中药学专业综合实验报告-不同激素配比对番红花侧芽诱导愈伤组织的影响

中药学专业综合实验报告实验名称：不同激素配比对番红花侧芽诱导愈伤组织的影响班级：13中药本科班学号：姓名：指导老师：南阳理工学院一、实验目的研究不同激素配比对番红花侧芽诱导愈伤组织的影响，为番红花组织培养提供基础资料。实验方法本实验所选用的番红花为张仲景国医国药学院药用植物院所栽培的西红花，在十月份中旬，选取番红花球茎幼嫩侧芽为外植体。本实验选用组合A：MS+NAA5mg/L+6-BA5mg/L、组合B：MS+2,4-D2mg/L+KT0.5mg/L、组合C：MS+6-BA5mg/L+2,4-D1mg/L、组合D：MS+KT5mg/L+IAA4mg/L、组合E:MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D2mg/L这5种生长激素组合和浓度配比。首先配制MS培养基，添加7g/L琼脂和20g/L蔗糖,加入上述植物激素，PH调配至5.8-6，把培养基均匀地分装在培养瓶里面，高压灭菌。用解剖刀切取番红花幼嫩侧芽，在水龙头下用清水冲洗两个小时，然后用70%乙醇浸泡消毒30S，取出，然后在浓度为0.05%的升汞溶液中灭菌8min，取出，用镊子和解剖刀剥去芽鞘，再用浓度为0.05%的升汞溶液灭菌3min，取出，最后用无菌水漂洗4次。用无菌滤纸吸干表面水分，分别斜切成0.5cm的小段，每段背划2个伤口，接种于灭菌的培养基，每个浓度接种40个。在接种第10天是统计萌动率，在接种低30天时，统计诱导率，观察愈伤组织的质地和色泽，分析最优激素配比。实验结果侧芽接种于不同激素配比条件下，在第10天时，统计的萌动率数据如下表1。表1接种第10天萌动率情况编号接种数萌动数萌动率%A402972.5B402665C402870D402050E401845侧芽接种于不同激素配比条件下，在第30天时，统计的愈伤组织诱导率情况如表2。表2接种第30天诱导率情况编号接种数出愈数诱导率%A402255B401025C401230D40512.5E401537.5侧芽接种于不同激素配比条件下，在第30天时，统计出愈伤组织的质地，情况如表3。由表3可以看出，A和E激素配比条件下愈伤组织的致密性较好。表3黑暗条件下愈伤组织的质地比较激素浓度接种数出愈数疏松致密数量百分数%数量百分数%A4022313.61986.4B4010550550C4012433.3866.7D405360240E40153201280西红花侧芽愈伤组织容易褐化（褐化会导致组织代谢紊乱，生长受阻，最终逐渐死亡）或者部分褐化，通过观察侧芽愈伤组织的颜色可以判断愈伤组织的褐化程度，情况如表4。表4黑暗条件下愈伤组织的色泽比较激素浓度接种数出愈数褐色黄色白色数量百分数%数量百分数%数量百分数%A402229.1836.41254.5B4010110660330C4012216.7866.6216.7D40524036000E4015320533.3746.7四、讨论分析根据表2得出的数据，B激素浓度配比MS+2,4-D2mg/L+KT0.5mg/L和E激素浓度配比MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D2mg/L对比，在2,4-D浓度相同的条件下，相同浓度的浓度6-BA的诱导率比KT高，可以得出结论0.5mg/L的6-BA比0.5mg/L的KT诱导效果好。A激素浓度配比MS+NAA5mg/L+6-BA5mg/L和E激素浓度配比MS+6-BA5mg/L+2,4-D1mg/L对比，在6-BA浓度相同的条件下,A激素浓度配比的诱导率较高，说明5mg/L的NAA比1mg/L的2，4-D诱导效果好。而在激素浓度配比组合中，A组诱导率明显优于其他组合。根据表3得出的数据，在A激素浓度配比（MS+NAA5mg/L+6-BA5mg/L）条件下，愈伤组织质地为致密的愈伤组织为86.4%，致密性优于其他组合。根