丁卡因半数致死量课件

机能实验教学

2012.5.丁卡因半数致死量测定

药物毒性试验的目的在于揭示某一药物的毒性强度、选择性、发展过程以及所造成的损伤是否可逆、能否防治等。

通常将药物毒性试验的方法按照给药时间的长短和观察方法的不同，分为急性毒性试验、亚急性毒性试验、慢性毒性试验和特殊毒性试验。2实验背景1927年“评量药剂致命程度的度量方式”

LD50（J.W.Trevan）首先提出

。

定义:

1.“能杀死一半试验总体之有害物质、有毒物质或游离辐射的剂量”。

2.指在质反应中引起50%实验对象死亡时的药物剂量。评价药物毒性大小、效价强度、治疗指数。特殊毒性：——致突变、致畸、致癌试验1.反应停事件——短肢（海豹肢）。在德国、英国和日本等造成1万名畸形儿的悲惨事件。2.水俉病——精神迟顿，大脑麻痹症。发生率高达6%

由药源性和非药源性引起的疾病，特别是新药进入临床后的使用所产生的，有时是无法事先预测的。为此，需要广大的医护工作者进行大量的临床观察，总结其不良反应及疗效。急性毒理试验

（ＬＤ５０）

24小时内一次或多次给药后连续观察动物产生的毒性反应和死亡情况。其观察应从定性和定量两方面进行。

定性：主要观察用药后动物有哪些中毒表现（如是否耸毛、蜷卧、耳壳苍白或充血、突眼、步履蹒跚、瘫痪、昏迷、抽搐、惊厥、呼吸困难、大小便失禁等），毒性反应出现和消失的速度，涉及哪些组织和器官，最主要的可能毒性靶器官是哪个，损伤程度及可逆程度如何，中毒死亡过程中的特征，可能的死亡原因是什么等。

定量：观察药物毒性反应与剂量的关系，求出LD50及其相关的统计量。

测定LD50的意义

(1)新药申报——必须提供的资料(2)药物毒性大小——评价药物优劣的重要参数

(3)评价药物安全性——治疗指数安全范围

２.安全范围：较好的药物安全性指标是：ＥＤ９５～ＬＤ５之间的距离，即安全范围，其值越大越安全。

药物的安全性与药物的剂量（或浓度）有关。

实际应用价值

药物筛选的第一步：１．药物的毒性高低。２．动物的实验性研究中，推算出治疗剂量（取ＬＤ５０的几分之几）。３．在临床上，一般可取１/５—１/１０ＬＤ５０开始试用，由小到大慢慢增加到不能耐受为止，从中探索出疗效满意和毒性较小的剂量。

任何一种新药过渡到临床前，都必须先做ＬＤ５０测定。

LD50

指导原则：

1.使用最少的动物获得最大的信息

2.两种以上给药途径（静脉1）啮齿类非啮齿类

3.给药后观察14天

4.记录所有现象病变尸检镜检

需详细记录，以备复查及供临床使用时参考

【目的】

了解药物毒性的概念

了解药物ＬＤ５０测定的步骤和方法

【原理】

局麻药：对各类组织都无损失性影响。

丁卡因为局麻药，它通过抑制神经细胞膜Na+内流,阻止神经动作电位的产生和冲动的传导，而产生局麻作用。

随着剂量加大，动物会相继出现一系列的症状直至死亡。实验方法（简单实验）一.预实验：

目的：初步摸出０和１００％死亡剂量，求公比——<1.40（r:1.11-1.33)方法：取９只小鼠，分三组，各小组剂量按等比数列（2:1；3:1）

（1）求出：（a)

0%；(b)

100%

（2）公式求公比（3）按公比算给药剂量：a,ar,……

１.给药：0.20ml/10g,腹腔注射低——高

15min观察后，再注下一剂量。２.观察：记录中毒症状的各种表现(PPT6)

观察时间：1.5h

３.记录：出现中毒症状的时间，和死亡的时间及数量。实验：

【注意事项】

1.实验时，不要把各组剂量搞混，剂量要准确。2.注射部位要正确，以免将药物注入肠腔、脏器或膀胱内。3.外环境（室温20℃，安静）4.动物死亡以后，立刻解剖取出肝脏，冰箱保留备用。表：盐酸丁卡因的小鼠毒性试验结果（全班）

D（mg/kg)LgDn死亡数PP2