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文档简介

标准化操作规程临床微生物TE、01、03标准化操作规程临床微生物TE、01、03支原体药物敏感性分析编制人审核人批准人批准日期修改日期签字修改日期签字复审日期签字复审日期签字支原体药物敏感性分析一、测定原理：为了定量测定抗菌药物的活性，抗菌药物与肉汤或琼脂培养基混合进行稀释，然后种入试验细菌，孵育过夜，能抑制细菌生长的最低浓度称为该抑制剂的最低抑俊浓度（MIC），然后将MIC与机体血清或体液中可获得药物浓度相比较，来确定恰当的临床疗效。二、所用仪器:35-37℃孵育器，冰箱三、试剂来源：带有8种抗生素的药敏分析试剂板（合肥恒星科技发展有限公司）。四、试剂板和培养基的贮存：试剂板包装标示的保质期内应避光贮存在4℃以下。五、操作程序：5.1试剂板的准备：5.1.1将试剂板从包装中取出。5.1.2弃去干燥剂和固定干燥剂的纸片。5.2菌悬液的制备：5.2.1挑取单菌落于5ml无菌生理盐水中制成0.5麦氏单位的混悬液（A管），从中吸取0.1ml,加入10ml无菌盐水中混匀(B管)。B管倒入经灭菌后的菌液槽里制成B液。5.2.2利用12道微量加样器吸取B液，加入试剂板C、D、E等3排孔中，每孔0.1ml。5.2.3盖好试剂板，置于35℃培养箱培养24-48六、判读试剂板:6.1连接仪器：6.1.1将电脑，微生物细菌鉴定药敏分析仪和打印机连接。6.1.2打开电脑，再开启微生物鉴定药敏分析仪，并在需要打印时开启打印机。6.2打开软件：6.2.1点击“细菌分析”程序，单击主菜单“鉴定分析”，从中选择下拉框“细菌分析6.2.2将基本信息填写完整，在“菌属”里选择“支原体”，点击下一步，进入“生化鉴定6.2.3输入生化鉴定出的结果，再点击下一步，进入“药敏分析6.3判读结果：6.3.1点击“分析6.3.2对应右边界面的抗生素名称，左边会有反映MIC值高中低的三个不同梯度，仪器读取后会根据试剂板相应结果在各个梯度选项前打“√”。6.3.3仪器会根据每个抗生素在试剂板最终反映出的现象判读药敏结果。七、质量控制：为确保上述方法的标准化操作，可靠性和可重复性可使用推荐的菌种（ATCC）进行质控实验。八、生物废物的处理：完成测试、判断后，所有标本、污染物和接种过的试剂板在丢弃之前，都需经高压灭菌、烧烬或浸泡杀菌剂中。九、注意事项：在将菌悬液滴入试剂板以及后面的读板等操作中，需按照使用说明严格规范的操作，以保证结果判读准确。十、可能影响结果的因素10.1用过期的或储存不当的试剂板和培养基。10.3试验板为一次性使用产品。必须在打开后立刻使用。10.4不要使用毁坏的试剂板：诸如干燥剂袋口打开情况下不要使用。10.5混合培养或培养污染。10.6试剂板中有气泡混入。1

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