W5501微生物培养基的灭菌2微

微生物学及操作技术微生物培养基的灭菌实验室的培养基灭菌1培养基的工业灭菌2目录页CONTENTSPAGE1实验室的培养基灭菌间歇灭菌法过滤除菌湿热灭菌过渡页TRANSITIONPAGE一、间歇灭菌法间歇灭菌法：即常压灭菌，用于一些受高温而破坏的培养基的灭菌。操作方法：

a.待灭菌的物品放在灭菌器或蒸笼里，每天蒸煮1次，每次在100℃煮沸30～60min，连续3d重复进行。

b.在每两次蒸煮之间，将物品（指培养基）放在37℃恒温条件下培养24h，这样可以使每次蒸煮后未杀死残留的芽孢萌发成营养体，以便下次蒸煮时杀灭。c.第三次蒸煮之后基本无菌，但为了确保无菌仍要放在37℃恒温条件下培养24h，确定无菌才能使用。实验室的培养基灭菌

二、过滤除菌1、原理过滤除菌：不能用加热灭菌的液体物质（如维生素、血清），一般可用细菌过滤器进行除菌。2、实操实验室的培养基灭菌二、过滤除菌2.实操1.原理实验室的培养基灭菌三、湿热灭菌高压蒸汽灭菌操作步骤：高压蒸气灭菌法的操作步骤如下：1.灭菌锅内加入一定量的水。

2.将待灭菌的物品放入锅内，并关严锅盖。注意：器物不能装得太满。

3.接通电源，进行加热。

4.排除高压锅内的冷空气，可将排气阀打开，待温度计指示温度为100℃时关闭排气阀；实验室的培养基灭菌1、高压蒸汽灭菌3.影响湿热灭菌的因素2.煮沸灭菌三、湿热灭菌灭菌锅的使用实验室的培养基灭菌1、高压蒸汽灭菌3.影响湿热灭菌的因素2.煮沸灭菌三、湿热灭菌高压灭菌实验室的培养基灭菌1、高压蒸汽灭菌3.影响湿热灭菌的因素2.煮沸灭菌三、湿热灭菌实验室的培养基灭菌1、高压蒸汽灭菌3.影响湿热灭菌的因素2.煮沸灭菌高压灭菌注意事项三、湿热灭菌煮沸灭菌实验室的培养基灭菌2、煮沸灭菌3.影响湿热灭菌的因素1、高压蒸汽灭菌三、湿热灭菌影响培养基湿热灭菌的因素：（1）pH：影响微生物的耐热性。一般，pH6.0~8.0时，微生物最不容易死亡。（2）培养基成分：油脂、糖类及一定浓度的蛋白质都回增加微生物的耐热性；高浓度的盐类、色素则会削弱其耐热性。（3）气泡：影响传热。（4）颗粒：大颗粒（1mm以上）的传热系数很低，使灭菌不彻底。实验室的培养基灭菌1、高压蒸汽灭菌3.影响湿热灭菌的因素2.煮沸灭菌2培养基的工业灭菌过渡页TRANSITIONPAGE*种子培养基灭菌*培养基的分批灭菌种子培养基灭菌方法1、高压蒸汽灭菌锅、手提式灭菌锅。容量小。2、立式或卧式灭菌锅。容量较大，一般能装几十瓶或几百瓶。3、灭菌柜。要和蒸汽锅炉配套，用于大量种瓶培养基的灭菌，一次能装几百至几千瓶(袋)。1.种子培养基灭菌2.培养基的分批灭菌3.连续灭菌培养基的工业灭菌培养基的分批灭菌定义：将配制好的培养基输入发酵罐中，用蒸汽加热，使培养基和设备同时灭菌的一种灭菌方式，又称实罐灭菌。2.培养基的分批灭菌1.种子培养基灭菌过程包括升温、保温和冷却等三个阶段，各阶段对灭菌的贡献：20%、75%、5%。培养基的升温可由两种方式实现：间接加热，在夹套或蛇管中通入蒸汽加热；直接加热，在培养基中直接通入热蒸汽加热。3.连续灭菌培养基的工业灭菌保证分批灭菌成功的要素内部结构合理(主要是无死角)，焊缝及轴封装置可靠，蛇管无穿孔现象压力稳定的蒸汽合理的操作方法培养基的工业灭菌1.种子培养基灭菌2.培养基的分批灭菌连续灭菌：连续灭菌（连消）：培养基在罐外连续进行加热、维持和冷却，然后进入发酵罐的杀菌方法。3.连续灭菌优缺点：优点

–保留较多的营养质量

–容易放大

–较易自动控制；

–糖受蒸汽的影响较少缩短灭菌周期；–在某些情况下，可使发酵罐的腐蚀减少；–发酵罐利用率高；–蒸汽负荷均匀。培养基的工业灭菌1.种子培养基灭菌2.培