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文档简介
微生物的实验室培养专题二课题1第一课时微生物原核类:真核类非细胞类:细菌、支原体、放线菌、蓝藻酵母菌、霉菌、食用菌真菌:原生生物:显微藻类、原生生物(如:草履虫、变形虫等)病毒微生物的类群◆微生物一般是指一切肉眼看不见或看不清的微小生物,个体微小,结构简单,通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物的总称。微生物的实验室培养条件:(1)合适的营养和环境条件(2)确保其他微生物无法混入一.培养基
1.概念:按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。2.种类:液体培养基、固体培养基应用微生物分离、鉴定、计数和、菌种保存等方面(最常用固体培养基)按照培养基用途分
选择性培养基鉴别培养基完全培养基按照培养基的成分来源分
合成培养基、天然培养基、半合成培养基
加入凝固剂,如琼脂可形成菌落(按物理形态分)3.成分:思考:各种培养基的具体配方不同,但一般都包括哪些成分?水、无机盐、碳源、氮源+满足微生物对pH、特殊营养物质、氧气的要求C思考:1.什么是无菌技术?包括哪些方面?2.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?(P15旁栏思考)3.消毒和灭菌有何不同?4.常用的消毒和灭菌方法有哪些?泛指培养微生物操作中,所有防止杂菌污染的方法。无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。3、关于消毒和灭菌(1)
使用较为温和的物理或化学方法杀死部分微生物(不包括芽孢和孢子)。用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。灭菌消毒
灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。某些细菌生长到一定的阶段,细胞内形成一个圆形、椭圆形或圆柱形,对不良环境条件具较强抗性的休眠体。常用的消毒方法:煮沸消毒法,巴氏消毒法,紫外线或化学药剂消毒法常用的灭菌方法:灼烧灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌:100kPa121℃15-30min判断下列各项是否需要消毒或灭菌。如需要,选择合适方法。(1)豆浆(2)游泳池(3)超净工作台(4)玻棒、试管、吸管、锥形瓶(5)培养细菌用的培养皿(6)无菌水(7)牛肉膏蛋白胨培养基(8)接种环、接种针(9)实验操作者的双手牛奶接种室、接种箱或超净工作台接种工具,接种环、接种针或其他金属用具玻璃器皿(吸管、培养皿)实验操作---制备培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1.计算2.称量3.溶化4.灭菌:
将锥形瓶放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。5.倒平板:
待培养基冷却到50℃左右时,在酒精灯附近倒平板。?思考1溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯?
②加琼脂的目的是什么?可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于水中,减少误差作为凝固剂思考2在灭菌前,加棉塞再用牛皮纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么?②培养皿能否用高压蒸汽灭菌??在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞,在取出有培养基的锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用不能,因为培养皿要保持干燥,应该用干热灭菌.倒平板讨论1,2讨论3,4
可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。问题讨论1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以避免培养基中的水分过快地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?
空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。实验操作---纯化大肠杆菌接种技术:平板划线法稀释涂布平板法等等穿刺接种斜面接种核心:防止杂菌污染、保证培养物的纯度得到单个菌落主要用于菌种纯化,获得单菌落
主要用于菌落总数计数和纯化保存菌种、观察细菌的某些生化特性保藏厌氧菌种、研究微生物的动力㈠.培养基的制作是否合格㈡.接种操作是否符合无菌要求㈢.是否进行了及时细致的观察与记录结果分析与评价例1.关微生物营养物质的叙述中,正确的()A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐
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