临床血液学检验：实验四 POXandPAS

实验三过氧化物酶染色（POX）过碘酸-雪夫反应（PAS）细胞化学染色

CytochemicalStaining实质是原位显示细胞成分结构，常为不移动的有机化学物。细胞化学染色包括三个步骤：固定化学染色（包括复染）化学定量过氧化物酶染色

PeroxidaseStaining

（POX）1.原理：

传统方法----联苯胺法

过氧化氢过氧化物酶新生态氧联苯胺

联苯胺蓝亚硝基铁氰化钠稳定的蓝色化合物然后10分钟操作步骤新鲜涂片滴加A液3滴（覆盖标本即可）滴加等量B液3滴,吹匀水洗，甩干甩干，镜检滴加C液3滴，D液6滴混匀5分钟注意事项（1）标本要新鲜（2）试剂要室温，用后要盖好，防止挥发（3）加试剂要充分混匀，使染色均匀结果判断（100×）胞浆中出现红棕色至蓝黑色颗粒为阳性反应（—）无颗粒沉着（弱+）颗粒细小，分布稀疏（+）颗粒较粗常呈局灶性分布（++）颗粒粗大分布较密占胞浆1/2~2/3（+++）颗粒粗大，呈团块状分布（++++）颗粒布满细胞，可覆盖胞核正常参考值

正常人淋巴细胞、红细胞、巨核细胞、成熟嗜碱性粒细胞，均无POX；粒细胞系统：早幼粒以下阶段细胞均为阳性，且逐渐加强，嗜酸粒细胞阳性最强单核细胞内POX呈弱阳性。临床意义

1.辅助鉴别急性白血病的类型急性粒细胞白血病AML（+）急性淋巴细胞白血病ALL（-）(阳性率<3％)

急性单核细胞白血病AMOL（-/±）

2.辅助鉴别急性早幼粒细胞白血病（APL)、急性单核细胞白血病（AMOL)、恶性组织细胞病（MH)A:APLB:AMMLC:AMOLD:ALL过碘酸是一种氧化剂，能使细胞内含有乙二醇的糖类氧化产生双醛基，醛基与schiff试剂中的品红结合，形成紫红色化合物，定位于含有多糖成分的部位。PeriodicAcid-Schiff(PAS)reaction过碘酸－雪夫反应（糖原染色)操作步骤涂片滴加A液3滴固定60秒（DW冲洗，待干）滴加B液（高碘酸）3滴氧化10min，DW冲洗，待干滴加C液（雪夫染液）3滴氧化15min，DW冲洗待干滴加D液（甲绿）3滴复染5分钟镜检DW冲洗待干结果阳性反应：胞质内染红色或紫红色，呈弥散状、颗粒或块状。胞核染成绿色。PAS反应沉淀颗粒特点粒系统（+）细颗粒状或均匀红色淋巴系统少数（+）（<20％）粗颗粒状或块状单核系统（+）细颗粒状红系（-）巨核系（+）颗粒状或块状正常血细胞PAS染色特点

临床意义1.鉴别淋巴系统增生的性质恶性增生时多呈强阳性---ALL、CLL、淋巴瘤（红色颗粒或块状）2.鉴别红系增生的性质红血病、红白血病为强阳性地中海贫血、IDA、MDS为阳性巨幼细胞性贫血、HA、AA阴性3.急粒大多数阴性/少数阳性（均匀分布颗粒）4.巨核系（血小板）阳性，有助于M7的诊断5.Gaucher

细胞(+)，Niemman-pick

细胞(-/±)注意事项：1.试剂要在室温2.雪夫试剂及时使用3.结果及时观察，放置1周褪色CLLALLALLALL中粗

粗粒散在分布A:红白血病B:巨幼贫M6PAS染色POXPAS然后10分钟新鲜涂片滴加A液3滴（覆盖标本即可）滴加等量B液3滴,吹匀水洗，甩干甩干，镜检滴加C液3滴，D液6滴混匀5分钟涂片滴加A液3滴固定60秒（DW冲洗，待干）滴加B