DB34-T 4340-2022 法医物证鉴定 线粒体DNA种属鉴定技术规范

DB34/T

4340—2022

DNA

1 范围本文件规定了法医物证鉴定线粒体种属鉴定的基本要求、检验程序和鉴定意见书。本文件适用于安徽省法医实验室通过线粒体DNA测序的方法对动物源生物检材（包括但不限于血液、肌肉、毛发、骨骼、牙齿）的种属来源进行确认，确认范围为人和高等脊椎动物。2 规范性引用文件文件。GA/T

法庭科学DNA实验室检验规范SF/Z

法医物证鉴定线粒体检验规范CNAS-CL08-A002:2018

司法鉴定/法庭科学机构能力认可准则在法医物证

DNA

鉴定领域的应用说明《司法鉴定文书规范》 司发通〔2016〕112号3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。法医物证鉴定 forensic

biology

identification鉴定人运用法医物证学的科学技术或者专门知识，对各类生物检材进行鉴别和判断并提供鉴定意见的活动。种属鉴定 speciesidentification广义上的种属鉴定包括动植物的类属确定，狭义的种属鉴定指的是动物的生物检材的种属来源鉴定，即确定检材是否属于人体所有，有时还要确定检材属于何种动物。线粒体

DNA

DNA,

mtDNA位于线粒体中的DNA，呈双链环状结构。序列比对 alignment为确定两个或多个序列之间的相似性和同源性，将它们按照一定的规律进行排列。4 缩略语下列缩略语适用于本文件。CO

I:细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ（cytochrome

c

I）DB34/T

4340—2022DNA:脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic

acid）PCR:

chain

reaction）12SrRNA:12S核糖体核糖核酸（

ribosomal

RNA）5 基本要求应符合SF/Z

中～的要求。6 检验程序样本采集6.1.1 含有

的生物检材（包括但不限于血液、肌肉、毛发、骨骼、牙齿）均可采集。6.1.2 样本应分别包装，注明编号、采样日期、采样地点等信息。6.1.3 样本采集后应及时进行实验。DNA

提取和纯化按照GA/T

中附录A的方法执行。PCR

扩增与产物测序6.3.1 PCR

根据需要，宜选择通用引物或自行设计引物进行扩增。本文件提供了两个线粒体片段通用引物示例供参考：

-AAACTGGGATTAGATACCCCACTAT-3-GAGGGTGACGGGCGGTGTGT-3CO

-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-36.3.2PCR

扩增产物测序宜采用纯化试剂盒或其他同行公认的纯化方法对

扩增产物进行纯化；宜采用商品化测序试剂盒进行测序PCR反应及毛细管测序电泳，获得序列信息。6.3.3质量控制从事种属鉴定的实验室至少应该包括以下质量控制措施：a)

对照设置：每次实验需严格设置阳性（已知的

DNA

样品）和阴性（不加

DNA

的空白）对照；b)

次测序；c)

污染防控：实验室应采取措施以防止污染，并符合

CNAS-CL08-A002:2018

中

7.4.4

要求。序列比对鉴定DB34/T

4340—2022将测序获得的DNA序列在国际通用的基因数据库中进行核苷酸序列比对，宜结合序列比对结果、物种形态、地理分布、时间等综合信息出具鉴定意见。7 鉴定意见书鉴定人根据

6.4

结果撰写鉴定意见书。鉴定意见书的格式要求参照《司法鉴定文书规范》的规定执行。DB34/T

4340—2022参 考 文

献[1]

GA/T

法庭科学实验室建设规范[2]

SF/T

0069-2