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文档简介
实验一细胞凝集反应和细胞膜的渗透性第一页,共十五页,2022年,8月28日【课前预习】1.土豆凝集素的本质及其使红细胞凝集的原理?2.在等渗溶液中细胞一定能维持正常形态吗?3.预测红细胞在各种溶液中的溶血速度?第二页,共十五页,2022年,8月28日一、实验目的1了解细胞膜的表面结构;2了解细胞糖被的特点和功能,了解植物凝集素的作用3了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度第三页,共十五页,2022年,8月28日二、实验的原理1.细胞凝集反应细胞膜表面的有分支状糖外被,细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支状糖分子有关。凝集素(lectin)是一类含糖并能与糖分子专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞表面间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。第四页,共十五页,2022年,8月28日2.细胞膜的渗透性在低渗液中,红细胞很快吸水胀裂,称为溶血。在等渗液中,由于有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高,细胞也会吸水胀裂,由于各种物质透入细胞的速度不同,溶血的时间不同第五页,共十五页,2022年,8月28日三、实验用品1.器材:显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、烧杯、10ml移液管、试管、试管架2.材料:土豆块茎3.试剂:2%鸭血红细胞、抗凝血剂、PBS、土豆块茎、0.85%生理盐水、2%鸡红细胞、PBS缓冲液、Alsever溶液、0.17M氯化钠、0.17M氯化铵、0.17M醋酸胺、0.17M硝酸钠、0.17M草酸铵、0.17M硫酸钠、0.17M葡萄糖、0.17M甘油、0.17M乙醇、0.17M丙酮第六页,共十五页,2022年,8月28日四、实验步骤第七页,共十五页,2022年,8月28日(一)细胞凝集反应1.2%鸡血红细胞悬液制备新鲜鸡血加抗凝剂,生理盐水洗5次,每次2000r/min,离心5min,按红细胞压积用生理盐水配成2%鸡血红细胞悬液。2.土豆凝集素制备土豆2克,加10mlPBS,浸泡2h。3.细胞凝集反应土豆凝集素1滴、2%鸡血红细胞液1滴。载玻片上混匀,静置20min。4.对照PBS1滴、2%鸡血红细胞液1滴。第八页,共十五页,2022年,8月28日(二)细胞膜的渗透性1.低渗溶液试管一支:鸡血红细胞液1ml;蒸馏水10ml;结果溶血,溶液变透明。2.等渗溶液0.17M氯化钠、0.17M氯化铵、0.17M醋酸胺、0.17M硝酸钠、0.17M草酸铵、0.17M硫酸钠、0.17M葡萄糖、0.17M甘油、0.17M乙醇、0.17M丙酮第九页,共十五页,2022年,8月28日未溶血溶血第十页,共十五页,2022年,8月28日
【实验结果】
1.土豆凝集素能使鸡红细胞凝集,PBS对照液中红细胞分散均匀第十一页,共十五页,2022年,8月28日未凝血第十二页,共十五页,2022年,8月28日凝血第十三页,共十五页,2022年,8月28日2.细胞膜渗透性实验结果比较和分析第十四页,共十五页,2022年,8月28日【实验报告】1.简图表示凝集素使
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