医学遗传学实验课程教学大纲

医学遗传学实验课程教学大纲课程编号：12031130课程名称：医学遗传学/MedicalGenetics课程属性：必修实验属性：独立设课开课学期：第四学期学时：12学时适用专业：五年制临床本科学分：1学分开课部门：医学院生化与遗传教研室考核要求：开卷考试、百分制(操作考试70%，平时考核30%)、及格线60分课程简介：医学遗传学实验课是医学遗传学课程的重要内容。实验课有助于加深和巩固基础理论知识，并进一步了解和掌握本学科的基本实验内容和操作技能。在培养学生分析问题、综合解决问题能力方面具有重要作用。为此，要求学生做到以下几点：1、实验课前做好预习，明确实验目的、实验原理。2、复习有关理论内容。3、熟悉实验的主要步骤。4、初步估计和判定实验的可能结果。一、实验项目设置及学时分配项目编号实验项目名称实验类型开出要求学时分配1人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备综合联合42人类染色体核型分析验证独立43遗传咨询设计独立4学时总计12二、实验内容及教学要求实验项目1：人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备1、教学内容（1）采血在采血前，对各种用品进行清洗、无菌处理，配制、分装并冻存培养液(5mL／瓶)用5mL注射器抽取肝素0.1mL，备用。常规消毒肘部皮肤，用抽取肝素的注射器静脉采2mL，轻轻摇匀，待接种培养。（2）接种培养将事先配制冻存的装有5mL培养液的链霉素培养瓶或其它培养瓶从冰箱中取出，置室温融化，每瓶滴入约0.3mL肝素抗凝血，轻轻摇匀，置370C培养箱培养72（3）积累分裂中期细胞在终止培养前2小时，于培养瓶内加入浓度为20μg／mL秋水仙素1滴，终浓度为0.1-0.15μg/mL，摇匀，置370C温箱继续培养2小时后收集细胞、制片。（4）制片a收集细胞：b低渗：c预固定：d固定(一)：f固定(二)：g滴片：h染色和观察：2、教学目标（1）了解：细胞体外培养时生长、分裂所需条件。（2）熟悉：人类外周血淋巴细胞短期培养的方法（3）掌握：染色体标本的制备技术。实验项目2：人类染色体核型分析1、教学内容（1）正常人类染色体非显带的核型和G带带型识别的主要特征（2）正常人非显带和G显带核型分析A、每位同学发正常人外周血淋巴细胞非显带和G显带中期分裂相照片各1张。其中一张将染色体按其轮廓逐个剪下，根据其大小、带型特点和着丝粒位置等，依次分组、配对，排放在核型分析纸上。摆放时短臂向上，长臂向下，着丝粒位于铅笔画的横线上，多次调整检查无误后，方可进行粘贴。B、将照片适当剪小，粘贴在核型分析纸上方正中间。C、写出分析结果。2、教学目标（1）了解非显带染色体的核型分析方法。（2）熟悉G显带核型染色体特征（3）掌握G显带核型分析方法实验项目3：遗传咨询1、教学内容（1）分析下列系谱，判断各系谱中单基因遗传病的遗传方式，并写出患者及其他各成员的基因型(图1～图5)。（2）某女曾生育过一先天愚型患儿，现再次妊娠，惧怕再生同病患儿前来咨询。应该怎样计算再发风险？（3）某种遗传病男女发病机会均等，而且发病的患者可出现在父母均正常的家庭中。现有一对表现都正常的姨表兄妹，准备结婚，虽然双方父母正常，但他们的舅表兄患有此病，所以前来咨询。a.请问此病的遗传方式如何？b.这对姨表兄妹都是携带者的可能性有多大?c.他们婚后出生此病患儿的概率是多大?d.如果他们均为携带者，那么他们婚后生出此病患者的可能性有多大?(4)某男性，38岁，两次结婚，第—妻妊娠8次均于妊娠2个月左右流产，故离婚，与第二妻婚后，女方受孕3次亦均在3个月内流产。请分析流产的原因以及能否再次妊娠。(5)一对夫妇生有苯丙酮尿症(PKU)的患儿，他们听说是遗传病后，前来咨询，问题是：a.他们二人及家庭各成员中全无这种病的患者，这怎么能算遗传病呢?b.是谁的问题?能不能治疗?他们再生一个孩子患PKU的可能性是多大?如何预防患儿的出生?（6）一对新婚夫妇，由于女方的弟弟患有白化病，害怕今后会生育白化病患儿前来咨询。（7）有一对外表正常的夫妇，怀孕4胎中，有两次流产，存活的长女表型正常，但其染色体数目为45条，存活的男孩是一个具有46条染色体的先天愚型患者。a.请解释男孩的发病原因。b.长女将来会发病吗？婚后会生出先天愚型患儿吗?如果能，是否能防止患儿的出生?（8）一对夫妇婚后，怀孕5次，其中4胎流产，1胎多发畸形。经细胞遗传学检查丈夫为倒位携带者，他们还能否生出正常的孩子?如果能，表型正常的孩子的核型如何?（9）一位青年准备与他的姑表妹结婚，他们认为在他们的家系中从来没有过遗传病的患者，他们结婚对后代不会有影响。请你从我国人群的遗传负荷是每人平均携带5个有害基因的角度说明他俩不宜结婚的原因。（10）如果苯丙酮尿症的群体发病率为0.0001，表兄妹婚后后代患苯丙酮尿症的概率有多大?是随机婚配的多少倍?（11）一位女性表型正常，父母和两个哥哥表型也正常，但因她的两个舅舅患有假肥大型肌营养不良症(XR)前来咨询。a.她是携带者的可能性有多大?b.如她与正常男性结婚，婚后生男孩的复发风险是多大?生女孩的复发风险是多大?c.如果她婚后生了一个患者，如再生育，则生一个正常孩子的可能性是多少?(12)Huntington舞蹈症为常染色体显性遗传病，25岁以前发病的占10％，40岁以后发病的占60％。一位25岁的男性，表型正常，其外祖父患有该病，他的母亲现已45岁，表型也正常，请问他是携带者的可能性是多少?他将来的子女获得致病基因的风险是多少?2、教学目标（1）通过对单基因病(或性状)的系谱分析，了解系谱分析的一般方法。（2）熟悉遗传病再发风险的估计方法（3）掌握遗传咨询的一般过程三、考核方式及要求开卷考试、百分制(操作考试70%，平时考核30%)、及格线60分四、主要仪器设备及实验材料项目编号实验项目名称主要仪器设备及台（套）数实验材料备注1人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备超净工作台2台；CO2温培养箱1只；离心机6台；冰箱1只；水浴箱2只；烤箱1只人体外周血、人外周血培养液、胰蛋白酶、Hanks液、2％碘酒、75％酒精、NaHC03、秋水仙碱、KCl、Na2Hp04KH2P04甲醇、冰醋酸、Giemsa染液、载玻片、酒精灯、无水乙醇、火柴、竖式染色缸5mL吸管、直头小吸头、10mL刻度离心管、2mL或5mL一次性注射器、量筒、烧杯、试管架止血带、棉签、pH试纸等2人类染色体核型分析光学显微镜(附照相设备)2套；光学显微镜配油镜头50台人染色体核型自制玻片和照片、生理盐水、二甲苯、松柏油、记号笔、染色玻璃板吸水纸(滤纸)和擦镜纸、剪刀、镊子、核型分析纸、胶水、铅笔和橡皮等3遗传咨