维生素的测定 市赛获奖

7.3脂溶性维生素的测定7.3.1VA的测定

维生素A存在于动物性脂肪中，主要来源于肝脏、鱼干油、蛋类、乳类等动物性食品中。植物性食品中不合VA，但在深色果蔬中含有胡萝卜素，它在人体内可转变为VA，故称为VA原。

原理在氯仿溶液中，VA与三氯化锑可生成蓝色可溶性络合物，在620nm波长处有最大吸收峰，其吸光度与VA的含量在一定的范围内成正比，故可比色测定。

适用范围及特点本法适用于维生素A含量较高的各种样品(高于5-10μg／g)，对低含量样品，因受其他脂溶性物质的干扰，不易比色测定。该法的主要缺点是生成的蓝色络合物的稳定性差。比色测定必须在6秒钟内完成，否则蓝色会迅速消退，将造成极大误差。7.3.2VD的测定

维生素D是指含有抗佝偻病活性的一类物质，具有维生素D活性的化合物约有l0种，其中最重要的是维生素D2、维生素D3及其维生素D原。维生素D2无天然存在，维生素D2只存在于某些动物性食物中。但它们都可由维生素D原(麦角固醇和7一脱氢胆固醇)经紫外线照射形成。

原理在氯仿溶液中，VD与三氯化锑可生成橙黄色化合物，500nm波长处有最大吸收峰，其吸光度与VD的含量在一定的范围内成正比，故可比色测定。7.1.3VE的测定比色法→操作简便、灵敏度高荧光法→特异性强、干扰少，灵敏快速气相色谱法

液相色谱法→简便、分辨率高测定方法比色法原理

维生素E能将高价铁离子还原为铁离子，低价铁离子与联氮苯发生颜色反应，可以进行比色测定。操作步骤

皂化→纯化→样品的测定→标准曲线的绘制→计算7.2.2VC的测定

维生素C有抗坏血病的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素C广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑桔等食品中含量尤其丰富。维生素C的测定方法很多，有滴定法、比色法、高效液相色谱法等。7.2水溶性维生素的测定7.2.2.1原理

还原型抗坏血酸可以还原染料2，6-二氯靛酚（2,6-D）。该染料在酸性溶液中呈粉红色，在中性或碱性溶液中呈蓝色，被还原后颜色消失。蓝色7.2.2.2试剂1.标准抗坏血酸溶液：准确称取50毫克纯抗坏血酸，溶于1%的草酸溶液中，并稀释至500毫升，贮棕色瓶，冷藏保存，最好临用时配制。

2.2%草酸溶液：草酸2克，溶于100毫升蒸馏水中。（研磨用）3.1%草酸溶液：1克草酸溶于100毫升的蒸馏水中。（定容用）4.0.01%

2，6—二氯靛酚溶液：溶50毫克2,6—二氯酚靛于300毫升含有104克

NaHCO3的热水中，冷却后加水稀释至500毫升，滤去不溶物，贮于棕色瓶内。7.2.2.3材料和器材1.新鲜蔬菜、水果2.吸量管1.0ml、10.0ml3.容量瓶25ml,100ml4.微量滴定管5ml5.天平6.研钵7.漏斗等7.2.2.4操作步骤1.样液制备

适量称取果蔬样品，+2ml2%草酸(抑制抗坏血酸氧化酶)用研钵磨成浆，漏斗+脱脂药棉过滤，滤液转入25ml容量瓶，用1%草酸定容。

2.标准液滴定

准确吸取1.0ml标准抗坏血酸溶液，于100ml锥形瓶中，+1%草酸9.0ml，用微量滴定管以2,6-D滴定至淡红色，15s不褪色即为终点。（由所用染料的体积计算出T值(平均值)，即1ml染料相当于多少mg的Vc。

）3.样液滴定

取10.0ml样液于100ml锥形瓶内，滴定方法同2，同时，做平行实验。7.2.2.5结果计算

χ=VT/m0×100式中χ：100g样品中含Vc的质量(mg)V：滴定时所用去染料体积(ml)T：每毫升染料能氧化Vc质量数(mg/ml)m0：10ml样液含样品之质量数(g)7.2.2.6注意事项1.滴定过程宜迅速，一般不超过2min，因为样品中某些杂质亦能