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文档简介
DB34/T
4340—2022
DNA
1 范围本文件规定了法医物证鉴定线粒体种属鉴定的基本要求、检验程序和鉴定意见书。本文件适用于安徽省法医实验室通过线粒体DNA测序的方法对动物源生物检材(包括但不限于血液、肌肉、毛发、骨骼、牙齿)的种属来源进行确认,确认范围为人和高等脊椎动物。2 规范性引用文件文件。GA/T
法庭科学DNA实验室检验规范SF/Z
法医物证鉴定线粒体检验规范CNAS-CL08-A002:2018
司法鉴定/法庭科学机构能力认可准则在法医物证
DNA
鉴定领域的应用说明《司法鉴定文书规范》 司发通〔2016〕112号3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。法医物证鉴定 forensic
biology
identification鉴定人运用法医物证学的科学技术或者专门知识,对各类生物检材进行鉴别和判断并提供鉴定意见的活动。种属鉴定 speciesidentification广义上的种属鉴定包括动植物的类属确定,狭义的种属鉴定指的是动物的生物检材的种属来源鉴定,即确定检材是否属于人体所有,有时还要确定检材属于何种动物。线粒体
DNA
DNA,
mtDNA位于线粒体中的DNA,呈双链环状结构。序列比对 alignment为确定两个或多个序列之间的相似性和同源性,将它们按照一定的规律进行排列。4 缩略语下列缩略语适用于本文件。CO
I:细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome
c
I)DB34/T
4340—2022DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic
acid)PCR:
chain
reaction)12SrRNA:12S核糖体核糖核酸(
ribosomal
RNA)5 基本要求应符合SF/Z
中~的要求。6 检验程序样本采集6.1.1 含有
的生物检材(包括但不限于血液、肌肉、毛发、骨骼、牙齿)均可采集。6.1.2 样本应分别包装,注明编号、采样日期、采样地点等信息。6.1.3 样本采集后应及时进行实验。DNA
提取和纯化按照GA/T
中附录A的方法执行。PCR
扩增与产物测序6.3.1 PCR
根据需要,宜选择通用引物或自行设计引物进行扩增。本文件提供了两个线粒体片段通用引物示例供参考:
-AAACTGGGATTAGATACCCCACTAT-3-GAGGGTGACGGGCGGTGTGT-3CO
-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-36.3.2PCR
扩增产物测序宜采用纯化试剂盒或其他同行公认的纯化方法对
扩增产物进行纯化;宜采用商品化测序试剂盒进行测序PCR反应及毛细管测序电泳,获得序列信息。6.3.3质量控制从事种属鉴定的实验室至少应该包括以下质量控制措施:a)
对照设置:每次实验需严格设置阳性(已知的
DNA
样品)和阴性(不加
DNA
的空白)对照;b)
次测序;c)
污染防控:实验室应采取措施以防止污染,并符合
CNAS-CL08-A002:2018
中
7.4.4
要求。序列比对鉴定DB34/T
4340—2022将测序获得的DNA序列在国际通用的基因数据库中进行核苷酸序列比对,宜结合序列比对结果、物种形态、地理分布、时间等综合信息出具鉴定意见。7 鉴定意见书鉴定人根据
6.4
结果撰写鉴定意见书。鉴定意见书的格式要求参照《司法鉴定文书规范》的规定执行。DB34/T
4340—2022参 考 文
献[1]
GA/T
法庭科学实验室建设规范[2]
SF/T
0069-2
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