水质 丙烯酰胺的测定 方法验证报告

方法验证报告方法名称：水质丙烯酰胺的测定气相色谱法方法编号：HJ697-2014验证单位：***********有限公司验证日期：*****年***月***日1、目的本方法验证主要依据HJ168-2020环境监测分析方法标准制修订技术导则编制的要求，从设备、环境条件、人员能力、标准物质及试剂，以及检出限、精密度和准确度（参照HJ168-2020），以验证实验室能力满足HJ697-2014的要求。2、方法简介2.1适用范围本本标准规定了测定水中丙烯酰胺的气相色谱法。本标准适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中丙烯酰胺的测定。2.2方法原理在pH为1~2条件下，丙烯酰胺与新生溴发生加成反应，生成a,卩-二溴丙酰胺。用乙酸乙酯萃取a,卩-二溴丙酰胺，萃取液经无水硫酸钠干燥、浓缩、定容后，用带有电子捕获检测器的气相色谱仪进行分离和检测，根据保留时间定性，外标法定量。2.3仪器条件（实际验证条件）进样口：250°C；分流比：10；进样量：1.0yL；柱温：100C保持1min,以30C/min升温至220C，保持5min,以20C/min升温至240C，保持5min。载气：氮气；色谱柱流量：1.5mL/min。电子捕获检测器（ECD）：250Co2.4样品采集与保存用洁净的磨口玻璃瓶或具特氟龙材质隔垫的棕色螺纹口玻璃瓶采集250mL样品，于2C~5C下保存，7d内完成萃取，萃取液可保存30do本次用于方法验证采集的样品编号为FS21YL110101。2.5分析步骤2.5.1校准曲线取每次分析样品时，均应使用丙烯酰胺标准溶液（5.2）绘制工作曲线。取6只250mL碘量瓶，各加入100mL纯水，分别加入适量的丙烯酰胺标准使用溶液，配制成丙烯酰胺质量浓度分别为0.20卩g/L,0.80卩g/L,3.00卩g/L,20.0卩g/L,70.0卩g/L,120卩g/L的标准系列。按照试样的制备（2.5.2）步骤进行处理，定容至10mL，按推荐的色谱条件进行测定，以处理定容后的标准溶液系列的浓度（卩g/L）为横坐标，对应的色谱峰响应值（峰面积/峰高）为纵坐标，绘制工作曲线。2.5.2试样的制备2.5.2.1量取100.0mL样品置于250mL碘量瓶中，加入6.0mL硫酸溶液，混匀，2C~5C下放置30min。2.522取出碘量瓶，加入15.0g溴化钾，溶解后加入10mL溴酸钾溶液混匀，2°C〜5°C下放置2h。2.5.2.3取出碘量瓶，边振荡边逐滴加入硫代硫酸钠溶液，直至溶液变成无色为止。2.524向碘量瓶中加入磁力搅拌子，在磁力搅拌器剧烈搅拌下缓慢加入30g无水硫酸钠，待完全溶解后，加塞静置10min。注1：在加入无水硫酸钠过程中，不能使无水硫酸钠结块。2.5.2.5转移上述试液至250mL分液漏斗，向分液漏斗中加入25mL乙酸乙酯，置于振荡器上剧烈振荡5min，静置分层，重复萃取2次，取有机相。2.5.2.6用硅酸镁净化柱和无水硫酸钠脱水净化后，用旋转蒸发仪和氮吹仪将萃取液浓缩至5mL左右，用乙酸乙酯定容至10.0mL，待测。2.6结果计算样品中目标物的含量按以下公式进行计算：式中：C 样品中丙烯酰胺的质量浓度，yg/L；P—从工作曲线上查得的试样中丙烯酰胺的质量浓度，yg/L；V1 萃取液体积，mL；V——水样体积，mL。3、仪器设备验证情况标准要求实验室配备气相色谱仪：具电子捕获检测器。岛津GC-2014，ECD检测器。色谱柱1：石英毛细管柱，30mx0.32mm,内涂聚乙二醇，膜厚0.25ym。色谱柱2：石英毛细管柱，30mx0.32mm,内涂35%苯基-甲基聚硅氧烷，膜厚0.25ym。或其它等效毛细管色谱柱OV-1701,30m*0.32mm*0.5ym。振荡器。水平振荡器浓缩装置：旋转蒸发仪、氮吹仪或其他同等性能的设备。旋转蒸发仪、氮吹仪实验室配备的仪器和设备满足标准要求。4、环境条件验证情况环境条件符合控制要求，详见《环境监控记录表》，仪器房内设有温度湿度计及记录表，分析测试人员每日对温度湿度进行监控，监控范围为温度：15-35C，湿度：20%-80%。

5、人员能力验证情况该项目目前配备3名专业技术人员，通过培训考核并持证上岗，见表1。表1参加验证人员情况登记表姓名所学专业从事分析工作年限职称姓名所学专业从事分析工作年限职称考核记录详见人员培训档案及《质量考核结果评价表》6、标准物质及试剂验证情况标准要求实验室配备乙酸乙酯：农残级乙酸乙酯：分析纯。溴化钾（KBr）。溴化钾（KBr），分析纯。溴酸钾溶液：c（KBrO3）=0.1mol/L溴酸钾（KBrO3），分析纯。无水硫酸钠，在400°C灼烧4ho无水硫酸钠，分析纯，在400C灼烧4ho丙烯酰胺标准溶液（ch2chconh2）：p=100mg/L，溶剂为甲醇。市售有证甲醇中丙烯酰胺标准溶液，p100mg/Lo硫代硫酸钠溶液：c（Na2S2O3）=1.0mol/Lo硫代硫酸钠（Na2S2O3），优级纯。硫酸溶液：c(H2SO4)~3mol/Lo硫酸（H2SO4），优级纯。实验室配备的标准物质及试剂满足标准要求。7、检出限、精密度和准确度（参照HJ168-2020）检出限、精密度和准确度实验原始测试数据详见附表《检出限、精密度、准确度原始数据汇总表》。7.1检出限取编号为FS21YL110101J1的样品7份，按照样品分析的全部步骤（2.5），进行7次平行测定。计算7次平行测定的标准偏差，按以下公式计算方法检出限。MDL=I（r_lj0i99）XS式中：MDL—方法检出限；n—样品的平行测定次数；t—自由度为n-1，置信度为99%时的t分布（单侧）；S—n次平行测定的标准偏差。其中，当自由度为n-1，置信度为99%时的t值可参考表2表2t表值

平行测定次数（n）自由度（n-1）E(n-LA99)763.143872.998982.8961092.82111102.76416152.60221202.528MDL值计算出来后，需判断其合理性：按照样品分析的全部步骤，对浓度或含量为估计方法检出限2~5倍的样品进行n（n>7）次平行测定。计算n次平行测定的标准偏差，按照上式计算方法检出限。对于针对单一组分的分析方法，如果样品浓度超过计算出的方法检出限10倍，或者样品浓度低于计算出的方法检出限，则都需要调整样品浓度重新进行测定。选择比值在3~5之间的MDL作为该化合物的MDL。本次方法验证检出限详见附表1。7.2测定下限以4倍检出限作为测定下限，本次方法验证测定下限详见附表1。7.3精密度分别对地下水样品（样品编号为FS21YL110101）加标的方式开展精密度测定，加标浓度分别为低、中、高三个不同浓度系列（见表3）。加标样品按照样品分析的全部步骤，进行6次平行测定。计算不同浓度样品的平均值、标准偏差、相对标准偏差等各项参数。表3不同浓度地下水样中浓度值 单位：yg/L浓度水平样品编号浓度水平低浓度/（yg/L）FS21YL110101J1平行(1〜6)0.200中浓度/(yg/L)FS21YL110101J2平行(1〜6)1.80高浓度/（yg/L）FS21YL110101J3平行(1〜6)10.0对某一水平浓度的样品在实验室内进行6次平行测定，实验室内相对标准偏差按如下公式（2）、（3）、（4）进行计算：（2）RSD,=nRSD,=(3)(4)式中：xk—实验室内对某一浓度水平样品进行的第k次测试结果；x—实验室对某一浓度水平样品测试的平均值；S—实验室对某一浓度水平样品测试的标准偏差；RSD—实验室对某一浓度水平样品测试的相对标准偏差。本次方法验证精密度详见附表2。7.4准确度7.4.1实际样品加标测试对样品编号为FS21YL110101的实际样品加标，分别进行6次平行测定。实际样品加标后目标物浓度值见表4。分别计算样品的加标回收率，加标回收率按如下公式（5）进行计算表4实际样品加标浓度值 单位：yg/L浓度水平样品编号浓度水平低浓度/（yg/L）FS21YL110101J1平行（1〜6）0.200中浓度/（yg/L）FS21YL110101J2平行（1〜6）1.80高浓度/（yg/L）FS21YL110101J3平行（1〜6）100E——第i个实验室对加标样品测试的平均值；// 加标量T£——第r牛实验室的力II标回收率；本次方法验证准确度详见附表3。7・5实际样品测试对样品编号为FS21YL110101的实际样品测试，结果见表5。表5实际样品测试结果FS21YL110FS21YL110ZYTDX2021ZYTDX2021方法检单位101101P001J2平行1001J3平行1出限丙烯酰胺NDND1.4885.50.05yg/L8、结论从设备、环境条件、人员能力、标准物质及试剂，以及检出限、精密度和准确度的验证结果说明实验室已具备《水质丙烯酰胺的测定气相色谱法HJ697-2014》方法的测试能力。

9、附件附表检出限、精密度、准确度原始数据汇总表编制 日期 编制 日期 批准 日期 附表检出限、精密度、准确度原始数据汇总表1、方法检出限、测定下限测试数据表1-1方法检出限、测定下限测试数据表平行样品编号丙烯酰胺/////测定结果（昭/L）10.198/////20.193/////30.207/////40.213/////50.216/////60.188/////70.226/////平均值'x；（ug/L）0.203-////标准偏差S；（ug/L）0.0136-////t值（无量纲）3.143-////检出限（ug/L）0.05-////标准方法检出限（ug/L）0.07-////测定下限（Ug/L）0.20-////标准方法测定下限（ug/L）0.28-////判定：验证结果满足标准要求2、方法精密度测试数据表2-1精密度测试数据平行样品编号丙烯酰胺///备注plp2p3/////////10.1981.4885.5//////////20.1931.858&5//////////测定结果30.2071.5295.2//////////（ug/L）40.2131.47100//////////50.2161.6986.9//////////60.1881.6896.9//////////标准偏差Si（ug/L）0.01130.1515.98//////////平均值'xi（ug/L）0.2031.6292.2//////////相对标准偏差RSDi（%）5.69.36.5//////////标准方法RSD（%）要求<20///判定验证结果满足标准要求

3、方法准确度测试数据表3-1加标测试数据平行样品编号阿特拉津加标量浓度1浓度2浓度3(gg)样品加标样品样品加标样品样品加标样品低中高测定结果（gg/L）10.000.1980.001.480.0085.50.0200.18010.020.000.1930.001.850.0088.50.0200.18010.030.000.2070.001.520