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文档简介
微生物的利用
一、考点解析
1.酵母菌培养过程中的生长曲线如图所示:a、
b、c、d分别表示不同的生长时期,其中适于
作为生产用菌种的时期是()
A.aB.b
C.cD.d
K解析X在b表示的时期,细菌繁殖速度快,代谢旺盛,菌体形态和生理稳定,
常用作生产用菌种和科研材料。
K答案1B
2.发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种。消灭杂菌,获得纯种的方
法包括()
A.根据微生物对碳源需要的差别,使用含不同碳源的培养基
B.根据微生物缺乏生长因子的种类,在培养基中增减不同的生长因子
C.根据微生物遗传组成的差异,在培养基中加入不同比例的核酸
D.根据微生物对抗菌素敏感性的差异,在培养基中加入不同的抗菌素
(解析》选择培养基是发酵工程中获得纯种的方法之一。
K答案』ABD
3.人们不会在热泉中发现活着的嗜冷海藻,而经常可以在冷水环境中分离出嗜热
微生物。请根据酶的特性分析产生这种现象的原因
(2)淀粉酶可以通过微生物发酵生产。为了提高酶的产量,请你设计一个实验,
利用诱变育种方法,获得产生淀粉酶较多的菌株。①写出主要实验步骤。②根据
诱发突变率低和诱发突变不定向性的特点预期实验结果。
K解析力酶的活性受温度影响,高温下酶失去活性,低温酶的活性降低,但酶分
子结构没有被破坏。设计实验要遵循对照原则和单一变量原则,要利用诱变育种方
法,一组需用一定剂量的诱变剂处理,培养时要将菌种接种于含淀粉的固体培养基
上。
K答案H(1)嗜冷海藻体内的酶遇到高温后,酶的分子结构被破坏而失去活性,
海藻很快会死亡;而嗜热微生物体内的酶遇到低温环境,酶的活性降低,但酶分子
结构没有被破坏,遇到合适的温度又可以恢复活性。(2)①主要实验步骤:第一
步:将培养好的生产菌株分为两组,一组用一定剂量的诱变剂处理,另一组不处理
做对照。第二步:制备含淀粉的固体培养基。第三步:把诱变组的大量菌株接种于
多个含淀粉的固体培养基上,同时接种对照组,相同条件下培养。第四步:比较两
组菌株菌落周围透明圈的大小,选出透明圈变大的菌株。②预期实验结果:a.由
于诱发突变率低,诱变组中绝大多数菌落周围的透明圈大小与对照组相同。b.由
于诱发突变不定向性,诱变组中极少数菌落周围的透明圈与对照组相比变大或变
小。
4.掌握微生物群体的生长规律,目的是更好地研究和利用它们。下列有关描述中
错误的是()
A.生产上常常用对数期的细菌作为菌种
B.在稳定期中适当补充营养物质有利于提高产量
C.连续培养延长了培养周期,从而提高产量
D.调整期细菌的代谢活跃,体积增长快
K解析』连续培养延长了稳定期。
K答案1C
5.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微牛物。在缺乏氮源
的培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线
菌;在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生
物群体中分别分离出()
A.大肠杆菌B.霉菌C.放线菌D.固氮细菌
K解析』固氮细菌不需要专门添加氮源;抗生素可抑制原核微生物;10%酚可以
抑制细菌和霉菌,但放线菌可生存。
答案:C
6.下列有关谷氨酸棒状杆菌的生长和谷氨酸发酵的叙述.错误的是()
A.组成酶是维持菌体基本生活的必要条件
B.菌体能合成各种生长因子,不需要从外界补充
C.发酵液pH呈酸性时,就会生成乙酰谷氨酰胺
D.细胞膜透性的改变,可解除代谢产物对有关酶活性的抑制
K解析』谷氨酸发酵时,需不断补充生长因子。
(答案]]B
7.在利用谷氨酸捧状杆菌生产谷氨酸的过程中,下列叙述正确的是()
①各个生长时期的长短是固定的,无法人为缩短生长周期
②对数期是采样留种的最佳时期
③在稳定期补充营养物质可以提高产量
④调整期是收获代谢产物的最佳时期
A、①②B、②③C、③④D、①④
K解析R对数期菌体繁殖速度快,代谢旺盛,菌体形态和生理稳定,常用作生产
用菌种。稳定期补充营养物质是进行连续培养,提高了产量。
K答案1B
r下列关于平菇培养的操作程序,正确的是()
B配制牛肉膏蛋白月东培养基,接种,高压蒸气灭菌,培养
c配制牛肉膏蛋白月东培养基,高压蒸气灭苗,接种,培养
D配制棉予壳培养基,按种,高压蒸气灭菌,培养
配制棉子壳培养基,高压蒸气灭菌,接种,培养
酵300J换培养液/3h
母250a换培养液/12h
菌
200b换培养液/24h
数
150C
目
100斥瓦培养液
50
20406080100120140时间S
酵母种群增长曲线
K解析》平菇培养是利用棉子壳培养基,接种前要进行灭菌。
K答案》D
9.将酵母分为a、b、c、d四组,用不同的方式培养,其种群增长曲线如上图所示。
请据图回答下列问题。
(1)a呈现型增长,该种群的生长在20h之前处于期,20h—40h
处于一期。
(2)d呈现______型增长,在100h—200h,d的增长率趋于o若在现有条件
下继续培养,其种群数量趋于。(A增多B减少)
(3)随着更换培养液的时间间隔的延长,酵母种群的增长率趋于,其可能
的限制因素是不足和的积累。
K解析X食物和空间资源充足的条件下,种群呈“J”型曲线增长,开始有个调整
期,之后按指数式增长。在有限的环境条件下,种群呈“s”型曲线增长,达到
最大值时,增长率为零,再继续培养,随着环境条件的限制,种群数量减少。
工答案U(DJ调整对数
(2)S0(或零)B(或减小)
⑶降低(或减小)营养有害代谢产物(或有害产物)
10.抗生素作为治疗细菌感染的药物,其高效性和巨大的经济价值使抗生素工业经
久不衰。其中青霉素的发现和应用具有划时代的意义。
(1)青霉菌发酵产生青霉素。青霉菌的新陈代谢类型是,青霉素是青霉
菌的
代谢产物。
(2)在生产和科研中,常选用处于期的青霉菌作为菌种或研究材料.因为此
时的青霉菌代谢旺盛,和比较稳定
(3)对青霉菌菌体生长情况的测定,取一定体积的发酵液,经离心分离、反复洗涤
后,,再计算发酵罐中菌体的总重量。
K解析》霉菌的代谢类型为异养需氧型,青霉素为次级代谢产物,对数期菌体形
态和生理稳定,常用作生产用菌种。
K答案2(1)异养需氧型次级
(2)对数个体的形态生理特性
⑶称菌体的湿重(称烘干后的重量)。
11.某化工厂的污水池中,含有种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员
用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降
解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析回答问题:
(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选,这种培养基属于培
养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的,实验需要振
荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是。
(3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量的培养液,接入新的培
养液中连续培养,使“目的菌”的数量。
(4)转为固体培养时,常采用的方法接种,获得单菌落后继续筛选。
(5)若研究“目的菌”的生长规律,将单个菌落进行液体培养,可采用的
方法进行计数,以时间为横坐标,以_________为纵坐标,绘制生长曲线。
污水池中振荡培养若干天后,测
污泥样品定密瓶中化合物炭)含量
固
培养基
I
重复多次,直至获得目的菌
(6)实验结束后,使用过的培养基应该进行处理后,才能倒掉。
K解析II这种培养基属于选择培养基,选择培养目的菌由于化合物A为有机物,
且要振荡,说明目的菌为异养需氧型。“目的菌”生长繁殖过程中要不断消耗营养
物质,培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量减少的培养液,接入新的培养
液中连续培养,使“目的菌”的数量增加。转为固体培养时,常采用划线的方法接
种,获得单菌落后继续筛选。若研究“目的菌”的生长规律,将单个菌落进行液体
培养,可采用定期取样的方法进行计数,绘制生长曲线应以时间为横坐标.以细菌
数目的对数为纵坐标。实验结束后要对培养基进行灭菌,以免污染环境。
(答案X(1)目的菌选择
(2)化合物A异养需氧型
(3)减少增加
(4)划线
(5)定期取样细菌数目的对数
(6)灭菌
12.下列所述环境条件下的微生物,能正常生长繁殖的是()
A.在缺乏生长素的无氮培养基中的圆褐固氮菌
B.在人体表皮擦伤部位的破伤风杆菌
C.在新配制的植物矿质营养液中的酵母菌
D.在灭菌后的动物细胞培养液中的禽流感病毒
K解析』圆褐固氮菌可以利用空气中的氮气,不需专门添加氮源。生长素是植物
激素,细菌生长不需要。
K答案》A
13.用蔗糖、奶粉和经蛋自酶水解后的玉米胚芽液.通过乳酸菌发醉可生产新型酸
奶,下列相关叙述错误的是()
A.蔗糖消耗量与乳酸生成量呈正相关B.酸奶出现明显气泡说明有杂菌污染
C.应选择处于对数期的乳酸菌接种D.只有奶粉为乳酸菌发解提供氮源
K解析』乳酸菌发酵利用的氮源是奶粉和经蛋白酶水解后的玉米胚芽液。
K答案XD
14.下列不需要利用发酵工程的是()
A.生产单细胞蛋白饲料B.通过生物技术培育可移植的皮肤
C.利用工程菌生产胰岛素D.工厂化生产青霉素
K解析X培育可移植的皮肤是利用细胞培养而获得。
K答案』B
15.某同学在进行探究大肠杆菌群体生长规律实验时,错误操作是()
A.在调整期扩大接种B.随时调整pH
C.在稳定期连续培养D,定期检测菌体数目
K解析》在对数期扩大接种;配制培养基时调节好pH后一般不需要在调整;稳定
期,增长率为零,连续培养没有意义。
K答案UABC
16.关于青霉素生产的叙述,正确的是()
A.青霉素是青霉菌生长代谢中重要的初级代谢产物
B.用紫外线、激光、化学诱变剂处理青霉菌再经筛选的方法可以选育高产菌
种
C.发酵罐接种后必须进行灭菌处理
D.在青霉菌生长的稳定期,活菌数不再增加,青霉菌产量也不再增加
K解析?用紫外线、激光、化学诱变剂处理青霉菌,都可使其发生基因突变,通
过筛选,从而获得高产菌株。
K答案1B
17.关于炭疽杆菌的叙述,馋族的是
A.具有细胞壁、细胞膜、细胞质和拟核等结构
B.通过二分裂方式进行繁殖
C.核衣壳外还有多糖、蛋白质和脂质构成的囊膜
D.同化类型是化能异养型
K解析》核衣壳是病毒的结构。
(答案Hc
请据图回答问题:
①A产物合成始于细菌生长曲线的期,属于代谢产物。
②B产物的积累量在细菌生长曲线的期最大。
(2)绝大多数微生物最适生长温度为25〜37℃。为了探究培养温度对谷氨酸棒
状杆菌代谢产物(谷氨酸)合成量的影响,设计如下实验。在实验中有4处错误,分
别标以①、②、③、④,请依次分析错误原因。
"正、几』尸*、目的a28℃、29℃30℃
第一步:设定培养温度为-------------
①
第二步:将菌种接种到灭菌后的液体培养基中,分别在设业的温度条件下
密闭培养
第三步:在三1定时取样,分别测定谷氨酸合成量,记录结果并绘制曲线。
③
实验结果预测及结论:若在30℃培养条件下,谷氨酸合成量最大,则认为,
30℃为该细菌合成谷氨酸的最适培养温度
@°
①
O
②
0
③
O
④
0
K解析工观察图可知,A产物是细菌生长到一定阶段在对数期产生的,是次级代谢
产物,B的积累量在稳定期达到最大。微生物最适生长温度为25〜37℃,只设置三
个温度,范围过窄,谷氨酸棒状杆菌为好氧菌,密闭培养是不可以的。谷氨酸合成
在各个时期均有合成,由于实验操作过程有误,结果预测不准确。
K答案』(1)①对数;次级②稳定
⑵①温度设定范围过窄
②谷氨酸棒状杆菌是好氧细菌,不应密闭培养
③从调整期至衰亡期均有谷氨酸的合成,故取样时期有遗漏
④实验结果有局限性,合成谷氨酸的最适培养温度有可能高于30℃
19.通过发酵到大规模生产谷氨酸,生产中常用的菌种是溶氧的氨酸棒状杆菌。
下面在有关谷氨酸发酵过程的叙述,正确的是()
A.溶氧充足时,发酵液中有乳酸的累积
B.发酵液中碳源和氮源比例的变化不影响谷氨酸的产量
C.菌体中谷氨酸的排出,有利于谷氨酸的合成和产量的提高
D.发酵液pH呈碱性时,有利于谷氨酸棒状杆菌生成乙酰谷氨酰胺
K解析』谷氨酸棒状杆菌是好氧型细菌,在氧气充足时,不会有乳酸的积累;碳
源与氮源之比影响谷氨酸的产量,当培养基中碳源与氮源之比为4:1时,菌体大
量繁殖而产生的谷氨酸少,而当培养基中碳源与氮源之比为3:1时,菌体繁殖受
到抑制,谷氨酸的合成量增加;谷氨酸合成过多时,会抑制谷氨酸脱氢酶的活性,
从而使谷氨酸的合成过程中断,因此需要及时排出谷氨酸,才可以解除抑制作用;
当发酵液的pH为酸性时,谷氨酸棒状杆菌会产生乙酰谷氨酰胺。
K答案1C
20.在细菌的连续培养过程中,要以一定速度不断添加新的培养基,同时以同样速
度放出老的培养基。右下图表示培养基的稀释率(培养基的更新速率)与培养容器
中营养物质浓度、细菌代时(细菌数目增加一倍所需的时间)、细菌密谋的关系。
下列相关叙述不正确的是()
♦
K缗・密度X
Y
育作物质浓厦、,'
~―一辜’
A.在稀释率很低的情况下,稀释率的增加会导致细菌密度增加
B.稀释率从a到b的变化过程中,细菌生长速度不断提高
C.稀释率超过b点后,营养物质浓度过高导致细菌死亡率增大,细菌密度降低
D.为持续高效地获得发酵产品,应将稀释率控制在b点附近
K解析》微生物的生长有一定的规律,可以划分四个时期,调整期、对数期、稳
定期和衰亡期。连续培养就是根据各个时期的特点,使微生物保持较长时间的高速
生长。微生物的生长受多种因素的限制,其中营养物质的浓度就是一个因素,营养
物质对生长的影响,表现为只有在低浓度时才影响生长速率,浓度高时并不影响生
长的速率,因此A和B答案是正确的。而在b是一个临界点,b点后,细菌的密度
减小,代谢产物也会减少,要持续高效获得发酵产品,应控制在b点附近。
说明:此题经我本人查大学微生物教材,属于恒化连续培养,其培养基成分中,
必须将某种必需的营养物质控制在较低的浓度,以作为限制因子,而其他营养物质
均过量,随着细菌的生长,限制因子的浓度就会降低,致使细菌的生长速率受到限
制。但通过自动控制系统来保持限制因子的恒定流速,不断补充,就能使细菌保持
恒定的生长速率。恒化连续培养方法是研究自然条件下微生物体系比较理想的实验
模型,因为,生长在自然界中的微生物一般处于低营养浓度条件下生长也较慢。
R答案』C
21.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO?为惟一碳源的
自养微生物营养的描述中,不正确的是()
A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B.碳源物质也是该微生物的能源物质
B.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D.水是该微生物的营养要素之
K解析】CO?不能提供能量。
K答案』B
22.发酵工程在工业生产上得到广泛应用,其生产流程如下图所示。结合赖氨酸或
谷氨酸的生产实际,回答相关问题。
(1)人工控制微生物代谢的措施包括▲和
▲o目前采用①▲已经选育出不能合成高丝氨酸脱氢酶的
▲新菌种。
(2)在发酵过程中,产物源源不断地产生。这说明赖氨酸或谷氨酸的生产采用了
▲的发酵方式。在生产过程中,由于赖氨酸或谷氨酸的发酵菌种为—
▲,常需增加通氧量。当发酵生产的产品是代谢产物时,还要采用②
▲等分离提纯的方法进行提取。
K解析》通常采用诱变育种的方法培育微生物新品种,培育出的不能合成高丝氨
酸脱氢酶的是黄色短杆菌。谷氨酸棒状杆菌为好氧菌,产物可用蒸储等方法提取。
K答案X(D改变微生物遗传特性控制生产过程中的各种条件诱变育种
黄色短杆菌
(2)连续培养好氧菌萃取(或蒸储或离子交换等)
23.(2007•山东理综•34)乙醇等"绿色能源''的开发备受世界关注。利用玉米秸
秆生产燃料酒精的大致流程为:
玉米秸秆预处理、水解-糖液不,酒精
(1)玉米秸秆预处理后,因该选用一酶进行水解,使之转化为发酵所需的
葡萄糖。
(2)从以下哪些微生物中可以提取上述酶?(多选)
A.酿制果醋的醋酸菌B.生长在腐木上的霉菌
C.制作酸奶的乳酸菌D.生产味精的谷氨酸棒状杆
菌
E.反刍动物瘤胃中生存的某些微生物
(3)若从土壤中分离生产这种酶的微生物,所需要的培养基为(按功
能分),培养基中的碳源为。
(4)从生物体提取出的酶首先要检测_______,以便更好地将酶用于生产实
践。在生产糖液的过程中,为了使酶能够反复利用,可采用技术。
(5)发酵阶段需要的菌种是,生产酒精是要控制的必要条件是
K解析X用植物秸秆生产酒精是利用微生物进行发酵的过程。植物秸秆中的有机
物主要是纤维素,需要纤维素酶才能将其水解成葡萄糖,生长在腐木上的霉菌及反
刍动物瘤胃中生存的某些微生物中含有纤维素酶,若从土壤中分离产生这种酶的微
生物,所用的培养基为选择培养基,利用的碳源为纤维素。微生物发酵过程中,影
响其发酵的因素主要有溶氧、温度和pH等。
K答案】(1)纤维素(酶)(2)B、E(3)选择培养基;纤维素
(4)酶的活性固定化酶(或固定化细胞)(5)酵母菌;无氧(密封、密闭)
24.为了实现燃料供应来源多样化,发展长期替代化石燃料的产品如燃料酒精、生
物柴油、沼气等已经列入我国未来10年的发展计划。
广东省是我国甘蔗主产区之一。甘蔗是一•种高光效的C;植物,单位面积产量
很高,
种植面积日益扩大,目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产
燃料
酒精的一般工艺流程为:甘蔗。榨汁(蔗糖)、酵母发酵-蒸储。成品(燃料酒精)。
请根据上述材料,回答下列问题:
(1)简述甘蔗大规模快速繁殖技术的过程。
(2)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种,对野生酵母菌
进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌,诱变及筛选过程如下:
步骤1:野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2;制备选择培养基。在基本培养基的基础上,注意—,加琼脂后灭
菌,制成固体平板。
步骤3:将紫外照射后的菌液稀释涂布平板。
步骤4:根据——筛选出突变菌。
(3)上述步骤2、3和4的依据分别是
(4)利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验,除了将培养基灭菌、保持空
间洁净外,发酵过程中防止外来杂菌人侵还有哪些可行方法?(列举两种)
(S)甘蔗榨汁以后还有大量的蔗渣废弃物,主要成分为木质素、纤维素和半纤
维素,
但是酵母菌无法直接利用,原因是其请提出解决该问题的方法。(列
举两种方法)
(6)突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中,PCR技术相
当重要。PCR扩增反应中加人引物和DNA聚合酶的作用分别是什么?
K解析》综合考查考生对生物技术实践模块中的植物组织培养、特殊微生物的筛
选及应
用、酶的应用以及PCR技术的基本操作和应用等内容的掌握;理论联系实际,
针对生物学问题进行初步研究,设计实验路线,对实验结果和现象进行正确
的分
析与判断,综合运用所学知识解决实际问题的能力。
K答案11(1)选取甘蔗外植体,通过诱导脱分化产生愈伤组织,然后通过调整植
物激素比
例,再分化形成芽和根,获得大量试管苗(或通过诱导大量形成胚状体,
制成
人工种子,适宜条件下萌发长成幼苗)。
(2)添加高浓度蔗糖(葡萄糖);调低pH值;是否能在选择培养基上生长。
(3)提供高糖和酸性的筛选环境;获得单菌落;能生长代表该菌落具有耐高
糖和耐
酸的特性。
(4)①利用突变菌的耐酸特性,降低培养基的pH值,达到抑菌的目的;②利用
突
变菌的耐高糖特性,通过高渗环境达到抑菌目的;③保持厌氧环境,达到
抑菌
目的;④在培养基中添加一些抑制物如特殊的抗生素,达到抑菌目的。
(5)缺乏相应分解酶系(或缺乏纤维素酶和半纤维素酶)。在酵母菌中转入分
解酶
系相关基因;利用酶或微生物分解蔗渣;利用物理和化学方法分解蔗渣;
将酵
母菌与其他能分解蔗渣的微生物混合发酵。
(6)引物的作用是结合在模板DNA上,提供DNA延伸起始位点;DNA聚合酶
的作
用是从引物的3'端开始催化DNA链的延伸。
25.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养
基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。
(1)培养基中含有蛋白豚、淀粉分别为细菌培养提供了—和______o除此之外,
培养基还必须含有的基本成分是和o
(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是o
(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于
中培养,培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平
板上接种_____作为对照进行实验。
(4)培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中
有种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越。
(5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐_______细菌,这种培养基被
称为0
(解析』蛋白豚主要提供氮源,淀粉提供碳源,微生物所需要的基本营养还有水
和无机盐。培养基用高压蒸汽灭菌,接种后放入恒温培养箱,用无菌水做对照。不
同微生物形成的菌落不同,有多种菌落即有多种细菌;污染程度越重,菌落总数越
多。培养基中加高浓度的NaCl为选择培养基。
K答案](1)氮源(碳源不作要求)碳源、无机盐、水
(2)高压蒸汽灭菌
(3)恒温培养箱无菌水
(4)多;高
(5)盐(或NaCl),选择性培养基
26.下列关于细菌的叙述,馋送的是()
A.硝化细菌能以阳作为氮源和能源物质
B.某些细菌可以利用光能因定CO?合成有机物
C.生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质
D.含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来签别牛奶中的大肠杆菌
K解析]某些细菌如蓝细菌(蓝藻)、光合细菌以及红螺菌都能进行光合作用。
生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物,主要包括维生素、氨基酸和碱基
等。而微生物的营养物质包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子,它们都是要从
外界获得补充的。常用的伊红美蓝乳糖培养基,可用来鉴别饮用水和乳制品中是否
存在大肠杆菌等细菌,如果有大肠杆菌,则菌落呈黑色。
R答案2D
27.水华可因蓝藻爆发所致。科研人员尝试利用某种细菌限制蓝藻数量,相关实
验的示意图如下。图中①〜⑥表示实验步骤。
曲接林(平・于©实验组,
r■体培养塞上)*加在第养皿中
O
_③光JK培养⑥知培养二
♦---------------►现・«果
请回答问题
(1)从细胞结构的特点与复杂程度上看,蓝藻属于细胞;从生态系统
的营养结构上看,蓝藻属于细胞。蓝藻的停放类型通常
是。
(2)引发水华的蓝藻可产生蓝藻毒素。蓝藻毒素(是、不是)蓝藻
生长、繁殖所必需的物质。蓝藻毒素对人是一种致癌因子,可使原癌基
因,导致正常细胞发生癌变。
(3)图中②、⑤通常使用的是①、④中已培养至期的蓝藻和溶藻
细菌。
(4)图中⑤实验组在每个培养皿中,如果做三个重复实验,可采取的做法是:—
O
(5)蓝藻通常呈蓝绿色,观察实验结果,发现培养皿中出现褪色空斑,说明蓝藻
O
K解析X蓝藻(蓝细菌)是原核生物,进行光合作用,是自养需氧生物,在生态
系统的成分中属生产者,在营养结构中是处于第一营养级。蓝藻毒素是蓝藻的次级
代谢产物,可使蓝藻在生存斗争中处于较有利的地位。原癌基因在正常情况下是处
于被抑制状态,当在致癌因子作用下原癌基因被激活,正常细胞分化成为癌细胞。
对数期的菌体形态和生理特征稳定,所以微生物培养中,通常选用对数期菌体作为
菌种进行培养。题干中已经提示,“在每个培养皿中”“做三个重复实验”,所以
只能在一个培养皿中选择三个不同位置,且是重复实验,处理条件是完全相同的。
实验组是滴加含溶藻细菌的培养液,那么对照组就滴加不含溶藻细
菌的培养液,其他条件均相同(如加的培养液的量、光照、培养的温度等)。由于
蓝藻先培养,先形成菌落(绿斑),后加入溶藻细菌的培养液,溶藻细菌分解绿斑
里的蓝藻,最终会使蓝藻的菌落(绿斑)褪色成为空斑(蓝澡彻底被裂解死亡)。
K答案X⑴原核第一营养级自养需氧型
⑵不是从抑制状态变成激活状态
⑶对数
⑷在每个培养皿中,选择三个不同位置,各滴加等量菌液在每个培养皿中,选择
三个不同位置,各滴加等量的、不含溶藻细菌的溶藻细菌培养液
⑸被溶藻细菌裂解(死亡)
28.莠去津是一种含氮的有机化合物,它是广泛使用的除草剂之一。
(1)莠去津的作用机理之一是阻断光反应中的电子传递过程,影响NADP+形
成,进而影响在中进行光合作用的暗反应过
程,最终抑制杂草生长。
(2)从使用莠去津农田中,选到了能遗传的耐莠去津杂草,将它与敏感莠去津植
株杂交,结坚果见下表:
杂交亲本后代中耐药型植株比例(%)后代中敏感型植株比例(%)
耐药型辛X敏感型$_________100_________________________0________________
敏感型?X耐药型台07oo~
由表推断,控制该耐药性状的基因位于。
(3)莠去津在土壤中不易降解,为修复被其污染的土壤,按下面程序选育能降解
莠去津的细菌(目的菌)。已知莠去津在水中溶解度低,含过量莠去津的固体培养
基不透明。
土壤浸出液适宜条件下,振荡培养秀当时间固体培养基培养
据图回答:
①由于莠去津的作用,在长期使用莠去津的土壤中可能含有目的菌。
②下图是A〜C瓶中三类细菌的最大密度柱形图,由图推断,从A瓶到C瓶液体培
养的目的
是___________________
甲类细菌
乙类细菌
;甲类细菌密度迅
丙类细菌
速降低的主要原因
是___________________
_________________________________________;从A瓶中应选择细菌生长处于
期的菌液加入到B瓶中,培养效果会更好。
③在固体培养基中,无透明菌落利用的氮源主要是:有
透明带菌落利用的氮源主要是,据此可筛选出目的菌。
K解析』杂交实验中,不管是正交还是反交,后代性状总是与母本性状保持一致,
可确定是细胞质遗传(该药物是影响光合作用过程,故抗药基因极可能是位于口卜绿
体)。
A和C既是一个选择培养的过程,也是一个扩大培养的过程。选择的条件是氮
源(莠去津或氮气)和(或)氧气;通过扩大培养可提高选择出来的所需细菌的密
度。
固体培养基中的氮源只有莠去津及空气中的氮气。有透明带菌落说明该菌落的
细菌分解了使培养基不透明的莠去津;无透明带菌落的细菌并没有分解莠去津,那
么它们利用的氮源应是氮气,是自生固氮菌。
K答案》(1)NADPH口十绿体基质(2)细胞质中
(3)①自然选择
②初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)并提高其密度培养液中缺少甲
类细菌可利用的氮源或(和)有氧条件抑制了甲类细菌的生长对数
③氮气莠去津
29.苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着降解苯酚的微生物。
某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获
得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如图所示,①为土壤样品,请
回答下列问题:
(1)②中培养口的菌株的选择培养基中应加入作为碳源,②中
不同浓度碳源的培养基(A.影响;B.不影响)细菌的数量,如果要
测定②中活细菌数量,常采用法。
(2)④为对照、微生物在④中不生长、在⑤中生长,④与⑤培养基的主
要区别在于;使用法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平
板培养细菌时为什么进行倒置培养?
(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小?
(4)实验过程中如何防止其它微生物的污染?
K解析H(1)②中的选择培养基中应加入苯酚作为碳源,②中不同浓度的碳源A
影响细菌数量,稀释涂布平板法来测定②中活菌数目。
(2)④与⑤培养基的主要区别在于④的培养基没有加入苯酚作为碳源,⑤培养基的
中加入苯酚作为碳源。使用释涂布平板法或平板划线法可以在(6)上获得单菌落。采
用固体平板培养细菌时要倒置培养,以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养
基。
(3)5支洁净培养瓶一分别加入相同培养基(加等量的苯酚,用pH试纸检测这5
支瓶内培养基的pH值,用苯酚调试使之相等,苯酚是唯一的碳源)一分别接种5种等
量的来自不同菌株的菌种一在相同的适宜条件下培养相同时间一再用pH试纸检测这5
支瓶内培养基的pH苯酚显酸性,不同菌株的菌种降解苯酚的能力不同,5支瓶内培养
基中的苯酚被分解的量不同,所以pH值不同。用pH试纸检测这5支瓶内培养基的pH
值,从而比较不同菌株降解苯酚能力的大小。
(4)从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作。
K答案》(1)苯酚稀释涂布平板法
(2)④的培养基没有加入苯酚作为碳源释涂布平板法或平板划线法以
防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基。
(3)用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株,一定时间后,测定培养液中苯酚含
旦
里
(4)培养基灭菌、接种环灭菌、接种过程无菌操作。
30.取少量酵母菌液放入血球计数板直接记数,测得的数目是()
A.活细胞数B.死细胞数C.菌落数D.细胞总数
K解析』血球计数板直接记数的是细菌总数,不能排除死菌。
K答案UD
31.利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。请完善实验方案,
并回答相关问题。
【实验目的】比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性。
【实验原理】纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖,用葡萄糖的产生速率表示酶活性
大小;用呈色反应表示葡萄糖的生成量。
【实验材料】三种微生物(A〜C)培养物的纤维素酶提取液,提取液中酶蛋白浓度
相同。
【实验步骤】
(1)取四支试管,分别编号。
(2)在下表各列的一个适当位置,填写相应试剂的体积量,并按表内要求完成相
关操作。
管号
\234
X蒸悟水1.41.41.4
J
PH7.5的缓冲液0.20.20.2
纤维素悬浮液0.30303
微生物A提取液0.1
微生物B提取液
微生物C提取液0.1
总体枳2.02.02.02.0
(3)将上述四支试管放入37℃的水浴,保温1小时。
(4)在上述四支试管中分别加入试剂,摇匀后,进行处
理。
(5)观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅。
【实验结果】
色
深
浅
程
度
【分析讨论】
(1)该实验中的对照组是号试管。
(2)实验组试管均呈现的颜色是,但深浅不同。
(3)上述结果表明:不同来源的纤维素酶,虽然酶蛋白浓度相同,但活性不同。
若不考虑酶的最适pH和最适温度的差异,其可能原因
是O
(4)你认为上述三种微生物中,最具有应用开发价值的是。
(5)从解决能源问题的角度,开发这种纤维素酶的意义在于
O
K解析』从表中可以看出,实验者是用第4支试管来作为对照的,在实验步骤中,
要达到每支试管中溶液总量均为2.0ml,比较各组中的变量关系,就会发现1、2、3
支试管中的区别应该是酶的种类不同第4支试管中不加酶,而加入等量的蒸储水,
其它因素均相同。故在1号试管中应补充等量的缓冲液,2号试管中应补充等量的
微生物B的提取物,3号试管中也补充与其它试管等量的纤维素县浮液,4号试管
中应补充的蒸储水量=1.4+0.1=1.5ml。欲检测四支试管的实验产物的量,可用班氏
试剂或斐林试剂,出现的现象是红黄色或砖红色,含糖量越多,颜色越深。上述结
果中,若不考虑酶的最适PH和最适温度的差异,在酶浓度也相同时,酶活性的差
异就应该是酶本身的差异了,如酶的氨基酸序列不同或空间结构不同。上述三种微
生物中,产物中含糖量最大的说明其酶的活性最强,即微生物B最有开发的价值。
开发此酶可以解决农产品秸秆转化问题,可以为利用农产品的废弃物来生产饲料或
酒精等开辟新机遇等。
K答案》【实验步骤】(2)如下表
1234
蒸值水L5
'pH7.5的缓冲液02
纤维素悬浮液
,生物A提取物
微生物B提取物QJ_
微生物C提取物
总体枳
(4)班氏加热(加热至沸腾)
【分析讨论】(1)4(2)红黄色(3)不同酶的氨基酸序列不同(不同酶的空
间结构不同)(4)微生物B(5)葡萄糖可用作制取酒精的原料;用纤维素代
替化石燃料(言之有理即给分)
二、跟踪精练
1.关于微生物的营养,说法正确的是()
A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量
C.除水以外的无机物仅提供无机盐D.无机氮源也能提供能量
K解析X对异养微生物来说,含C、H、0、N的化合物既是碳源,又是氮源。C02
是光能自养细菌的碳嫄,但不能提供能量。CO?和N?是无机物,也是微生物的碳源
和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨,同时氨也为硝化细菌提供用以化能
合成作用的能源。
K答案HD
2.能够测定样品活菌数的方法是()
A.稀释涂布平板法B.直接计数法C.重量法D.比浊法
K解析》利用稀释涂布平板法可以使单个活菌在固体培养基上分散开来,并繁殖
形成菌落,从而根据菌落数测定出测定样品活菌数。
R答案1A
3.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消
毒方法依次是()
①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴
氏消毒法
A.⑤③②①④⑥B.①②③④⑤⑥C.⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤
K解析』根据灭菌、消毒方法的适用范围解答该题。
K答案》A
4.在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时,甲组实验用氮源只含尿素的培
养基,乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基,其他成分都相同,在相同条
件下操作,培养与观察,则乙组实验属于()
A.空白对照B.标准对照C.相互对照D.条件对照
K解析》乙组和甲组实验的培养条件不同,形成了条件对照。
K答案UD
5.培养SARS病毒时,应选用()
A.固体培养基B.含有多种无机盐的培养液C.活的鸡胚D,牛肉汤
K解析』病毒只有寄生在宿主的活细胞内才能进行繁殖等。
R答案Xc
6.关于制备牛肉膏蛋白豚固体培养基,叙述错误的是()
A.操作顺序为计算、称毓、溶化、倒平板、灭菌
B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯
C.待培养基冷却至50C左右时进行倒平板
D.待平板冷却凝固约5〜lOmin后将平板倒过来放置
K解析》制备牛肉膏蛋白豚固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平
板,不能颠倒。牛肉膏容易吸潮.所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻棒取
出称量纸。待培养基冷
却至50℃,用手触摸锥形瓶刚刚不烫手,并且培养基处于溶化状态。平板冷却几
分钟后还需倒置。
(答案XA
7.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的
培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌;
在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群
体中分别分离出()
①大肠杆菌;②霉菌;③放线菌;④固氮细菌。
A.②③④B.①②③C.①③④D.③④
K解析』缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长,而固氮细菌能生长;在培
养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌,霉菌能生长;在培养基中加入10%酚
可以抑制细菌和霉菌,放线菌能生长。
R答案2A
8.在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养
基上培养,可将自生固氮菌与其他细菌分开,对培养基的要求是()
①加抗生素②不加抗生素③加氮素④不加氮素⑤加葡萄糖⑥不加
葡萄糖
⑦37℃恒温箱中培养⑧28〜30℃温度下培养
A.①③⑤⑦B.②④⑥⑧C.②④⑤⑧D.①④⑥⑦
K解析X自生固氮菌有固氮功能,因此培养基中不需要加氮素,细菌对抗生素敏
感,因此,不能加,自生固氮菌是异养的,应加葡萄糖,生长繁殖的适宜温度是
28—30℃o
K答案』C
9.微生物与
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