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文档简介

人体组织及其他斑痕法医学第1页/共47页概述毛发检验软组织检验其他组织检验第2页/共47页

概述人体组织是重要的法医物证之一在案发现场常遗留有组织,器官骨骼碎片,牙齿,指甲,毛发等第3页/共47页法医物证鉴定就是通过对人体组织的遗传标记的检测来进行个人识别和亲子鉴定用于法医检案的人体组织如下:

软组织(皮肤,肌肉,脏器)硬组织(骨骼,牙齿)角化组织(毛发,指趾甲等)角化组织和硬组织对腐败有较高的抵抗力,往往能保存很长时间,在个体识别鉴定中有实用价值第4页/共47页概述毛发检验软组织检验其他组织检验第5页/共47页毛发检验毛发的特点,结构毛发检验的目的和要求与毛发相关的鉴别毛发的脱落和损伤毛发的个人识别毛发微量元素的分析第6页/共47页分布广泛:除手掌、足底、唇外,身体其它部位均有毛发。生长较快:毛发由皮肤毛囊细胞产生,生长的速度不一,健康人头发约0.2-0.3mm/日;胡须约0.4mm/日。耐久性极好:距今2000多年古尸(马王堆古尸)的毛发,其结构保存良好。

位于体表:受外力作用,易脱落而长期遗留于现场。

较少检材量:一小段毛发即可进行ABO血型、线粒体DNA、基因组DNA等多态性检测。

毛发的一些特点第7页/共47页毛发的结构大体结构

毛干(hairshaft):

毛小皮

毛皮质

毛髓质(外内)皮质,髓质内含色素颗粒、角蛋白、ABH血型物质等。

毛根(hairroot):

毛球,毛囊,毛乳头

毛尖(hairtip)(图)第8页/共47页

毛发的超微结构

1、毛干:第9页/共47页第10页/共47页

毛囊:包围毛根,由表皮内根鞘、外根鞘、

真皮的结缔组织鞘组成。

第11页/共47页毛发的形态与颜色人类毛发形态与种族,遗传,生长部位有关颜色除于上述因素有关外,还与年龄相关。毛发的理化性质:是一种角蛋白,耐腐败,可溶于弱碱性溶液毛发中含有多种微量元素,其含量具有个体差异,可供个体识别。第12页/共47页毛发检验应解决的问题是否毛发?是人毛还是动物毛?是谁的毛发?什么部位的毛发?是自然脱落还是暴力拔脱的毛发?毛发有无损伤?第13页/共47页毛发的鉴别毛发与其它纤维的区别(镜检)

毛发有皮、髓质之分,其它纤维无。

人毛与动物毛的区别(镜检)

人毛皮质发达,髓质不发达且多有间断;动物毛皮质不发达,髓质发达少有间断。部位的确定(肉眼观察)

头发/阴毛/其他部位毛发毛发长度,形状,染色的为头发,色素颗粒附在毛小皮外缘

第14页/共47页毛发损伤1、自然脱落与暴力拔脱的鉴别:*肉眼观察:自然脱落的毛发无毛囊附着;暴力拔脱的毛发常有毛囊附着。*颜色反应:5-10%亚硝基铁氰化钠使拔脱毛发的毛球处呈鲜红色。2、钝器伤与锐器伤的鉴别:*钝器伤:断端锯齿或撕裂状。*锐器伤:断端整齐、锐利。

第15页/共47页毛发的个人识别:1.形态学观察2.ABO血型测定3.酶型检测4.

毛发DNA分析第16页/共47页形态学观察1。毛发的形态学和附着物检查观察和记录:

数目、长短、形状、颜色、大体结构、附着物性状、根据附着物的成分可获得有关职业毛发来源等信息。毛发是游离存在还是附着在其它物品上、附着物品是否凶器。必要时可借助放大镜或显微镜进行检查。第17页/共47页

2.毛发结构观察

洗净毛发经脱色处理后在显微镜下观察观察色素颗粒毛皮质、髓质的状态毛小皮纹理(毛小皮印痕)计算毛发直径头皮毛发镜检第18页/共47页毛发直径的测定:显微测微计(接物计、接目计)接物计:1mm范围内刻成100格,每格宽10um。接目计:中央刻100格。将接物计与接目计起始刻线重叠,数接物镜的一格(10um)相当于接目计的多少格(设为n格)则接目镜的每格宽=10um/n在镜下观察毛发直经占接目计的格数,即可算出毛发直经是多少。第19页/共47页ABO血型测定(解离试验):步骤:水洗/脱脂/压扁/抗体浸泡/离心/冷却/

洗涤(5-10次)/加指示红细胞/镜检注意:压扁毛发是关键,充分暴露皮、髓质,使其血型物质与抗体充分接触而吸附。抗体效价64倍以上;浸泡1-2小时,离心15-20分钟洗涤次数是关键,最好用已知毛发作先行试验探索洗涤次数。第20页/共47页

酶型检测:

有毛囊的毛发,可检测PGM1、

ESD、GLOI等酶型。第21页/共47页毛发的DNA分析1.带毛囊的毛发扩增片段长度多态性(毛囊内含有核DNA)chelex-100提取STR基因座分析性别分析Y染色体上STR位点检测扩增X-Y染色体牙釉基因

第22页/共47页

毛干的线粒体测序毛干可进行线粒体DNA测序,但需排除同一母系其它个体的可能性。第23页/共47页毛发中微量元素分析通过检测头发种微量元素的含量和种类可以帮助判断是否中毒,还可作个人识别某种元素超出正常范围可帮助推断生活环境和相关职业等如长期接触铅作业者毛发中含铅量高第24页/共47页概述毛发检验软组织检验其他组织检验第25页/共47页软组织检验软组织的特性软组织检验的目的和要求种属鉴定性别鉴定个人识别第26页/共47页软组织特性在凶杀、碎尸案、交通事故、意外事故等案件中,人体软组织可遗留在现场或附着在致伤物上。常有病理组织(蜡块、切片)需要个人认定。在亲子鉴定案中,也会遇到需取尸体软组织作为标本的情况。软组织在失去生理功能后容易自溶和腐败,要及时检查,还应警惕组织高度腐败时产生的获得性B物质。第27页/共47页软组织检验目的和要求1.是否组织?2.是人体还是动物组织?(种属鉴定)3.是人体的何种组织?4.个体识别。

免疫沉淀环实验ALU序列种属鉴定第28页/共47页提取和送检软组织比较容易腐败,送检时需注意的事项:1.尽快送检。2.低温保存或干燥处理,不宜用甲醛固定!3.一般情况下取材应选择降解相对慢的,如肌肉,脑组织比肝脾等内脏组织降解慢。

第29页/共47页个人识别ABO血型测定丙酮浸泡除脂组织匀浆后粘附纱布上,其后步骤同血痕。同工酶测定DNA分析

酚氯仿提取

chelex-100提取

STR分型

第30页/共47页概述毛发检验软组织检验其他组织检验第31页/共47页其他组织检验指趾甲检验骨及牙髓检验第32页/共47页指趾甲指(趾)甲是角化组织,耐腐败对mtDNA多态性检测有实用性价值含有较多的ABH血型物质,用吸收试验测定肥皂水洗净检材,蒸馏水冲洗,生理盐水软化2h,水浴,DNA-STR分析。

NS

水浴第33页/共47页骨及牙髓碎尸,高度腐败,白骨化,火灾时的烧焦尸骸关键是提取基因组DNA制备骨粉,牙粉DNA提取液:

Tis-Hcl:

EDTA:SDS:DTT:NaCl,酚氯仿等第34页/共47页

其它斑痕检验

第35页/共47页尿斑检验1.尿斑的证明2.尿斑的ABO血型检测3.尿斑的DNA检测第36页/共47页尿斑的证明1可见尿道上皮细胞、肾盂上皮细胞、蛋白管型等。2尿斑中含脲,其水溶液与浓硝酸作用生成结晶状的硝酸脲。3

尿素(尿斑)尿素酶氨奈氏试剂棕色或黄色沉淀。

凃片检查:

脲结晶试验:氨的检出:第37页/共47页人尿斑的证明

1.用人尿斑的固有成份免疫家兔,制备相应抗体。沉淀素血清经人血清、唾液吸收后,对人尿起特异性沉淀反应。

2.用琼脂糖扩散试验、免疫电泳检测。第38页/共47页

三、尿斑的ABO血型检测尿斑中的ABO血型物质含量很少(仅为唾液的1/256),要经数次浓缩才能检出。步骤:尿斑生理盐水浸泡离心取上清蒸干(重复数次)少许生理盐水溶解。中和试验、ELISA进行检测。第39页/共47页

四、尿斑的DNA检测尿斑中含脱落上皮细胞,同样可抽提出DNA,进行性别基因及DNA多态性检测。第40页/共47页乳汁斑检验1.乳汁斑的证明2.乳汁斑的ABO血型检测3.乳汁斑的DNA检测第41页/共47页乳汁斑的证明肉眼观察:灰白色,有一定硬度。镜检:取1滴乳汁斑浸泡液于镜下观察---可见:乳汁球(脂肪球)初乳则可见初乳小体(由变性脂肪细胞组成)。产后2-3天分泌初乳(淡黄色);第4天开始分泌乳汁(乳白色)。第42页/共47页人乳汁斑的证明:

抗人血清环状沉淀试验:阳性。紫外灯检查:人乳呈淡紫白色;牛乳呈淡黄色。浓硫酸检查试验乳汁+浓硫酸人乳(褐色);

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