“体外诊断试剂研发全流程管理培训课程-分析性能评价”精彩回顾之100问

5/5“体外诊断试剂研发全流程管理培训课程—分析性能评价”精彩回顾之100问（5）2022年11月17日，由中国医学装备协会应用评价分会主办、北京水木济衡生物技术有限公司承办的《体外诊断试剂研发全流程管理培训课》第三期分析性能评价课程正式开课，培训课程持续三天，邀请了多位行业资深专家授课，吸引了上百家企业参加。培训的最后一天，设置了讨论环节，多位专家就学员提出的问题进行了详细的解答，现将部分问题及专家回复整理如下。本节主要针对检出限相关问题。专家答疑43咨询问题LOB建立过程中，测试了60个数据，那这60个数据的数值中会有可能出现大于最后建立的LOB吗？专家答复完全有可能。空白样本单侧95%分布的上限为LoB，如下图所示，对于空白样本，其测量结果的5％（取α=0.05）高于LoB。44咨询问题LOD测试，如果现行业标准已经有相应指标要求，企业在研发阶段是不是可以直接用验证的方法测试即可？专家答复不可以。行业标准给出的检出限规定是基本要求，企业的产品不能低于该要求，企业在产品定型后应进行完整系统的性能评价，建立自己的检出限指标。以CRP试剂盒为例，YY/T1513—2017《C反应蛋白测定试剂盒》规定超敏CRP试剂盒的检出限不高于0.5mg/L,“0.5mg/L”是基本要求，事实上有的试剂盒检出限能到0.2mg/L，有的甚至到0.01mg/L。45咨询问题确认检出限和定量限时，一般都要求实验开展2天或以上，对于天间测值不稳定的样本，有何更好的方法?专家答复性能评价的时候，应避免使用不稳定的样本。如人源样本不易获得，也可以寻找可行的替代物。46咨询问题LOQ确定时是怎么设定允许的相对总误差TE和偏倚的呢？专家答复：根据临床需求和室间质量评价的允许误差设定总误差目标值。国内一些标准，例如WS/T403-2012《临床生物化学检验常规项目分析质量指标》，还有医药行业标准（YY标准）中的一些产品标准，都给出了常规项目的变异系数、偏倚、总误差要求。47咨询问题定量试剂盒，能否不做空白限和检测限，只做定量限？小于定量限就直接报告小于了？专家答复：不能。空白限、检出限、定量限三者的意义不一样。检出限指分析方法在规定实验条件下所能检出被测组分的最低浓度或最低量。定量限是指分析方法可定量测定样品中待测组分的最低浓度或最低量。下图是测量结果的分布及其推荐的结果报告方式。48咨询问题受限于样本的可获取性，检测血液中人源mRNA的产品，LoD可以设定为100%检出的浓度吗？还是必须做到95%？专家答复：可以以100%检出的浓度作为LoD。49咨询问题：胶体金产品，国内没有已上市的定量产品，在最低检测限研究中如何对样本进行定值？专家答复：分析性能评估所用样本的基本信息均需明确，例如样本来源、样本类型、采集和处理方式、稀释方式、定值过程及数据等。以新型冠状病毒（2019-nCoV）抗原检测试剂为例，研究中采用的新型冠状病毒样本，应采用合理方法对样本进行标定，包括拷贝数、Ct值、TCID50值等。试剂开发中一定要选好参照标准，如果是国内首创的新靶标，可以扩大范围，例如临床诊断标准、其他准确的方法、国外已上市的产品等等。50咨询问题定性胶体金产品，阳性判断值应当如何进行确认和定义，可否用最低检测限的研究替代该部分研究，同时用于研究的样品是否需要定量产品确定浓度？专家答复：阳性判断值和检出限是2个指标，意义不同，确定的方法也不同。一般情况下，根据所开发试剂的用途（筛查、诊断、确认），确定能接受的诊断灵敏度和特异性，通过ROC