玻璃器皿使用后立即用溶剂淋洗并使用剂,玻皿放剂溶液中超声30秒有助于玻璃器皿净化。对于有可拆卸部件的玻璃器皿来说,特别是分液漏斗的PTFE活塞,在用剂前必须拆卸分解。剂后,应马上淋洗玻璃器皿。首先用甲醇,随后用热水,热水淋洗后再用甲醇、、二氯甲烷依次淋洗。由于对玻璃器皿的反复灼烧可能导致玻璃表面吸附CDD/Fs的活性位点增多,所以玻璃器皿的常规操作不应包括对玻璃器皿的灼烧。应尽量减少灼烧操作,只有当样品极脏时方可进行灼烧。使用前索氏提取设备应以甲苯萃取3小时(见12.3.1-12.3.3节)以二氯甲烷/甲苯(80/20)振荡2分钟,放空后再以二氯甲烷振荡分钟列(在12个小时内萃取过的样品,最多20个)运行中分析参考样参考样品应与测试样品类型尽可能相似。理想情况下,不得含有可检出的CDD/Fs。但是应含有与测试样品类型类似浓度的干扰组分。如样品含五氯萘时,可使用含五氯萘的脂肪参考样品检验净化系统。当模拟样品类型的参考样品不易取得时,试剂水(7.6.1可用于模拟水样,操场用砂或白石英砂(7.6.2)可用于模拟土壤;滤纸(7.63)可用于模拟纸或其他类似材料;玉米油(7.6.4)可用于模拟生物组织。浓度可能比CDD/Fs高几个数量级。常见的干扰物质有多氯联苯、甲氧联苯、羟基联苯醚、苄基苯醚、多环芳烃以及。由于本方法检测的CDD/Fs浓度极低,干扰物的去除十分重要。13节所列的净化方法可用于减少或降低干扰水平,从而能够在2所示的水平上进行可靠的分析。每个样品处理过程中使用的玻璃器皿均应编号,以每个样品的可能污染源。高度污染的样品其使用的玻璃器皿需要额外的或予以报废。生物组织净化:组织中的天然脂肪可能干扰组织样品中CDD/Fs型和位置的组织的脂肪组成差异很大。由于脂肪可不同程度的溶于各种种,其剂量可能超过净化柱的柱容量。应先使用13.7节的方法去除脂肪后再使用氧化铝(13.4)或Florisil(13.8、活性(13.5)作为附加的净化步骤。如果有多氯联苯醚检出,即其选择离子有检出时,必须使用氧化铝或Florisil净化来去除干安全本方法涉及的化合物和试剂的毒性或性目前尚未准确测定。但是,每种化合物均应视为有潜在的健康,应尽可能减少对这些化合物的接触。动物试验已证明2,3,7,8-TCDD有致痤疮、及致畸性。其在水中的溶解度为200ppt,在中为0.14%,根据目前已知的2,3,7,8-TCDD毒性和CDD/Fs只能由受过高度训练的专业人员操作,这些人推荐本方法中的稀释标准溶液。当使用储备液时,应在通风橱内操作。接触高浓度化后物时应佩戴NIOSH/MESA认证的防毒面具。有责任保存OSHA法令关于本方法中化合物的安全处理的通报文件。所有人员都应得到这些化合物的材料安全数据表(MSDS)的参考文件。其他关于的安全信息可在参考文献10-13中获得,参考文献13篇末所列的参考文献和书目涵盖了安全的常规内容。处理CDD/Fs及可能含有该类化合物可使用放射性或传染性物质的处理技术,其原理是一样的,即需要有良好通风、出入控制的。CDD/Fs对试验动物而言是高毒物质,必须针对该类化合物操作建立严格的安全制度。本方法高度推荐参考文献2和14对该类物质的操作。设备:当处理样品时(尘土、土壤、化学品固体,所有操作(包括装样、称重、转移及混合样品均应在密封手套箱或有足够风量的通风橱内操作。除非发生事故,分析和动物试验所用稀释标准溶液无呼吸毒性。防护装备:塑料手套、围裙或试验服,安全眼镜或面具、可用于放射性物质处理的手套箱或通风橱,由于分析操作可能导致灰尘和气溶胶浓度升高,试验人员应佩戴活性炭防毒面具。处理非密封样品或标样时,必须佩戴眼睛防护设备(全脸面罩尤佳。通常可使用乳胶手套减少手部皮肤外露。处理可能含有高浓度CDD/Fs的样品时,应在乳胶手套内再带一双手套。培训:必须培训工作人员使其能够掌握在不接触外表面的情况下去除被污染的手套和衣物。个人卫生:在操作后和休息前必须手及前臂限制:独立工作区域,应有说明。玻璃器皿及工具排气:气相色谱分流口及质谱初级泵排气应通过活性炭柱或含油或高沸点醇吸收管排出以收集CDD/Fs蒸汽。废物管理:污染废弃物产生最小化,密封罐内应使用塑料衬层。门卫及其他人员必须经受安全处理废物的培训。个人:使用中泡清洁剂即可玻璃器皿、工具及表面:三氯乙烷是已知毒性最低的有效溶剂。可先用三氯乙烷淋洗后以清洁剂和水。如果使用溶剂,污水排入下水管道后可能需要处理,考虑到处理成本,尽量减少废液是明智的。洗衣:被化学品污染的衣物应收集在塑料袋中,应向运送和衣物人员介绍其危害并培训合适的操作规范。当洗衣工人知道潜在的问题时,可以在不接触衣物的情况下将衣物送入洗衣机。在其他衣物前,洗衣机应空机运行一次。擦拭测试:检验工作仪器或工作台面洁净程度可以采用擦拭测试的办法。用滤纸擦拭测试表面,萃取后使用C/ECD分析。其检出限为0.1μg/每次擦拭。低于0.1μg/每次擦拭表明其清洁度可以接受。高于则必须进一步清洗。每次擦拭>10μg等同于急性毒性事故,在使用仪器或工作台前必须及时。台式/腕式振荡器:使用用于组织萃取的振荡器时,可能导致萃取瓶的破碎及酸液或的溢出。为避免破碎时酸液或溶剂飞溅,建议在振荡器旁加装二级密封装置,应调节振荡器的速度及强度以减少破碎的发生。设备和器 离散采样及复合采样用设液体样品(水、污泥及其他含少于5%固体的类似样品:样品瓶,最1.1L,螺纹口。固体样品(5%固体的类似样品:茶色广口瓶,最500mL。瓶盖:螺纹口,PTFE衬垫瓶使用试剂水,使用前用试剂淋洗衬垫用试剂水,试剂水淋洗后溶剂淋洗。使用前200℃烘烧自动或手动复合设备内含以上述步骤的样品瓶。只能使用玻璃或PTE内衬管道,如果采样器使用蠕动泵,只能在泵上使用尽可能短的硅橡。使用流量计按比例收集混合样品。样品前处理用设通风橱,应能容纳下述前处理设备手套箱(可选组织高速搅拌器:VirTisModel45Macro高速搅拌机或具有相同作用的其他绞肉机 或具有相同作用的其他型号产品湿度检烘箱:温控110±50.1mg,最高荷载10mg(译者注:疑误水量筒液液萃取:分液漏斗,250mL,500mL2000mLPTFE活1L过滤装置,包括玻璃漏斗、玻璃砂芯板、架子、接管、堵头、过滤烧瓶、真空管(图4)对污水样品可使用90或144mSPE圆可保持25inHg玻璃纤维滤膜:WatmanGMF150(或具有相同作用的其他型号产品.1固相萃取C18圆盘:Fisherer14-378F(或具有相同作用的其他型,SDS萃取装置(见图5):用于滤膜或土壤/污泥样品。索氏提取装置:内径50mm。容量200mL,500mL烧瓶套管湿度捕集:DeanStarkBarretPTFE电热套:半球形,可用于加热500mL组织萃取装萃取瓶(若使用盐酸消化)500-600mL具PTFE反萃取瓶:100-200mL具PTFE机械振荡器:腕式或平台式旋转振荡振荡器用支架:可同时振荡4-9个样烧杯:400-500mL刮刀:不锈钢制硼硅酸玻璃棉 索氏提取至少 小时(加热可能导致出现不可逆吸CDD/Fs的活性位点玻璃漏斗:125-250mL(6.5.2干燥柱:内 15-20mm。硬质玻璃层析柱,底部装有多孔玻璃板或玻璃棉布氏漏斗:直径15cm玻璃纤维滤膜:用于布氏漏斗6.5.5过滤烧瓶:1.5-2L,有边离心机:能够在最小5000rpm速度下旋转500mL离心瓶或15mL试管离心瓶:500mL,螺纹离心管:15mL,螺纹口自动凝胶渗透色谱(GPC600-700mm25mm70gSX-3Biobead 或具有相同作用的其他型号产品进样针:10mL,金属进样针滤器支撑:不锈钢。玻璃纤维或PTFE衬垫滤膜(Gelman或具有相同作用的其他型号产品UV反相高效液相色谱柱箱及检测器:Perkin-ElmerModelLC-65T0.02AUFs下235nm下操作进样口:Rheodyne7120,50μL样品2mL/分等速洗脱操作。泵 110A(或具有相同作用的其他型号产品巴斯德型:,长150mm,内径5mm型: 内径玻璃层析柱 液瓶(KontesK-20155或具有相同作用的其他型号产品。长 内径15mm。底部配有毛玻璃板或玻璃棉填充物及储液瓶300mm,内25mm。350mL储液瓶PTFE衬垫组织提取物硅胶净化搅拌装置机械搅拌器:CorningModel320样品瓶:500- 洁净广口玻璃瓶烘箱:活化或储藏吸附剂。温差±5℃,温度范 105-200℃旋转蒸真空泵:具蒸发器关闭阀和真空表水冷循环仪:推荐使用以节水圆底烧瓶:磨砂口,100mL或500mLKuderna-Danish(K-D)浓缩浓缩管:10mL,具刻度,磨砂活塞挥发烧瓶:500mL,使用弹簧同浓缩管连接Snyder柱:3:玻璃或碳硅化合物(10- 目)制,二氯甲烷萃取,450℃灼1:PTFE氮吹装置:水浴控制30-60℃,需安装在通风橱内样品茶色玻璃瓶:2- 衬垫,螺纹口玻璃样品瓶:0.3mL,圆锥型 衬垫,螺纹口或钳口瓶气相色谱:有不分流进样口或柱上进样口,程序升温,可等温停留。符合10节所GC(CDD/Fs2,3,7,8-TCDD分离60±5m,内径0.32±0.02mm,0.25μm。%5苯基%94甲基%1乙烯基交联熔融毛细管柱(J&WDB-5GC(CDD/Fs2,3,7,8-TCDF分离30±5m,内径0.32±0.02mm,0.25μm交联熔融毛细管柱(J&WDB-225或具有相同作用的其他型号质谱:28-40eV电子轰击。在高分辨状态(R>10000)下能够在1s内重复监测个选择离子。符合10所有的性能要求气质联机接口:质谱同气相色谱以接口相连,毛细管柱末端应能离子 对电子或离子流不会产生干扰数据处理系统:能够收集、记录、质谱数据试剂和标氢氧化钾:以100mL试剂水溶解20g盐酸:试剂纯,6N氢氧化钠:试剂纯,以试剂水5%(w/v)溶液溶液干燥:无水硫酸钠,试剂纯,颗粒状,用二氯甲烷淋洗后(20mL/g)400℃下烘烧至少1小时。干燥器冷却。以预先好的带盖瓶呈装。如果烘烧后呈现微灰色(由于碳晶体的存在,应弃去该批试剂。此时低温烘烧可能更组织干燥:无水硫酸钠,试剂纯,粉末状。处理和储藏同7.2.1高纯萃溶剂:、甲苯、环正己烷、正己烷、甲醇、二氯甲烷、壬烷。玻璃蒸馏农残级。抽样检测以确保白石英砂:60-70目,用于SDS萃取。450度下最少烘烧4GPC的硫溶液。硅活化硅胶:100-200目,Supelco1-3651(或具有相同作用的其他型号产品)以二氯甲烷淋洗后180℃活化1小时。干燥器冷却。以螺纹口洁硫酸硅胶(30w/w):在洁净瓶中完全44g浓硫酸和100g活化硅碱性硅胶:在洁净瓶中完全混合1N氢氧化钠30g和100g活化硅胶,在700-1000mL烧杯300mL甲醇溶解56g加入100g硅胶及搅拌子,60-70℃加热1-2在溶剂淋洗过铝箔上平展硅酸钾,通风橱内干燥1-2小时200-250℃下活化过夜氧化铝:使用1或2种氧化铝。酸性或碱性。用于样品萃取液净化。需满酸性氧化铝:Supelco19996-6C或具有相同作用的其他型号产品℃下活化12碱性氧化铝:Supelco19944-6C℃下活化24小时或使用管式炉空气流量400cc/分钟下650-700℃活化。不得超过700℃。否则会降低对目标化合物的吸附容量。130℃带盖烧杯保存。灼烧后5天内使用。CarbopakC:Supelco1-0258Celite545:Supelco2-019954(18%,ww小时,干燥器分离柱:使用下列试剂从下到上填充层析柱2g(硅酸钾2g(颗粒状无水硫酸钠2g(7.2.1硫酸硅胶10g(粉末状无水硫酸钠2gFlorisil:60-100500g24在标定移液管()锥形部分中塞入玻璃棉。依次填入(约2mL),无水硫酸钠1mL,玻璃130-150℃活化24小时,冷却30分钟,冷却后90分钟内使用参考样品:使用本方法不能检出含CDD/Fs及其干扰物质的环境样品类型。(译者试剂水:本地的瓶装水或过活性炭柱的水固体参考样品:操场砂或类似材料。二氯甲烷萃取后450℃下灼烧4小时纸参考样品:玻璃纤维滤膜(elanA型或具有相同作用的其他型号产品,剪)组织参考样品:玉米油或其他植物油,使用前可能需二氯甲烷萃取9.2在任何参考样品上验证。理想情况下,参CDD/FsCDD/Fs2MLs的3倍。如果参考样品中存在低浓度的CDD/Fs,9.2添加的分析物其添加量与背景值之比应在1:1到5:1之间。标准溶液:浓度、纯度及可靠度已认证的标准溶液或混合物,或有已知纯度或组成的化合物。如果化学品纯度>98%。计算标准浓度时不必校正重量的影响。标准在不使用时应以带TFE使用时用壬烷稀释或稀释溶液(CambridgeIsotopeLaboratories,CIL),或具有相同作用的其他型号产品)。注5节中的注意事项,以及5.1.2的推荐方在溶剂中溶解合适剂量的已定量参考物质。如在磨口容量瓶中称量1.000- 2,3,7,8-TCDD,正己烷定容。 完全溶解后转移溶液储备标准溶液应在使用前检查其是否降解。用于检查校正溶液的参考标准可由CIL或其他厂商获得。PAR液,稀释后即为PAR溶液(714。仅测定2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF时,仅包含2,3,7,8-TCDD2,3,7,8-TCDFPAR储备液(7.10.3仅测定2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF时,仅包含同位素标记的2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF的壬烷溶液,该溶液使用前用丙酮稀释(7.10.3使用稀释同位素标记溶液50倍。每个样品需要添加1.0mL该稀释溶液,337Cl4-2,3,7,8-TCDD壬烷溶液。净化内标于净化内CDD/Fs313C12-2,3,7,8-TCDD13C12-1,2,3,7,8,9- 内标的壬烷溶液2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF313C12-2,3,7,8- 内标的壬烷溶液校正标准(CS1-CS5):使用7.9-7.12所列的标准,以壬烷为溶剂如表4所示5种校正溶液。根据其浓度可计算得到相对响应因子和响应因子。CS3标准溶液可用于校正验证。仅测定2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF时,按合适的化合物混合 PAR标准(精密度和回收率标准(9.2)和进行时(15.5)的精密度和回收率。用稀释10μL精密度和回收率标准(7.9.1或7.9.2)至GC保留时间定义窗口及指定异构体测试标准:用于定义二噁英及呋喃同族物的起始时间。以及用于检测2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF的色谱柱的专一性。该5所列的化合物(CILEDF-4006,当仅需监测2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF时,不需监测窗口定义化合物。在这种情况下,可能需要使用指定异构体测试标准。该标准如表5所列(CILEDF-4033,含有保留时间相近的同族QC稽核样:QC稽核样来源应独立于校正标准的供应商。理想情况下,该稽核样样品类型应同代测样品类型相似,所含CDD/Fs浓度已知。溶液稳定性:用于定量用的标准溶液(7.9-7.15,在进一步使用前应周期性进行分析,并以参考标准定量(7.8.3)样品、保存、和保持时8.1按常规采样操作以茶色玻璃瓶样品(参考文献16。流动水样可使用自动采样器以冷冻瓶。固体样品用广口瓶。8.2水样后至运抵前应在0-4℃下保存。如果水样中有余氯存在,每升水样17pH值>9,使用硫酸调pH7-9。固体、半固体、油类及多相混合样品在后至运抵前应在-10℃以下保存。水样在-4℃下保存,固体、半固体、油类、混合相及组织样品在-10℃以下避光保存。鱼和其他生物组织样鱼可在现场洗净、切条或以其他方法处理。因此测试的样品可能是鱼体、鱼条或其他生物组织。的鱼组织必须以铝箔包裹,-4℃下保存送至收到样品后,处理前-10℃以下避光保存。未用样品应-10℃以下避光保存。目前尚未确定水体、固体、半固体、生物组织以及其他环境样品类型的CDD/Fs的最长保存时间。如果按上述方法04℃避光保存。水相样品可以保存一年。同样固体、半固体、生物组织以及其他环境样品类型样品在-10℃下避光保存,保存时间可达一年。样品提取物在分析前应-10质量保证和质量控采用本方法的应有正式的质量保证程序(参考文献18,该程序至少应包括如下部分:分析能力初始验证,分析加标样品评估归档数据质量。分析空白及标准品以验证其持续效能。执行效能同已建立的性能准则比较以判断分析结果如果在非水环境样品中应用本方法(,应在所有的性能测试试验中采用最合适的替代样品类型(762-7.6.5)替代试剂水(7.6.1分析人员应验证本方法的精密度和准确度。验证方法 9.2每次对本方法作修改时,分析人员都应重复9.2步骤。如果由于分析方法的修改影响了方法检出限。需要验证MDL(40CFR136附录B)低于符合限或最小水平(MLs)的1/3。如果修改影响了校正曲线,分析人员必须按10节重新校正仪器。分析人员及质量控制员的名字、职务、联系地址及按名称和CAS号列出所检测的化合物修改原因说修改方法和本方法所有的比较,包括校正曲线(10.5-校正验证初始精密度和回收率标记内标回收率空白分析数据应有独立评价者通过仪器输出(峰高、面积或其他信号得到最终结果来验证。这些数据包括:分析序列和运行样品重量和体积净化前萃取液体积净化后萃取液体积进样前萃取液体积进样体积稀释数据,样品及萃取液稀释倍数应分别列出仪器和运行条件色谱柱(长度、固定相、载体、膜厚等操作条件(温度、程升程序、流速检测器(类型、操作条件等分析方法空白以验证无污染(43。方法空白分析的步骤及准则如9.515.6应在所有样品种添加同位素标记内标以监测方法效率。该测试如9.3所示。当添加内标结果显示分析异常时,样品应稀释以得到合理的方法限值。稀释方法如175所示。应在试验进行时通过对校正验证标样及持续精密度及回收率标(OPR)的分析来验证分析过程是否受控,验证过程如15.1-15.5所示应保存QC记录。精密度如9.4所示陈对低固相样品而言(水相,使用11-18的步骤萃取、浓缩、分析4个添加同位素内标(7103)和PR(714)的水样。对替代参考样品(76)而言。分析4个替代参考样品。所有参考样品处理步骤与实际样品处理步骤相同。(11(12(13。4个萃取液分析结果的平均浓度(X),以ng/mL表示。计算其标准偏差,以ng/mL表示。使用同位素稀释法计算有同位素标记内标的CDD/Fs,使用内标法计算1,2,3,7,8,9-HxCDD、OCDF以及同位素标记内标。CDD/Fs6IPRsX进行比较。当仅测定2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF时,其应符合表6a的标准。如果所有化合物的和X值符合接受准则,分析性能可以接受。并可以开始空白和样品分析。如果某种化合物s和X超出精密度和准确度的要求。那么对该化(9.2应向所有样品添加同位素标记化合物添加液(7103)以评价该样品类型下方法的性能。使用11-18使用内标法计算同位素标记化合物和净化内标的回收率百分比(17.2)当测定所有2,3,7,8- 时每种同位素标记化合物的回收率必须符合72,37,8-TCDD和2,37,8TCDF时,其应符合表7a的标准。当其回收率低于限值时,该样品的相对应化合物的分析效果无法接受。为克服此。应以184的方法分析其稀释样品。分析5个同位素内标通过9.3测试的相同类型样品(水、土壤、污泥及纸浆样品等)后,计算其平均回收率(R)及回收率百分比的标准偏差(SR。将评定结果以回收区间表示,即(R-2SR-R+2SR。如5个纸样的同位素内标90,标准偏差为10%,则其回收区间为70-110%。每种样品类型的准确度评估应定时更新(如分析5-10个新样品后方法空白:参考样品空白方法以验证分析过程无污染每样品系列(萃取后12个小时内处理的同样品类型样品,最多20个)应前处理、萃取、净化、浓缩一个方法空白。方法空白样品类型应与样品系列中的样品类型类似。如试剂水空白(7.61、固体参考样品空白(762、纸样品类型参考空白(7.63、组织样品类型参考空白(7.64、替代样品类型参考空白(7.6.5。在分析OPR后(15.5)立即分析参考样品空白以验证无污染。当空白中检出表1所列的CDD/Fs任何一种且其浓度大于检出限或容许限的1/3,或有任何其他潜在干扰组分检出,该干扰组分大于表2所列的各氯化程度最小水平时(113C12-1,2,3,4-TCDD的响应因子假设为1),样品分析应暂停直到该样品系列空白在该水平上无污染为止。当报QC稽核样:定期分析QCQC稽核样品至少每一季度核当仪器设备正确校正并在校正状态时,可以达到本方法所含指标。用于校(10、校正确认(153、IPR(9.2)以及OPR(15.5)的标准为同一标准溶液,因此能够得到最精确的结果。在本方法分析CDD/Fs设置和条件下,GC/MS能够提校推荐GC操作条件:接口温度:290℃初始温度:200℃初始时间:2min升温程序:200-220℃5℃/min 235-330℃5℃/min优化GC条件来提高目标化合物的分辨率和灵敏度。在标准、空白IPR、以及样品的分析中都应使用优化完成后的GC条件质谱(MS)分辨率:分辨率>10000时,根据8选择监测离子分析CDD/Fs的单标或混标,得到如表3所示的选择离子流图(SICP),以验证在相邻的流 CDD/Fs的分析时间可能超过HRMSHRMS在高分辨模式下工作。质量漂移几个ppm(如5个ppm)就有可能对操作造成极严重的影响。因此必须使用PFK的锁定离子进行8中每个描述苻中所监测的离子选择合适的锁定离子。调节进入HRMS的PFK的量,使锁定离子m/z的信号最大值不高于给定参数下偏转全程的10%。在这种条件下,可以有效的监测灵敏度的变化。如果HRMS具有实时监测分辨率的功能,允许在分辨率低于时中止检测以节省再分析时间83-5个参考峰离子监测并记录其分辨率。分辨率必须≥10000,且m/z的监测值与5ppm。离子丰度比、最小水平、信噪比以及绝对保留时间:根据HRGC/HRMS的容量选择进样体积12μL,10.1.1GC条件下进CS1标准溶液(4)12μL。仅需监测2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF时,下述操作条件和指标仅适用于2,3,7,8-TCDD2,3,7,8-TCDF即可SICP89的理论每个描述苻中需监测的离子如表8所示。根据GC保留时间相继监测个描述苻中的监测离子以保证能够检测到所有的CDD/Fs。倘若能够监测在给定保留时间窗口内出现的所有CDD/Fs,可在各描述苻中选择其他监测离子检测或将监测离子分在表8外的描述苻中。仅需监测2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF时,可能要修改描述苻使之仅包括4-5氯代的CDD/Fs、联苯醚以及锁定离子。每组锁定离子如表8所示。在各自的保留时间窗口内,锁定离子变化不得超过2020%说明有干扰物存在,这将明显降低质谱仪的灵敏程度。重新进样无法解决这个问题,只能通过其他净化步骤来去除干扰。CS1标准中所有CDD/Fs及同位素标记化合物的离子丰度比应符合表9的QC限。否则应调节质谱参数并重新测试直到符合要求为止。如果调节引起分辨率改变的话应在测试前重新验证分辨率(10.1.2。验证HRGC/HRMS满足表2的最小水平。S1标准中所有CDD/Fs及同位素标记化合物色谱峰的信噪比必须≥10。否则应调节质谱参数并重新测试直到符合表2要求为止。13C12-1,2,3,4-TCDD(7.12)其在DB-5柱上的绝对保留时间应超25分钟。DB-22515GC升温保留时间窗口:采用10.1优化后的升温程序分析窗口定义混标(7.15。表5给出了窗口定义化合物的流出顺序。仅需监测2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF时,本步异构体专一使用步骤(14节)分析指定异构体测试标准(715如图67所示分别计算与2,3,7,8-TCDD/Fs25%(6,7100x/y。如果峰谷高度大于25%,调节分析条件重复测试或更换色谱柱重新校正(10.2-107。同位素稀释法校正:同位素稀释法用于15种在萃取前加入同位素内标额2,3,7,8-TCDD/Fs。每CDD/Fs的参考210.5.1浓度范围内目标化合物的校正曲线。使用线性回归做出标准溶液的58定义的初级和二级监测离子的峰面积计算每个CDD/Fs同其内标物RR(A1n A1lA2l=标记化合物的初级和二级监测离子的峰面积之和Cn=校正标准中CDD/Fs单体的同位素稀释法校正分析系统。根据10.2选择进样体积,采用14节的方法如果每种化合物的在5点校正曲线相对响应因子一致(偏差系数小于20对该化合物采用平均相对响应因子,否则需使用 点校正曲线来进行校正内标法校正:内标法用于检测1,2,3,7,8,9-HxCD(17.1.OCDF(17.1.1取代的CDD/Fs。以及同位素标记化合物(可用于间比对,9.4节与15.5.4RF(A1s 其中:A1s和A2s=CDD/Fs单体的初级和二级监测离子的峰面积之和A1isA2is=内标化合物的初级和二级监测离子的峰面积之和Cis=校正标准中内标的浓度(4)Cs=校正标准中CDD/Fs单体的浓度(表内标法校正分析系统。根据10.2选择进样体积,采用14节的方法及10.1.1节2CS1-CS5标样(7.13节4。计算每个浓度下的线性:如果每种化合物的在5点校正曲线响应因子一致(偏差系数小于%。对该化合物采用平均相对响应因子,否则需使用5点校正曲线来进行校混合式校正:使用标准溶液(7.13及表4)建立一组同位素稀释和内标法校正曲线。每个批次使用校正标准(VER表4)校正一次。如果偏离任何校正准则的话(15.3)应重数据:质谱数据应、记录并10.8.1:监测过程中监测离子的信号应独立并在大容量介质上108.2响应因子和多点校正:数据系统应能记录并保存响应因子表及多点校正曲线。计算相对标准偏差以测试线性。IPR(9.2)及OPR(15.5)的效能统计应保存在仪器数据系统或独立的计算机中。样品前处样品前处理通过改变样品物理形态以便更有效的进行萃 CDD/Fs。通常样品形应为液体或均匀磨细的固体。表10列出了不同样品类型下各相的推荐萃取量。对已知或可能含有高浓度的CDD/Fs而言。可选择有代表性的样品并减少用量。对所有样品而言,空白、PR、OPR必须使用同样品处理相同的步骤来检查污染及损失。CDD/Fs可能吸附在悬浮颗粒物上,所以水样的前处理同其水样中不含可见颗粒物采用11.4前处理并直接使用SPE或分液漏斗萃取(12.1和122。111.412.2SPE萃11.4.3过滤,过滤后使用12.3SDS萃取颗粒物及滤膜,滤液使用12.1的步骤液液萃取。如果水样中固体颗粒物含量大于111.5所示取10g固体颗固体样品使用11.5步骤处理,以12.3的SDS步骤相,当样品中含有机相时,CDD/Fs在有机相中存在。 给出了研磨均质化以及不同样品相的混合步 给出了鱼及其他生物组织的前处理步骤悬浮颗粒物百分比测干燥并称重GF/D滤膜(6.5.3)至3位有效数值滤膜过滤10±0.02mL混合样在110±5℃下烘烤至少12%固体干燥后样品重量滤膜重量非水液体、固体、半固体样品及主相非水相多相样品(非组织在配衡烧杯上称取5-10g样品,3位有效数字在110±5℃下烘烤至少12固体 固体 从11.2.2估计样品颗粒物尺寸,如最大颗粒直径大于1mm必须在萃取前使用11.7的步骤降低至1mm以下。悬浮物小于1水样中不含可见颗粒物时如下处理并直接使用SPE或分液漏斗萃取(12.112.2112.2SPE萃11.4.312.3SDS12.1的步骤液液萃取。SPE后使SDS萃取滤膜SPE圆盘。QC标记样品瓶上样品体积。称量样品及瓶重量1mL稀释同位素标记内标添加样。盖紧瓶盖后仔细振荡混合样品。平衡样品1-2小时,不时振荡。对在12小时内萃取的每组样品而言(每组最多20个),放置两瓶1L7.10.3向另一瓶加入PAR溶液1mL(7.14)该试剂水作为OPRSPE时,向样品中加5mL甲醇。振荡后使用12.2节步骤萃取操作。不使用SPE且样品中不含可见颗粒物时,使用12.1步骤萃取。不使用SPE且样品中含可见颗粒物时,使用下述步骤过滤颗粒物在过滤瓶上安装布氏漏斗(6.5.5。抽真空后将过滤样品倒入布氏漏使用 试剂水淋洗样品瓶两次。使得瓶内所有颗粒物转移到称量空样品瓶(精确至±1g使用12.1悬浮物大于1称重样品的等分试样(样品类型相同10g固体样品(基11.2的固体方法。向样品中加入同位素标记添加标准(7.10.3)1mL对在12小时内萃取的每组样品而言(每组最多20个,在烧杯称取两份参考样品。每份10g。7.10.3方法空白,另一瓶加入PAR溶液1mL(7.14)作为OPR样品。搅拌平衡样品1-2小时样品中颗粒物粒径大于1mm(11.3.2所示),将颗粒物平摊在洁净铝箔上。通(11.711.2.111.2.2测定样品中固体百分比含量。10g固体的样品量,样品体积最多为1L。使用GF/D(6.5.3加压过滤1.6.1所用剂量的样品,使用同样方法过滤空白和OPR。如果有必要分离各相及静置沉淀固体组分时,过滤前离心分离。弃去水相部分。保存滤出样品非水液体的最大数量或10g(选择其较小值)以同固相混合(12.3.5。样品中有大于1mm的颗粒且样品可以燥时,将颗粒物平摊在洁净铝箔上。通风橱内干燥后研磨(11.7)若样品不能燥,使用11.7步骤。使用SDS步骤(12.3)萃取研磨后样品,如果样品中无大于1mm颗粒时,使用SDS步骤(12.3)萃取样品QC样。样品研磨、均质化或混合:当样品中有大于1mm的颗粒时,(11.3.2检测,应研磨、均质化或混合。对小于1mm的颗粒应根据样品类型选择的方法。通常,较硬的各种样品类型的处理步骤在进行分析前需由9.2所述步骤验证研磨均质化及混合步骤应在手套箱或通风橱内进行以避免颗粒污染冷冻样品至冰点或干冰、液氮温度会有所助益。在洁净磨粉机中研磨样品时(11.5.7、11.6.4,样品温度不得高于50℃。在洁净磨粉机中研磨空白及参均质化或混合:当颗粒物未被有效研磨或研磨后仍有大于1mm的颗粒物存在时,应使用高速均质机后搅拌机。均质化或样品、空白及OPR(11.5.7,1.6.4使用SDS步骤(12.3)萃取试样鱼或其他生物组织:在处理组织样品之前,在进行组织样品处理之前,必须确定要分析的组织部分。对鱼分析而言,包括全鱼(有皮、全鱼(无皮、可食用鱼片(现场或切片。确定分析组织后,样品必须均质化。均质在冷冻状态下均质化样品。当需解剖样品以获得待分析的组织时,未用部分应立即冷冻并放于洁净瓶冷藏保存。分析用量为10g(湿重。因此,必须均质化至少20g组织以便获得可高速搅拌器(6.3.3)或绞肉机(6.3.4)块样品切成小片,为保证均质化应研磨3次转移大约10g(湿重)均质化样品到配衡后的烧杯(400-500mL)中。若使用替代的盐酸消化方法,则使用500-600mL的广口瓶。重量精10mg。转移剩余的均质化样品到以PTFEQC 向400-500mL烧杯中加入10g油性参考样品方法空白(7.6.4)。若使用替代的盐酸消化方法,则使用500-600mL的广口瓶。称量精度至根据使用萃取步骤向400-500mL烧杯或广口瓶中加入10g油参考样品(7.6.4向样品、空白及OPR中添加1mL同位素标记内标添加液使用12.4萃取及浓萃取过程包括处理水相的液液萃取(12.1)和固相萃取(12.2);处理固相、滤膜及SPESDS12.3)以及处理组织的索式提取(12.4.1)和盐酸消化(12.4.2)。酸碱反萃取(12.5)用于净化萃取液。大体积浓缩过程包括旋转蒸发(12.6.1)、电热套(12.6.2)及KD浓缩仪液液萃取:将加标样品()或滤液()转移至2L分液漏斗中,使用5mL试剂水向空样品瓶中加入60L二氯甲烷(1211),密封后60s以淋洗内表面。转移溶剂至分液漏斗中,摇晃漏斗2分钟萃取样品,周期性放气。静置最少10分钟使有机层同水相分离。如果有层生成且大于溶液体积的1/3用机械分离(见注释。玻璃漏斗以玻璃纤维滤膜呈装约一半体积的无水硫酸钠(7.21),使用适当溶剂淋洗后加入二氯甲烷萃取液,以溶剂浓缩装置(126)接收。固相萃取或其他萃取技术可用来避免层的产生。只要符合9节要求,可以采用任对溶解有机物的水样(如造纸厂排放物处理经验表明,萃取前酸化水样助于减少层产生。造纸厂排物的分析方法建每升排出加入400L甲醇来减少层。EPA研究表明这会导致稀释样品,加入试剂酸化时,必须使用92节测试验证。使用60mL二氯甲烷萃取水样2次以上,无水硫酸钠干燥后浓缩。第三次萃取后以最少20mL二氯甲烷淋洗分液漏斗。无水硫酸钠干燥淋洗液。重复淋洗使用12.6如果萃取液不含可见颗粒(),使用正己烷调节浓缩体积为10mL,转移至250mL分液漏斗中反萃取(12.5)。如果为滤液萃取液(),同SDS萃取液(.2)SPE(参考文献19-滤膜放在SPE圆盘上时,使用甲苯润湿滤膜后放在圆盘上。应避免滤膜与圆盘之间有空气存在。使用如图4固定圆盘、滤膜。使用塑料洗瓶或玻璃针筒以15mL甲苯淋洗滤瓶内壁。打开真空泵直到圆盘底部有液滴出现,放空真空,待甲苯浸泡滤膜及SPE圆盘1分钟后重新抽真空排出甲苯。使用重复步骤。滤膜及SPE圆盘15mLSPE圆盘。浸1分钟后排出甲醇。但需保留1mm厚的甲醇,此时至萃取结束前圆盘应一直保持湿润。使用试剂水淋洗滤膜及SPE圆盘两次,每次50mL,在滤膜上方应保留萃倒入待处理样品(加标样品()、空白()或IPR/OPR试样())10分钟。对于含颗粒浓度高的样品而言,过滤时间可能要8h甚至更长。在全部样品通过滤膜之前,使用约50mL试剂水淋洗样品瓶,淋洗液加入SPE装置,直到样品瓶无可见颗粒物为止。在全部样品通过滤膜之前,使用约50mL试剂水淋洗滤瓶瓶壁直到滤待滤膜/圆盘干燥后取下放入有盖培养皿中保存,以12.3萃取12.3.1向洁净萃取套管()内加入100/200目硅胶5.0g(),上置100g石英砂(7.3.2)。将套管放入提取器向接收瓶中加入30-40mL甲苯,向烧瓶中加入200-250mL加热烧瓶使甲苯沸腾以预提取提取器。调节使接收瓶中甲苯流速为-2d/s。至少应萃取提取器3使用洁净金属匙向套管沙层中加入湿样、滤膜、圆盘(、11.5.811.6.4、11.7.3、11.7.4)及非水液体样品(11.6.3)并混合,重新安装预提洗过的SS。加应减小回流速度移出蒸馏烧瓶,排出Dean-Stark接收瓶的水份。并将接收瓶中的甲使用旋转蒸发器(12.6.1)或电热套(12.6.2)浓缩颗粒物萃取液至10mL,转移至250mL分液漏斗进行反萃取操作(12.5)。颗粒萃取液(含少于1%颗粒物水样用旋转蒸发器或电热套(12.6.1,12.6.2)浓缩萃取液至5mL将萃取液通过备用的无水硫酸钠分液漏斗(12.1.3定量转同滤液萃取液(12.1.42)合并,再次浓缩至5mL。10mL250mL分液漏斗颗粒物萃取液(11.511.6SPE园盘及滤膜萃取液():使用旋转蒸发器或电热套(12.6.112.6.2)浓缩10mL,转移250mL索氏提取(参考文献 向烧杯中加入30-40g粉末状无水硫酸钠(11.8.4)混合均匀。以铝箔包12-24小时,在萃取前应摇匀以防有结块产生。 安装并预萃取索氏提取装置(12.3.1-12.3.4),萃取和淋洗溶剂为二氯甲烷:正己烷(1:1)混合液且不使用石英砂,需要时也可以省略Dean-Stark湿度捕集器。拆分索氏提取装置,向回流烧瓶中加入新鲜的二氯甲烷:正己烷混合溶液。转移样品/无水硫酸钠混合物(12.41.1)到索氏提取器套管中,将套管装入索氏提取器。使用淋洗溶剂淋洗烧杯若干次,将淋洗液加入套管。向套管/入萃取溶剂。萃取18-24定量转移萃取液至浓缩装置(12.6)浓缩近干使用氮吹装置(12.7)在水浴60C下浓缩萃取液至恒脂肪百分比检测:采用与在EPA噁英研究中使用的方法相同溶剂体系(二氯甲烷正己烷混合液)萃取组织检测脂肪组分以使脂肪组分的测定与该方法一致(参考文献22)。以己烷溶液溶解萃取液并加入1.0mL净化内标(7.11)转移萃取液至层析柱(13.71)或酸化硅胶净化柱(137.2)。沸石留在浓缩装置中,淋洗若干次以保证目标化合物完全转移,必要时可使用超声或微热以保证所有物质溶解。接收瓶干燥后称量接收瓶及沸石重量。使用下式计算脂肪组分,3脂肪百分比残留物重量(g组织重量不需计算空白、IPR及OPR脂肪含量。盐酸消化/萃取及浓缩(参考文献23-1)溶200mL(11.8.4)加盖后摇晃1-3次,通风橱内释放压力,摇晃10-30s拧紧盖子后放在振荡器上,调节振荡器模式及速度后使酸、溶剂及织振荡同步。避免可能使容器破碎的操作。振荡12-24消化后取下样品瓶,静置分层漏斗内衬玻璃纤维滤纸(6.5.2-6.5.3),装有10g(7.2.1)。将萃取液通过无水硫酸钠漏斗干燥后倒入浓缩装置(12.6。使用正己烷淋洗样品瓶两次,每次25L。淋洗液倒入无水硫酸钠转入浓缩装置。浓缩溶液近干(12.6)使用氮吹装置(12.7)在水浴60C下浓缩萃取液至恒脂肪百分比检测:采用与在EPA噁英研究中使用的方法相同溶剂体系(二氯甲烷正己烷混合液)萃取组织检测脂肪组分以使脂肪组分的测定与该方法一致(参考文献22)。以己烷溶液溶解萃取液并加入1.0mL净化内标(7.11)转移萃取液至100-200mL细口瓶中将沸石留在萃取装置中,淋洗若干次以保证目标化合物完全转移,最多使用70mL。接收使用.3计算萃取液百分比。不需检测空白、IPR或脂肪组使用13.7.3步骤净化萃取液酸碱反萃取向分液漏斗中样品及QC萃取液(.3,或)加入净化内标(7.11)使用50mL氢氧化钾溶液(7.1.1)对样品萃取液进行反萃取。在通风橱内摇动2分钟。注意放气。弃去水相。重复碱洗操作直至水相无色。最多碱洗4次。移出并弃去水相。为避免CDD/F的降解,应尽量减少萃取液和碱液的接触时间。倘若满足9.2方法要求的标记同位素回收率及性能,可以使用更使用50mL氯化钠溶液(7.1.4)以相同方法进行反萃取,弃去水相使用50mL浓硫酸(7.1.2)以相同方法进行反萃取。直至水层无色为止,最4使用50mL氯化钠溶液(7.1.4)以相同方法进行反萃取。弃去水相萃取液以无水硫酸钠柱(7.2.1)干燥。以30-50mL溶剂淋洗分液漏斗。淋洗液以无水硫酸钠柱(7.2.1)12.6-12.7步骤浓缩萃取液,使用13步骤净大体积浓缩步骤:使用旋转蒸发器或电热套浓缩甲苯萃取液。使用旋转蒸发器、电热套或KD浓缩仪浓缩二氯甲烷萃取液。根据操作手册安装旋转蒸发器。水浴温度45C。每日应浓缩萃取溶剂100mL以浓缩装置。收集浓缩溶剂及在收集瓶中的溶剂进行污染检查。必要时,处理样品后以2-3mL溶剂淋洗连接管,以废液将装有样品萃取液的圆底烧瓶同旋转蒸发器连接。仔细逐步施加真空后旋转蒸发瓶。降低烧瓶至水浴,调节旋转速度及水浴温度以在15-20分钟内完成浓缩。 当溶液约2mL时,从水浴中移出烧瓶停止旋转,仔细操作使空气进2mL溶剂淋洗以12.6.4电热套:使用圆底烧瓶浓1-23Snyder柱,使1mL溶剂润湿Snyder柱。将圆底烧瓶放入电热套加热,在15-20分钟内完成 10mL10分钟。移开Snyder柱并以少量溶剂淋洗连接管处。以12.6.4Kuderna-DanishK-D)500mLK-D10mLK-D浓缩仪。K-D浓缩技术用于二氯甲烷及正己烷溶剂。在水浴不使用蒸汽产生器时,很难采用KD技术浓缩甲苯。1-23snyder1mL溶剂从调节装置位置及水浴温度在15-20分钟内完成浓缩。合适蒸馏速度下,柱 液体体积接近1mLKD装置,冷却至少10分钟。移出Snyder柱并使用1-2mL溶剂淋洗烧瓶及同浓缩管的连接处。该操作推荐使用5mL针筒。 移出3球Snyder柱,加入新鲜沸石,在浓缩管上连接2球Snyder柱,使用0.5mL溶剂润湿Snyder柱,将装置放入水浴。调节水浴温度及水平位置,在5-10分钟内完成操作,合适蒸馏速度当溶剂体积为0.5mL时,移出水浴并冷却至少10分以12.6.4处理后进行反萃取、微浓缩或溶剂置换操对反萃取而言(12.5)250mL分液漏斗,淋洗浓缩容器10-20mL后进行反萃取操作(12.5)。对于萃取液残留物称重或进行除反萃取外的净化操作步骤而言,转萃取溶液至氮吹瓶,使用合适溶剂淋洗2-3次以继续微浓缩及溶剂置微浓缩及溶剂置化铝、活性炭及Florisil净化的萃取液需溶剂交换为正己烷。降低样品瓶位置,45C水浴下浓缩 如果样品需浓缩至干进行重量检测(、及),如果萃取液需浓缩后进样或溶剂置换,使用下法处理100L2-3mL所需溶剂(二氯甲烷(GPC或HPLC)、正己烷(其他净化步骤))继续浓缩至100L。再次重复溶剂添加如果萃取液使用GPC净化,二氯甲烷调节溶液体积至5.0mL,如果萃取液使用HPLC30L后进行GPCHPLC净化操作(13.2如果萃取液使用层析柱净化(氧化铝、硅、Carbopak/Celite、Florisil),使用正己烷定容1.0mL后进行层析柱净化(13.3-13.5,13.8)GCMS进样(14)0.3mL内插管以进行最后浓缩使用。正己烷淋洗浓缩瓶并转移至内插管。浓缩体积至100L。10L10L后密封样品瓶并做好瓶号标记,避光室温保存以待分析。若不能24小时内分析,需在-10C保存。8净对于相对干净的样品(如处理后排放污水、水、饮用水)来说,净化并不是必需步骤。需要净化时,分析人员应使用下列净化步骤的部分或全部以及其他合适的9.2要求。当仅需测定2,3,7,8-TCDD和237,8-TCDF时,应优化净化步骤以分离这两种化合物。凝胶渗透色谱(GPC)(13.2)用于去除可导致GC柱性能降低的大分子干扰。其可用于所有的土壤以及沉积物萃取液。亦可用于含大分子的水样萃取液酸性、中性及碱性硅胶(13.3)(13.4)Florisil13.8)用于去除极性和非极性干扰。氧化铝和Florisil用于去除氯代联苯醚。Carbopak/Celite活性炭(13.5))层析柱(13.7.1),酸化硅胶吸附步骤(13.7.2)以及硫酸/(13.7.3)用于凝胶渗透色谱色谱柱400-500mL70-75gSX-3Biobeads填料()倒入适量二氯甲烷浸泡过夜(至少12小时))气。保持柱头压为7-10psig。连接柱至检测器()柱校5mL(7.4)注射校正溶液并记录检测器信号。流出顺序为玉米油、BEHP、,五氯酚、茈、硫。设置“dumptime”去除85%的玉米油并且回收and>85%的酞酸酯茈和硫之间的峰最小处设置 time”每分离20份萃取液后验证校正溶液如果五氯酚回收率大于85%则证通过。验证未通过时系统应重新使用校正溶液校正。之前处理 个样品应重新萃取并用校正后的GPC净化萃取液净化:GPC要求柱不得过载。本方法采用柱容量为去除5mL溶液中0.5g大分子干扰。如果萃取液含有大于0.5g干扰物,应将萃取液分成若干份,GPC分离后再混合。萃取液的残留组分可由挥发50L试样后以重量法测使用滤膜托架()过滤萃取液以移出颗粒物。进 5mL13.2.2400-500mL烧杯中收集如果样品较脏时,应使用5mL使用12.6及12.7步骤浓缩馏分以便下一步净化或使用GC/MS分析在15mm内径层析柱()中放置玻璃棉填充物。从层析柱底部至上依次1g硅胶()4g碱性硅胶()1g硅胶、8g酸性硅胶()、2g硅胶、4g颗粒状无水硫酸钠(7.2.1),轻敲柱以使吸附剂分布均匀。使用50-100mL正己烷预淋洗层析柱。关闭活塞使正己烷液面高于硫酸钠1mm。弃去流出液。检查是否有空洞,则应重新层析柱加入样品,调整活塞使萃取液高于硫酸钠层1mm己烷淋洗CDD/F并收集馏分。使用12.6及12.7浓缩馏分以便下一步净化或使用GC/MS对含大量其他有机物的萃取液而言(如纸浆),建议提高硅的柱容量w/w7.9g10g)。碱性硅胶()33%w/w50mL1NNaOH100g硅胶)或使用硅酸钾()注意:使用较强的酸性硅胶(44%w/w)可能会导致有机物的碳化,碳化物可能吸附某些目氧化铝净化在15mm内径层析柱()中填充入玻璃棉()如使用酸性氧化铝,加入6g酸性氧化铝()使 50- 正己烷预淋洗氧化铝柱,调节活塞使己烷液面高于氧化1mm弃除洗脱液检查是否有空洞,则应重新层析柱向层析柱中加入浓缩萃取液。调节活塞使萃取液液面高于氧化 1mm1mL己烷淋洗接收瓶两次后加入层析柱。使用100mL己烷淋洗CDDs/CDFs收集馏分根据13.4.2.氧化铝柱(酸性或碱性)选择洗脱溶剂20mL二氯甲烷:正己烷(20:80v/v)洗如果使用碱性氧化铝柱,使用20mL二氯甲烷:正己烷(50:50v/v)洗脱,使用12.6及12.7浓缩馏分以便下一步净化或注射入HPLC或0.55gCarbopak/Celite填料(),柱2cm左右。5mL甲苯、2mL二氯甲烷:甲醇:甲苯(15:4:1v/v)、1mL二氯(1:1v/v)、5mL0.5mL/分时,弃去柱子。当淋洗溶剂降至距填充柱1mm时,加入样品萃取液,1mL正己烷淋洗样品容使用3mL正己烷淋洗两次、依次使用2mL二氯甲烷:环正己烷(1:1)2mL二氯甲烷:甲苯:甲醇(15:4:1)淋洗干扰物,弃去洗脱液。反置色谱柱,20mL甲苯洗脱,如果在洗脱液中有活性炭颗粒,使用玻璃纤维滤膜过滤。使用12.6及12.7浓缩馏分以便下一步净化或注射入HPLC或GC/MSHPLC柱校500pg/L2,3,7,8取代异构体或其他关注异构体的二氯甲HPLC注射30L校正液记录检测器型号。收集馏分以备回用。流顺序应为4-8氯代二噁英建立4氯代异构体或其他关注异构体的收集时间。使用足量二氯甲淋洗进样器。为确保系统无CDD/F残留。应注射至少5次,每次L并以检测器检测每处理20个萃取样品标准校正一次。如果校正标准中CDD/F()75-125%,则校正通过。如校正未通过系统则应使用校正标准重新校正,此前处理20个样品应重新萃取、净化。萃取液净化:HPLC要求色谱柱不能过载,本方法中萃取液的处理量最大为30L,如果萃取液不能被浓缩小于30L,应分成若干等分试样并在处理后使用30L二氯甲烷淋洗小瓶两次。使用浓缩装置(12.7)浓缩至30L使用13.6.1的校正数据洗脱。在一洁净20mL浓缩管加入5mL正己(1:1v/v)CDD/Fs100ng/mL,应分30L二氯甲烷空 组织脂肪净化:索氏提取液使用层析柱(13.7.1)、酸化硅胶(13.72)去除脂肪,或盐酸消化液酸碱反萃取去除脂肪(13.7.3)。层析柱参考文献2227)用于在Soxhlet/SDS萃取后去除脂肪(12.4.1)如7.5.4.所示层析柱使用100mL正己烷淋洗层析柱,液面降至吸附柱顶层,注意使硫(.2),液面降至吸附柱顶层时,使用200mL正己烷淋洗CDD/F。使用步骤浓缩净化后萃取液(12.612.7)至恒重如果残留物多于500mg,重新层析柱净化。使用适当溶剂溶解萃取液以便使用其他净化步 (13.2-13.2-13.713.8步骤净化萃取液。推荐氧化铝(13.4)Florisil活性炭(13.4)为必需的净使用12.710L,14酸化硅胶(28):用于去除索氏提取/SDS中脂肪(12.4.1)的步骤,可调节瓶(.2)中正己烷体积为200mL向瓶中加入搅拌子,开始搅拌)10g颗粒状无水硫酸钠(7.2.1)的带玻 推荐氧化铝(13.4)或Florisil(13.8)活性炭(13.4)为必需的净化步骤。盐酸消化萃取液(12.4.2)酸碱反萃取向残留物/溶液(.2)中加入1.0mL净化内标(7.11)加入10mL浓硫酸,立即盖紧盖子摇晃1-3次。通风橱内拧松瓶盖以释放压力。盖紧瓶盖摇晃以使残留物/溶液与硫酸充分接触。接触时间不应少于45s。250mL分液漏斗中,避免有硫酸混入,使用正己烷使用50mL氢氧化钾溶液(12.5.2)反萃取溶液/残留物。使用试剂水将萃取液加入一装有10g颗粒状无水硫酸钠(7.2.1)的带玻璃纤维的浓缩净化后萃取液至13.2-13.7,13.8等净化步骤所需的合适体积。推荐GPC(13.2)、氧化铝或Florisil(13.8)Carbopak/Celite(13.4)所净化后使用12.7步骤浓缩萃取液至10L,GC/MS分析使用10mL二氯甲烷、10mL正己烷:二氯甲烷(98:2v/v)预淋洗活化 (7.5.3)弃去溶当溶剂降至距填充层1mm时,向柱中加入样品萃取液(正己烷为溶剂 使 正己烷淋洗样品瓶两次并加入层析柱使用正己烷:二氯甲烷(98:2)洗脱干扰物,弃去洗脱液35mLCDD/F12.612.7浓缩馏分以便下一步净化或HPLC或GC/MS分析。HRGC/HRMS如10.1为避免挥发、吸附以及反应造成的损失,在进样前向样品萃取液中加入10μL适当内标溶液(7.12。如果样品液需要再次分析时有挥发时,不应再加入内标,应使用纯壬烷定容至原体积(18μL,如果进样2μL)进样1或2μL,柱上进样或不分流进样。进样体积必须同校正曲线体积一致。进样体系和效在样品序列(每12个小时处理样品)开始分析时,GC/MS的性能和校正曲线进准溶液(7.134,指定异构体测试标准(7.155)来验证所有的指标。调IPR、OPR的分析。质谱分辨率:分析前必须在合适m/z验证静态分辨率至少大于10000(10%峰谷。1210.1.2步骤验证其静态分辨率。当分辨率不满足要14所示步骤注射VERCDD/Fs9所列的范围内,否则应重新调节质谱直到(10.1.2验证内标中CDD/Fs及同位素内标峰新噪比必须大于10。否则应重新调节质使用同位素稀释法计算有同位素(表1)标记的CDD/Fs(10.5),内标法计算同位素内标浓度(10.6)。化合物浓度根据10节的校正数据计算。将各种化合物同其表6中的校正验证限进行比较,当仅计算2,3,7,8-和2,3,7,8-TCDF时,使用表6a的数据。当所有化合物满足要求时证通过,可以进行标准和样品萃取液的分析。如果有化合物不满足要求时,测量体系不适用该种化合物的分析。重新准备标准溶液货纠正问题原因。重复分辨率(15.2)及验证测试(5.3),或重新校正(Section10)。保留时间及GC分辨绝对保留时间:验证测 (15.3)中GCMS进样内13C12-1,2,3,4-TCDD13C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD的保留时间同校正测试(10.2.1,10.2.4)的保留时间相差在 之内。时间在表2所给限值的范围内。GC指定异构体测试标准(7.15)2,3,7,8-TCDD4CDD/Fsm/z=319.8965处的峰谷,2,3,7,8-TCDF4CDD/Fsm/z=303.901625%(图6、7)。如任何化合物的保留时间不在指定范围内或2,37,8-异构体未能分离即可认为GC未能正确工作,调节GC并重复验证测试(153)或重新校正(10),或更换色谱柱并重复验证或校正。

OPR,11.5.4,11.6.2,11.7.4,)使用同位素稀释法计算有同位素(表1)标记的CDD/Fs(10.5),内标法计算对每种化合物及其同位素标记内标而言,将其浓度与表6的限值进行比较。当仅计算2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF时,使用表6a的数据。致。纠正问题,重新前处理、萃取及净化样品序列并重复进行OPR测试(155将15.5.3中通过测试的结果同先前OPR数据合并,升级QC数据生成进行能力图。并对各种样品类型中各CDD/Fs单体计算其回收率R及标准偏差SR来对描述精确度。精确度表示为R-2SR-R+2SR。如R=95%且SR=5%,精确度表示为85-105%.空白:OPR完成后立即分析方法空白来证明系统未受污染及OPR分析影响。结果必须满足9.5.2的要求方能进行下一步试验。定16.1-16.4CDD/Fs和同位素表8所列的的两种离子必须存在并且在2s样品中每种离子的信噪比必须大于2.5,校正标准中必须大于10。(10.2.38中两种离子的离子丰度比必须在表9的范围CS3VER(两者选时间较近2,3,7,8取代的CDD/Fs的相对保留时间必须在表22,3,7,8取代的的保留时间必须在10.3建立的保留时间窗验证分析:2,3,7,8-TCDF不能在DB-5柱上得到有效分离,因此在DB-5柱上分析的任何样品需要定性2,3,7,8-TCDF时,必须在DB-225,SP-2330或其他等效柱上进行验证分析。使用第二根柱时,10.1.1的操作条件必须调节优化,但是GC/MS必须满足质谱分辨率和校正的要求(10节)如果不满足16.1-16.5的定性准则时,不能定性的CDD/Fs结果不能用于法律目的。如定 同位素稀释法定量:由于同位素标记化合物同其相应的CDD/Fs在萃取、浓缩及CDD/Fs的回收率。相对响应因子同10.5的初始校正数据可用来直接确定浓度。只 Cex=萃取液中CDD/Fs浓度,其他同由于潜在的干扰问题,没有向样品中加入,OCDF的同位素标记物,因此OCDFOCDD定量。所OCDFOCDD回收率校正。当OCDD与OCDF在样品萃取、浓缩及净化过程中行为不一致时,会降低OCDF的准确度。由于OCDF同其它二噁英相比毒性较低,不认为OCDF准确度潜在降低很显著。由于13C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD作为进样内标使用(未在样品萃取前添加),其不能使用同位素稀释法定量1,2,3,7,8,9-HxCDD。因此1,2,3,7,8,9-HxCDD由2,3,7,8-HxCDD1,2,3,4,7,8-HxCDD1,2,3,6,7,8-HxCDD。因1,2,3,7,8,9-HxCDD浓度由HxCDD2,3,7,8-CDD/F2,3,7,8异构体的平均响应内标法定量及标记化合物回收10.6得到的响应因子以下式计算萃取液中的1,2,3,7,8,9-HxCDD、OCDF、13C标记物以及37Cl净化内标:C(ng/mL) (A1sA2s)Cis (A1isA2isCex=萃取液中CDD/Fs浓度,其他同使用计算的萃取液浓度以下式计算13C标记物及37Cl回收率%=计算浓度(g/添加浓度(g固相浓度由萃取液浓度及固相重量(11.5.1)以下式计算:Cex=萃取液浓度Ws=固相重量(干重液相浓度由萃取液浓度及液相体积(11.4or11.5)Cex=萃取液浓度如果定量离子 面积超出系统校正曲线的范围,应减少萃取样品用量按11-14所示步骤重新前处理、萃取、净化及分析。对固体含量大于1%solids,样品而言。萃取原样品量的110,1/100(11.5.1并按11-14所示步骤重新前处理、萃取、净化及分析。如果减少样品量损害样品代表性时,稀释样品萃取液10浓度为100pg/L,使用内标法分析稀释样品萃取液标准、空白及样品中CDD/Fs及同位素标记化合物以3水样:单位为:pg/L(ppq)对固体含量大于1%的样品而言(土壤、沉积物、泥饼及混合物):单位为组织:单位 ng/kg(湿重),应报告脂肪含量以便换算报告水平:标准(VER,IPR,OPR)(表2)低于最小水平的结果视为未检出或根据要求报告空白:报告结果高于最小水平的1/3CDD/F在最低稀释水平报告,该水平上定量离子峰面积在有同位素标记的CDD/F结果在最低稀释水平报告,在该

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论